產菊粉酶菌株的篩選及產酶條件優化

黃玉玲，王桂峰，隆小華，*，劉兆普，王 琳，王 博

(1.南京農業大學江蘇省海洋生物學重點實驗室，江蘇南京 210095;

2.山東省農墾科技發展中心，山東濟南 250014)

產菊粉酶菌株的篩選及產酶條件優化

黃玉玲1，王桂峰2，隆小華1，*，劉兆普1，王 琳1，王 博1

(1.南京農業大學江蘇省海洋生物學重點實驗室，江蘇南京 210095;

2.山東省農墾科技發展中心，山東濟南 250014)

從鹽堿地菊芋根際土壤中篩選出112株產菊粉酶菌株，并從中得到一株酶活較高的真菌A－6，經菌落觀察以及采用真菌通用引物ITS1和ITS4 PCR擴增RNA基因序列，測序鑒定結果為煙曲霉Aspergillus fumigatus。對其產酶條件進行單因素分析結果顯示，真菌A－6的pH耐受范圍較廣，且具有一定的耐鹽性。經正交實驗進行產酶條件優化，確定了A－6的最佳產酶條件為菊芋提取液(EJA)100g/L，酵母膏(YE)25g/L，NaCl為5g/L，NH4H2PO45g/L，pH為5，30℃，170r/min下振蕩培養3d，酶活最高為13.29U/mL。

篩選，菊粉酶，煙曲霉，產酶條件，優化

菊芋(Helianthus tuberosus)又名洋姜，適應性廣、耐貧瘠、耐鹽堿。菊芋塊莖中80%為菊粉(Inulin)。菊粉又稱菊糖，是一種果聚糖，由果糖在1分子蔗糖上以β－2，1連接而成，聚合度30左右［1］，分子量3000～5000碳單位。菊粉可水解生成果糖，酸法水解產量較高，但成本高且無機離子含量高。酶法水解具有方法簡便、成本低、產物純度高的優點，所以菊粉酶的研究成為熱點［2－3］。八十年代，國外便開始了酶法水解菊粉生產果糖漿的研究，先后開展了菌株篩選、酶學性質以及工業生產固定化技術等研究［4－5］。我國菊粉酶的相關研究起步較晚，但大部分工作僅停留在菌株篩選以及酶學研究階段，但由于產酶量和某些作用機制的問題［6］，尚未有成功應用于工業發酵生產的報道，因此進一步篩選性能優良的高產菌株仍然十分必要?！?br>