菟仙海蚣膠囊治療少精、弱精癥的臨床與實驗研究

徐瑛瑛 馬紅 張銀川 張春霞 劉喜平

菟仙海蚣膠囊治療少精、弱精癥的臨床與實驗研究

徐瑛瑛 馬紅 張銀川 張春霞 劉喜平

目的觀察菟仙海蚣膠囊治療少精、弱精癥的療效并探討其作用機理。方法170例患者隨機分為兩組，治療組口服菟仙海蚣膠囊，對照組口服五子衍宗丸治療。觀察兩組療效，并通過動物實驗觀察菟仙海蚣膠囊對該模型大鼠睪丸及附睪指數、精子數量等指標的影響。結果治療組療程療效優于對照組(P＜0.01)。實驗表明菟仙海蚣膠囊各劑量組均可提高模型大鼠附睪指數(P＜0.01或P＜0.05)、增加精子數量和精子活率(P＜0.01或P＜0.05)、升高血清中的FSH及LH含量(P＜0.05)。結論菟仙海蚣膠囊療效明顯，其作用機理可能與提高附睪指數、促進FSH、LH及TS的分泌有關。

不育;男性;少精子癥;菟仙海蚣膠囊

筆者于2009年1月至2011年3月對應用菟仙海蚣膠囊的110例少精、弱精患者進行了臨床觀察，同時對菟仙海蚣膠囊進行了動物試驗研究，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本組170例均為我院門診患者，所有病例的診斷均參照《WHO人類精液及精子-宮頸精液相互作用實驗室檢驗手冊》［1］(4版)制定的精液數量參考值。納入與排除標準為，凡年齡在23～40歲，結婚同居2年以上，性生活正常，夫妻雙方未采取任何避孕措施，女方正常，男方精子檢查符合診斷標準，無嚴重軀體性疾病和其他生殖系統器質性病變及感染性疾病者納入觀察對象;未按規定用藥、無法判斷療效或資料不全，影響療效或安全性者，均不納入標準。將臨床確診的170例患者采用數字表法隨機分為2組。治療組110例，年齡23～40歲，平均(30.0±20.0)歲，病程2～10年，平均(5.0±1.4)年。少精癥12例，少精弱精癥79例;弱精癥19例。對照組60例，年齡23～40歲，平均(29.0±1.80)歲;病程2～9年，平均(4.0±1.40)年;少精癥6例，少精弱精癥44例，弱精癥10例。2組年齡、病程、精液常規及合并癥等經統計學處理，差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 治療組口服菟仙海蚣膠囊(由菟絲子 、仙靈脾、海馬、蜈蚣等組成，定西市婦幼保健院制劑，專利號201010125047，每粒 0.25 g，每克含生藥 3.14 g)。4 粒/次，3次/d，溫開水送服;對照組口服五子衍宗丸(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠，國藥準字Z11020188):10粒/次，3次/d。療程均為3個月。

1.3 注意事項 ①治療期間停止其他任何藥物，囑患者禁煙酒、忌高溫作業及熱水泡浴，并囑患者配偶幫助患者減輕壓力、增強信心。②肝腎功能不全者禁用，有過敏體質或對魚蝦有過敏者慎用。

1.4 檢測方法 受檢者禁欲4～7 d后到本院取精室，以手淫體外排精方式采集精液于專用干燥消毒杯內，置于25～37℃水浴箱內，一小時內液化后，由檢驗科采用WLJY-9000型偉力彩色精子質量檢測系統檢查，l周后復查1次，取兩次精液分析結果的平均值。

1.5 統計學方法 SPSS 17.0統計軟件包，計數資料用χ2檢驗Ridit分析，計量資料數據用均數±標準差(±s)表示，顯著性檢驗t檢驗。

1.6 結果

1.6.1 療效標準 根據WHO《不育夫婦標準檢查與診斷手冊》［2］并參照《中藥新藥臨床研究指導原則》［3］中有關療效標準進行評定。臨床治愈:少精癥治療后精子密度≥20×109/L，弱精癥精子活動力a級加b級≥50%或a級≥25%，成活率1 h≥60%;或治療后女方懷孕。顯效:少精癥治療后精子密度提升≥50%，弱精癥精子活動力a級加b級提升≥25%或a級提升≥12.5%，成活率1 h提升≥50%，但未達到正常指標。有效:少精癥治療后精子密度提升≥15%，弱精癥治療后精子活力a加b級或a級提升≥5%，成活率1 h提升≥15%;無效:治療后精子密度、成活率＜15%及精子活力提升＜5%或無變化。

