三七中黃酮類成分的研究進展

李 媛，李 強，姜 澤

(1.東營市藥品檢驗所，山東東營257091;2.吉林省食品藥品檢驗所，吉林長春130033)

三七［Panax pseudoginseng var notoginseng(Burk.)Hoo＆Tweng或Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen］為五加科人參屬植物，又名參三七、田七、山漆、滇三七、金不換等，分布于我國云南文山及廣西壯族自治區靖西等極小范圍內，是我國傳統的名貴藥材之一［1］。《本草綱目》記載:三七“頗似人參之味”，“止血散血定散”，能治一切血癥。《本草綱目拾遺》稱“三七頗似人參，人參補氣第一，三七補血第一，味同而功亦同”。三七味甘、微苦，性溫，歸肝、胃經，主要功能為散瘀止血，消腫定痛，用于咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外傷出血、胸腹刺痛、跌打腫痛等［2］。

三七化學成分的研究是從上世紀30年代開始的，80年代的大量研究表明，三七含有多種有效成分，皂苷為主要有效成分之一，具有多種生理活性;此外，三七還含有止血的有效成分三七素，以及多糖、氨基酸、揮發油、脂肪酸、植物甾醇、黃酮、脂肪族炔烴化合物及微量元素等［3～5］。目前對于三七皂苷的研究已經非常深入，但對于黃酮類成分的研究卻非常少。本文對目前有關三七黃酮類成分的研究做一綜述，為以后進一步研究三七黃酮類成分提供參考。

1 三七中的黃酮類成分

黃酮類成分是廣泛存在于自然界的一大類化合物，是一類具有C6－C3－C6基本母核的天然產物。上世紀末魏均嫻等［6，7］從三七莖葉中首次分離得到一種黃酮醇苷，經鑒定該黃酮醇苷為槲皮素－3－O－槐糖苷，從三七絨根中分離得到槲皮素(Quercetin)、山柰酚(Kaempferol)兩種黃酮醇類成分。之后關于三七黃酮類成分的研究沒有大的突破，也沒有再發現新的黃酮類成分。2004年鄭瑩［8］在其畢業論文中提到從三七莖葉中分離得到了7種黃酮類成分，并利用IR、UV、MS、1H－NMR、13C－NMR等現代光譜學手段輔以其他的定性方法鑒定出了6種黃酮類化學成分的結構。它們分別是山柰酚(Kaempferol)，山柰酚 －3－O－β－D－半乳糖苷(Kaempferol 3－O－β－D－galactopyranoside)，山柰酚 －3－O－β－D－半乳糖(2→1)葡萄糖苷［Kaempferol 3－O－(2``－β－D－glucpyranosyl)－β－D－galactopyranoside］，山柰酚－7－O－α－L－鼠李糖苷(Kaempferol 7－O－α－L－rhamnoside)，槲皮素(Quercetin)，槲皮素－3－O－β－D－半乳糖(2→1)葡萄糖苷［Quercetin 3－O－(2``－β－D－glucpyrano-syl)－β－D －galactopyranoside］。除山柰酚和槲皮素之外，其余化合物皆是首次從三七莖葉中分離得到。

結構式如圖1，表1。

圖1 三七黃酮類成分的母核

表1 三七黃酮類各結構式對應成分名稱

2 三七黃酮類成分的提取、分離、純化的研究

2.1 三七黃酮類成分的提取 由于各種黃酮類化合物在植物體中存在的部位不同，結合的狀態也可能不一樣。在花、葉、果等組織中主要以苷的形式存在，在木部的堅硬組織中則多為非苷類的游離狀態，即苷元或黃酮配糖基形式。根據黃酮類成分在植物中的不同部位采取不同的提取方法，由植物的心材中提取黃酮類成分，可以用乙醚或石油醚為溶劑直接提取;由植物的樹皮或根中提取黃酮類成分，多采用脂溶性溶劑提取后再用極性溶劑提取;由植物花、果或葉中提取黃酮類成分(多含苷類)，常用水或乙醇為溶劑進行提取，為了比較方便的除去伴存的葉綠素雜質，減少對黃酮苷類精制的困難，一般多用熱水自原料中提取。三七中黃酮類成分的提取方法主要有以下幾種方法:

2.1.1 溶劑提取法 魏均嫻等［7］從三七絨根中提取出三七黃酮，主要用乙醇對三七絨根進行提取，得乙醇提取物再加熱水溶解，溶于熱水部分加入堿式醋酸鉛溶液使之沉淀，得沉淀物混懸于水中加入稀硫酸脫鉛，脫鉛后的水溶液上聚酰胺層析柱，用20%乙醇洗脫，得三七黃酮A部分和黃酮B部分。黃酮A部分硅膠柱層析，用三氯甲烷－甲醇(98∶2)洗脫得槲皮素;黃酮B部分溶于丙酮，反復除去丙酮不溶物，進行硅膠柱層析，三氯甲烷－甲醇(85∶15)洗脫得三七黃酮B。三七黃酮B的化學結構還有待于進一步研究。

2.1.2 堿水提取法 張志信［9］對堿水提取的pH值、溫度、液料比以及提取時間進行了正交實驗，最終優化出堿水提取三七總黃酮的條件。用pH=10的稀堿液做溶劑，液料比為30∶1，浸提溫度為80℃，提取兩次，每次40 min。采取此工藝提取三七黃酮類成分成本低，易于工業化生產。

