不同中藥材對三七黑斑病病原Alternaria panax Whetz抑制作用研究

陳昱君 ，王 勇 ，劉云芝 ，楊建忠 ，朱云飛

（1.文山學院 文山三七研究院，云南 文山 663000；2.文山華信三七股份有限公司，云南 文山 663000）

名貴藥材三七［Panax notoginseng（Burk.） F.H.Chen］經過數百年的人工馴化種植，形成現廣植于云南文山的栽培種。由于長期規模化單一種植，加之三七喜陰特性，常導致各種病害的暴發流行，給三七生產帶來巨大損失。三七黑斑病就是三七產區常年發生、流行的一個主要病害［1］，目前仍以施用殺菌劑為主進行防治。現代農藥在減輕病、蟲危害方面發揮了很大作用，但同時也會給環境帶來污染［2］。本研究擬通過不同中藥材對三七黑斑病病原Alternaria panax Whetz（人參鏈格孢）的控制作用研究，探討生物多樣性控制三七黑斑病的可行性。

1 試驗方法

1.1 室內抑菌試驗

選用本地生產的中藥材品種紫丹參（Salvia miltiorrhiza Bge）、川芎（Ligustici chuanxiong）、麥冬（Ophiopogon japonicus）、魚腥草（Houttuyniae cordata）、山奈（Kaempferia galanga L.）、澤蘭（Lycopus lucidus Turcz.Var.hirtus Regel）、玉竹（Polygonatum Odoratum）及三七植株，每種植物取100 g，清水洗凈，研磨成汁，經過濾后分別與瓊脂（8 g）、水（500 mL）混合成培養基，同時設清水培養基（清水500 mL+瓊脂8 g）為對照，滅菌備用。

在無菌條件下，取人參鏈格孢純化培養菌落，用打孔器等距離截取菌塊（φ=5 mm）接種于各中藥材和清水培養基上，每處理重復4次。接種后的培養基置于25 ℃光照培養箱中培養，并于接種后 1、3、5、7 d觀察菌絲生長情況，記錄菌落直徑，最后統計分析各處理菌絲日均生長量。

1.2 病原致病性測定

將三七、紫丹參、川芎、麥冬、魚腥草、山奈、澤蘭、玉竹等中藥材各50株按10株/盆種植于30×40 cm花盆中，待成活后，用濃度為6×106-7個/mL Alternaria panax Whetz 孢子懸浮液進行噴霧接種，套袋保濕24 h。

于接種后第9 d檢查各處理是否感病，觀察不同中藥材感病癥狀，統計發病株數，計算發病率。同時將表現病狀的植株帶回實驗室內進行病原分離鑒定。

2 試驗結果

2.1 室內抑菌試驗

由表1可看出，雖然參試中藥材菌絲生長速度均不同程度低于三七培養基，但川芎、紫丹參培養基的菌落擴展速度均達1.2 cm/d以上，其生長量與對照清水相比達極顯著水平，說明川芎、紫丹參的內含物質可滿足菌絲生長要求。魚腥草菌絲生長量略高于對照，但未達顯著水平，說明魚腥草對菌絲生長促進作用不明顯。而菌絲生長速度最慢的是澤蘭、山萘，菌落擴展分別僅為0.42 cm/d、0.43 cm/d；其次是麥冬和玉竹，分別為0.88 cm/d、0.98 cm/d。說明澤蘭、山萘、麥冬和玉竹具有仰制菌絲生長的物質，其中澤蘭、山萘抑制作用最為明顯，與對照相比達極顯著水平。

表1 不同中藥材與Alternaria panax Whetz菌絲生長關系（單位：cm/d）

2.2 病原致病性測定

由表2看出，三七、紫丹參、川芎、魚腥草接種后可表現感病癥狀。經室內分離培養鑒定，在三七、川芎、紫丹參病組織中檢出Alternaria panax Whetz，說明Alternaria panax Whetz可侵染三七、川芎、紫丹參。在魚腥草上未檢出Alternaria panax Whetz，說明該菌在魚腥草上雖然可侵入，但侵入后遇到寄主強烈的抑制反應（亦稱過敏反應），以致其不能進一步擴展，并隨著侵入組織的迅速崩解而死亡。玉竹、麥冬、山萘、澤蘭接種后未表現任何癥狀，說明該菌對上述植物未構成侵染。

表2 Alternaria panax Whetz致病性測定

3 結論

（1） Alternaria panax Whetz具有一定的寄主專化性，可侵染三七、川芎、紫丹參，導致形成典型病斑；可在魚腥草上形成拮抗性壞死斑。但該菌不能侵染澤蘭、山萘、麥冬、玉竹。 同時，室內抑菌試驗表明澤蘭、山萘、麥冬、玉竹所含物質均可抑制Alternaria panax Whetz，其中澤蘭、山萘抑制作用最強。

（2） 澤蘭、山萘、麥冬、玉竹均為多年生草本植物。澤蘭具有活血，益氣，消水功效，主治吐血，衄血，產后腹痛，并可菜藥兼用。山萘具有行氣溫中，消食，止痛功效，主治胸隔脹滿，脘腹冷痛，飲食不消，并可作烹飪調料。麥冬具有養陰生津，潤肺清心的功效，主治肺燥干咳，虛癆咳嗽，心煩失眠，腸燥便秘。玉竹具有養陰，潤燥，除煩，止渴功效，主治熱病陰傷，咳嗽煩渴，虛勞發熱，消谷易饑，小便頻數。4種藥材均為常用大宗藥材，有較好的開發應用前景。

（3） 利用生物多樣性持續控制農作物病害，已成為近年來國內外研究熱點，并取得了明顯成效［3-4］；但中藥材利用生物多樣性持續控制病害鮮有學者研究。本研究針對三七黑斑病的防治，篩選出可與三七間（套）種中藥材澤蘭、山萘、麥冬、玉竹，為進一步探索三七多樣性控病技術奠定了基礎。

［1］陳昱君，王勇.三七病蟲害防治［M］.昆明：云南科技出版社，2005：40-48.

［2］何光好.我國農藥污染的現狀及對策［J］.現代農業科技，2005（6）：57.

［3］朱有勇.生物多樣性持續控制作物病害理論與技術［M］.昆明：云南科技出版社，2004：48-68.

［4］胡新，許艷麗，李春杰.利用作物多樣性控制病害研究進展［J］.農業系統科學與綜合研究，2011（1）：118-122.