1.6.2 兩組療效比較 治療組110例，臨床治愈56例（50.90%），顯效33例(30.00%)，有效13例(11.81%)，無效8例(7.27%)，臨床治愈率50.90%，總效率92.73%;對照組60例，臨床治愈13例（21.67%），顯效17例(28.33%)，有效10例(16.67%)，無效 20例(33.33%)，臨床治愈率21.67%，總效率66.67%。2組比較差異均有統計學意義(P＜0.01)，提示治療組療效優與對照組。

2 實驗研究

2.1 材料與方法

2.1.1 動物 SD大鼠，SPF級，雄性，體重280～320 g，由甘肅中醫學院科研實驗中心提供，動物實驗設施使用證SYXK(甘)2004～0006，實驗動物質量合格證號SCXK(甘)2004～0006，發證單位甘肅省科技廳;動物分籠飼養，食固體SPF級飼料，由北京市科奧協力飼料有限公司提供，合格證號:京動許字(2000)第015號。

3 討論

菟仙海蚣膠囊中菟絲子具有補腎養肝，益精固澀的作用，為君藥，仙靈脾補腎壯陽，仙茅補腎陽并能助脾胃運化，增進食欲，二藥為臣藥。現代研究表明［5］，補腎壯陽藥有類激素樣作用，含鋅量最高，能促進睪丸發育，興奮性機能，促進精液分泌和精子質量，對改善睪丸曲細精管及間質細胞的損害均有一定效果。海馬，具有補腎壯陽，散結消腫，調和氣血的功能，為佐藥;蜈蚣，熄風止痙，解毒散結，通絡止痛，為使藥。全方配伍具有滋肝補腎，益精壯陽，活血通絡，疏通精道，健脾暖胃之效，使精出有源、精行通暢。

動物實驗證明，菟仙海蚣膠囊大劑量能夠明顯增加生精障礙模型大鼠的精子活率和精子數量數，與模型組比較差異均有統計學意義，且中、小劑量也能明顯升高該模型的精子活率。

從本實驗研究結果得知:模型組大鼠的FSH、LH、TS均較空白對照組為低，表明在本實驗中腺嘌呤能夠抑制以上激素的分泌或合成，其中菟仙海蚣膠囊大劑量能夠明顯升高該模型大鼠血清中的FSH及LH含量，在促進生精、提高精液質量等方面顯示出良好的療效。

［1］世界衛生組織．WHO人類精液及精子-宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊.第4版.北京:人民衛生出版社，2001:5．

［2］世界衛生組織.不育夫婦標準檢查與診斷手冊.北京:科學出版社，1994:19．

［3］中華人民共和國衛生部.中藥新藥臨床研究指導原則第1輯，1993:192．

［4］楊阿民，李曰慶，李海松，等.補腎生精丸對腺嘌呤所致生精細胞損傷模型大鼠的干預作用.北京中醫藥大學學報(中醫臨床版)，2006，13(3):1-3．

［5］王琦.中醫生殖醫學的歷史現狀與展望.中國性科學，2005，14(4):3-7．

743000 甘肅省定西市婦幼保健院(徐瑛瑛 張銀川張春霞);定西市安定區疾控中心(馬紅);甘肅中醫學院(劉喜平)

2.1.2 藥品、試劑與儀器 菟仙海蚣膠囊由菟絲子、淫羊藿、海馬等五味藥物按一定比例組成，(定西市婦幼保健院制劑，專利號201010125047.2)，0.25 g/粒，每克含生藥 3.14 g，實驗時用生理鹽水配成相應濃度的溶液。五子衍宗丸(北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠，國藥準字Z11020188);羧甲基纖維素鈉(河北省文安縣盛源纖維素廠，批號20090227);腺嘌呤(洛陽德勝化工有限公司，批號20080911);促卵泡激素FSH、促黃體生成素LH、睪酮T放免試劑盒(北京福瑞生物工程公司，批號:20090612)。儀器:偉力精子檢測系統(WL-9000型，北京偉力新世紀科技發展有限公司);全自動生化分析儀(ALCYON300美國雅培);全封閉組織脫水機(Tissue-Tek?VIPTM5Jr，日本櫻花);顯微鏡(BH-2，日本OLYMPUS);旋轉蒸發儀(R-200，瑞士BUCHI);電子天平(BL150，北京Sartorius)。