2.1.3 微波－堿水提取法 工藝參數:pH=8、微波功率為中檔、液料比為1 g∶40 mL、微波作用時間為10 min、提取2次。張志信等［9］做了微波－堿水提取法和堿水提取法的比較實驗，得出微波－堿水提取法的提取率遠遠高于堿水提取法，主要是因為微波處理可以提高細胞的破壁率，從而使黃酮類化合物的提取率大幅度上升。但是這種方法不適合工業化生產。

2.2 三七黃酮類成分的分離及純化 黃酮類化合物分離純化的方法主要有大孔樹脂吸附法、各種柱層析法、HPLC法、離心薄層層析法、制備薄層層析法、紙層層析法和超臨界色譜法等［10］。

2.2.1 大孔樹脂分離純化法 大孔吸附樹脂具有物理化學穩定性高、吸附選擇性獨特、吸附容量大、解吸容易、機械強度高、耐污染、流體阻力小、可以多次反復使用、再生比較容易、節省費用等特點。廣泛用于工業脫色、廢水處理、藥物分析、臨床鑒定、抗生素及生化物質的分離純化等領域［11～13］。

大孔樹脂是20世紀60年代發展起來的一種新型吸附劑，它是一類不含交換基團且具有大孔結構的分離材料。具有很好的大孔網狀結構和較大的比表面積，通過物理吸附從溶劑中有選擇的吸附有機物質，從而達到分離的目的［14］。

AB－8大孔吸附樹脂為聚苯乙烯型，弱極性聚合物吸附劑，研究表明AB－8樹脂對黃酮類物質的分離、富集能力較好［15］。

通過測定分析3種吸附樹脂對三七黃酮的吸附特性綜合考慮多方面因素，AB－8樹脂具有適當孔徑、較高比表面積、較大比重、三七黃酮吸附量大、解吸容易、吸附后浸膏黃酮含量高等特點，其性能優于其他幾種樹脂。AB－8樹脂是一種性能良好的三七黃酮吸附劑。為使樹脂吸附法成功的應用于三七黃酮的生產，除選用性能優良(特別是增大對黃酮的選擇性吸附)的吸附劑外，還要配合最佳的工藝條件，才能取得最佳的分離效果［16］。

2.2.2 柱層析分離純化法

2.2.2.1 聚酰胺分離純化法 聚酰胺(polyamide)是通過酰胺基聚合而成的一類高分子化合物。自20世紀90年代發現聚酰胺對酚性物質的層析分離性能后，首先應用于黃酮、酚類等天然產物的分離。目前，聚酰胺層析是分離黃酮苷及黃酮苷元的最有效的方法［17］。因此，三七黃酮類成分的分離純化多用聚酰胺法。

2.2.2.2 其他柱層析法 硅膠柱層析法，此方法的應用范圍最廣，不僅可以分離黃酮苷，也可以分離各種黃酮苷元［18］。葡聚糖凝膠柱層析，主要是靠分子篩作用分離黃酮苷類，在洗脫時，一般按分子大小順序洗出柱體。李文魁等［19］用此法從朝鮮淫羊藿地上部分分離得到2種黃酮苷類化合物。

2.2.3 其他方法 應用HPLC法、離心薄層層析法、制備薄層層析法、紙層層析法和超臨界色譜法分離黃酮苷及其苷元的實驗有很多，但是沒有上述兩種方法常用，而且大孔樹脂法和柱層析法使用方便成本較低。

3 三七黃酮類成分的藥理研究

三七黃酮類成分能直接擴張動脈血管，增強心肌收縮力和穩定心率，改善血循環及防治血栓等［20］。另有實驗表明三七黃酮類成分能對抗垂體后葉素引起的T波改變，因此，可以對缺血心肌起到保護作用［21］。魏均嫻等［7］指出三七黃酮類成分與皂苷合用，生理活性最強，分開使用則證明黃酮類成分能顯著增加心肌冠脈流量。槲皮素對P388白血病細胞有一定活性［22］。槲皮素不僅對多種致癌劑、促癌劑有拮抗作用，而且可以抑制多類惡性腫瘤細胞的生長［23］。

三七黃酮類成分對人肝癌SMMC－7721有一定的抑制作用，并呈時間及劑量依賴性關系。三七莖葉黃酮類成分可以改變SMMC－7721細胞的周期分布，即G1期細胞百分率有所下降，S期百分率增加，動員SMMC－7721由G0/G1期進入S期，使細胞堆積，阻止S期細胞進入G2/M期，從而抑制細胞增殖［9］。

4 小結與討論

三七是我國的傳統中藥材之一，由于三七中黃酮類成分含量過少，所以研究的很少更沒有將其開發成為商品。三七黃酮類成分含量低，若要單獨以黃酮類成分作為目標產物單一的開發三七黃酮類成分，必將會使成本大幅度提高，而且會造成資源浪費。因此，要考慮在開發三七皂苷的同時來開發三七黃酮類成分。王興文教授的水提三七皂苷工藝已經非常成熟，并且實現了產業化生產［24］。若要在該水提工藝基礎上來開發三七黃酮類成分會使成本降低，并且容易實現產業化，也為三七黃酮類成分開發成藥品、保健品及化妝品提供保證。

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