纖維素酶系堿性條件下的選擇性失活及應用

徐 勇，蔡 鵬，范 麗，杭 琪，勇 強，2，余世袁，2

(1.南京林業大學化工工程學院，江蘇南京 210037;

2.林木遺傳與生物技術教育部重點實驗室，江蘇南京 210037;

3.江蘇省生物質綠色燃料與化學品重點實驗室，江蘇南京 210037)

纖維素酶系堿性條件下的選擇性失活及應用

徐 勇1，2，3，蔡 鵬1，2，3，范 麗1，2，3，杭 琪1，勇 強1，2，余世袁1，2

(1.南京林業大學化工工程學院，江蘇南京 210037;

2.林木遺傳與生物技術教育部重點實驗室，江蘇南京 210037;

3.江蘇省生物質綠色燃料與化學品重點實驗室，江蘇南京 210037)

里氏木霉產纖維素酶系中的內切葡聚糖酶(CMCase)、纖維二糖水解酶(CBH)和β－葡萄糖苷酶三大酶類在堿性處理條件下會發生快速、選擇性失活。在pH9.00和(25±1)℃的條件下靜置處理纖維素酶液30min，CMCase和CBH酶組分主要發生可逆變性失活，而β－葡萄糖苷酶發生不可逆變性失活，它們的殘余酶活力分別為58.8%、56.6%和5.7%，相對比例可達到10.3和9.9。通過堿性處理能夠得到低β－葡萄糖苷酶活力的纖維素酶制劑，可以顯著提高其定向酶水解纖維素制備纖維低聚糖的生產性能，并生成以纖維二糖為主包括少量纖維三糖的纖維低聚糖。以0.1% (v/v)堿處理纖維素酶定向水解10g/L紙漿24h，纖維低聚糖的酶解得率為6.73%，占總糖類的78.2%，比天然酶反應體系提高53.6%。

纖維素酶系，里氏木霉，酶選擇性失活，定向酶水解，纖維低聚糖

里氏木霉(Trichoderma reesei)是研究和制備纖維素酶最常用的經典菌株之一［1－2］，通過底物的誘導和發酵調控作用它可以分泌出多種不同類型的聚糖水解酶蛋白組分，進而組成不同的酶系或復合酶系。其中纖……