布洛芬注射液細菌內毒素檢查法標準的制訂

王靜靜，高天勤

(濱州醫學院附屬醫院，山東 濱州256603)

布洛芬是一種療效確切、不良反應小、安全性高的非甾體解熱鎮痛藥，臨床主要用于治療感冒發熱、頭痛、牙痛、風濕及類風濕性關節炎以及外科手術后的疼痛等［1］。布洛芬注射液是新近開發的劑型，進一步擴大了其臨床范圍，方便了患者。筆者參照《中國藥典》2010年版進行試驗，建立了該品種的細菌內毒素檢查法，現報告如下［2］。

1 實驗材料

布洛芬注射液，規格 400 mg(4 mL)，批號 111021、111022、11023為山東某公司生產。細菌內毒素工作標準品，批號150601－201070，效價140 EU/支(中國藥品生物制品檢定所)。鱟試劑(TAL)批號:1102240(湛江博康海洋生物有限公司，規格:0.1 mL/支);批號1103172(湛江安度斯生物有限公司，0.1 mL/支)。靈敏度(λ)均為 0.25 EU·mL－1，且經靈敏度復核均符合規定。細菌內毒素檢查用水(BET 水)批號w2010－1，內毒素含量≤0.015 EU·mL－1(中國藥品生物物品檢定所)。

2 方法與結果［3］

2.1 細菌內毒素限值(L)的確定 布洛芬注射液的臨床使用最高劑量為每6 h靜脈滴注400～800 mg，滴注時間30 min以上，按我國成人體重60 kg計算，每公斤體重每小時的最大用藥量(M)為13.33 mg·(kg·h)－1。根據公式 L=K/M，注射劑 K=5 EU·(kg·h)－1，計算得 L=0.375 EU·mg－1，即本品的內毒素限值為每1 mg中含內毒素的量應小于0.375 EU。

2.2 干擾試驗

2.2.1 供試品干擾預試驗 按藥品說明書要求，市售鱟試劑(TAL)通常為 0.5 ～0.03 EU·mL－1，根據公式 MVD=CL/λ，則布洛芬注射液的最終對應有效稀釋倍數為75、150、300、600和1 200。先用BET水將供試品稀釋成上述倍數的系列濃度，分別用上述兩個廠家的鱟試劑考察上述濃度稀釋液的干擾情況，每一濃度做2管，同時做陰性對照和標準對照，結果見表1。由表1可知，供試品在稀釋75、150、300、600和1 200倍濃度下對試驗均沒有干擾作用。

表1 布洛芬注射液干擾預試驗結果

2.3.2 供試品干擾試驗 為了最終確認是否存在干擾因素的影響，取布洛芬注射液用細菌內毒素檢查用水分別稀釋，使其最終干擾試驗稀釋倍數為75倍，按《中國藥典》2010年版(二部)附錄中的“內毒素檢查供試品干擾試驗”項進行試驗，結果見表2。

干擾試驗結果表明，采用安度斯公司和博康海洋公司生產的 TAL，Et和 Es均在0.5～2.0λ 范圍內，確認這2個廠家的TAL在供試品稀釋75倍無干擾影響。

表2 布洛芬注射液細菌內毒素干擾試驗結果

2.5 供試品檢查試驗 取供試品，按《中國藥典》2010年版(二部)附錄ⅪE細菌內毒素檢查法分別用兩個廠家的鱟試劑考察其內毒素限值，結果見表3。由表3可知，三批供試品每1 mL中含內毒素量均小于0.375 EU。

表3 布洛芬注射液細菌內毒素檢查試驗結果

3 討論

布洛芬是20世紀60年代上市的現今臨床使用最普遍的非甾體抗炎藥之一，國內外藥典均有收載，布洛芬良好的解熱鎮痛效果帶動了眾多劑型的開發上市，但多為口服劑型和局部給藥劑型。布洛芬注射劑的研制，是眾多疼痛和發熱患者的福音。

眾所周知，引起熱原反應是注射液常見的問題之一。因此，檢查注射液中的熱原質是確保藥品質量的關鍵環節。目前，常見的檢查方法為家兔法和鱟試劑法。布洛芬注射液具有解熱鎮痛作用，若采用家兔法進行熱原質的檢查可能會因其藥效學作用而出現假陰性結果［3］。鱟試劑因其具有方法簡單、成本低等優點而被廣泛采用［4］。本試驗在參考《中國藥典》2010年版的基礎上，建立了布洛芬注射液的細菌內毒素檢查標準為:取本品，依法檢查(《中國藥典》2010年版二部附錄Ⅺ E)，每1 mg中含內毒素量應小于0.375 EU。

［1］徐雋，宋紅萍，劉忠，等.布洛芬注射液的安全性試驗［J］，中國醫院藥學雜志，2011，31(13):1093 －1095.

［2］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版(二部)［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄Ⅺ E.

［3］程春雷，高天勤，曹珍艷.注射用鹽酸丙帕他莫的細菌內毒素檢查［J］.中國醫藥工業雜志，2011，42(3):219－221.

［4］范治云，國明.眼用平衡鹽溶液細菌內毒素檢查標準的制訂［J］.齊魯藥事，2012，31(8):454 －455.