2.1.3 動物分組與給藥方法 參考文獻［4］的方法，3個月齡SD雄性大鼠，280～320 g，72只，自由進食飲水，適應3～4 d后，將其隨機分為6組，即空白組、模型組、五子衍宗丸對照組，大劑量組、中劑量組和小劑量組，每組12只，分籠飼養，每籠6只。空白對照組每天灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉10 μl/g;模型對照組灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉5 μl/g，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混懸溶液(250 μg/g)5 μl/g;五子衍宗丸組灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉5 μl/g，40 min后灌胃24%的五子衍宗丸溶液5 μl/g;菟仙海蚣膠囊大劑量組每天灌胃中藥浸膏5.4 g生藥/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混懸溶液(250 μg/g)5 μl/g;中劑量組每天灌胃中藥浸膏2.7 g生藥/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混懸溶液(250 mg/kg)5 μl/g;小劑量組每天灌胃中藥浸膏1.35 g生藥/kg，40 min后灌胃5%的腺嘌呤混懸溶液(250 μg/g)5 μl/g。1次/d，實驗總持續時間均為40d，實驗期間每7 d稱體質量1次，調整給藥量，每天每100 g體質量大鼠的給藥總量為1 ml。

2.1.4 檢測指標 ①各組大鼠睪丸、附睪指數及精子數量、精子活率的變。②對生精細胞損傷模型大鼠生殖內分泌激素FSH、LH及T的影響。

2.2 結果

2.2.1 各組大鼠睪丸、附睪指數及精子數量、精子活率的變化結果見表1。模型組睪丸指數與空白組比較無顯著性差異(P＞0.05)，附睪指數較空白組明顯降低(P＜0.01)，精子活率和精子數量均明顯降低(P＜0.01);菟仙海蚣膠囊各劑量組及陽性對照組睪丸指數無明顯變化、但可提高附睪指數(P＜0.01或P＜0.05)、各劑量組均可增加精子數量和精子活率(P＜0.01或P＜0.05)。

2.2.2 模型大鼠生殖內分泌激素的影響 結果見表2。模型組大鼠的FSH、LH、TS均較空白對照組為低(P＜0.01)，表明在本實驗中腺嘌呤能夠抑制以上激素的分泌或合成，其中菟仙海蚣膠囊大劑量能夠明顯升高該模型大鼠血清中的FSH及LH含量(P＜0.05)。

表1 各組大鼠睪丸、附睪指數及精子數量、精子活率的變化(x ± s，n=12)

注:與空白組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，與模型組比較※P＜0.05，※※P＜0.01

組別 劑量(g/kg) 睪丸指數(g/kg) 附睪指數(g/kg) 精子數量(109L) 精子活率(%)正常對照組0.65±0.036 0.28±0.022 20.59±1.77 92.9±2.9模型對照組 0.25 0.62±0.038 0.20±0.021▲▲12.65±1.53▲▲72.7±6.5▲▲五子衍宗組 1.20 0.61±0.025 0.25±0.027※13.80±1.90 78.6±5.7※菟仙海蚣大 5.40 0.63±0.028 0.29±0.019※※19.63±1.83※※90.0±6.8※※菟仙海蚣中 2.70 0.63±0.041 0.27±0.032※※16.89±2.11※※89.7±5.3※※菟仙海蚣小 1.35 0.62±0.027 0.26±0.028※15.73±2.23※78.4±6.1-※

表2 菟仙海蚣膠囊對模型大鼠生精細胞損傷模型大鼠內分泌激素的影響(±s)

注:與空白組比較▲P＜0.05，▲▲P＜0.01，與模型組比較※P＜0.05，※※P＜0.01

組別 劑量(g/kg) 例數 TS(nmol/L) LH(mIU/L) FSH(mIU/L)12 9.43±1.44 1.15±0.19 1.52±0.12模型組 0.25 11 7.66±1.55▲▲0.73±0.13▲▲1.04±0.13▲▲五子衍宗丸組 1.2 12 8.78±1.39※0.83±0.16※1.36±10.21※※大劑量組 5.4 12 9.03±1.16※0.87±0.14※1.05±0.20中劑量組 2.7 12 7.05±0.88 0.74±0.13 1.05±0.13小劑量組空白組-1.35 12 7.12±0.92 0.75±0.21 1.04±0.11