岷山紅三葉草異黃酮合酶基因的克隆及序列分析

胡煥煥，劉 瑞，姬國杰，李衛(wèi)東，豐慧根，*

(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學院生命科學技術(shù)系，河南新鄉(xiāng) 453000;

2.新鄉(xiāng)醫(yī)學院三全學院，河南新鄉(xiāng) 453000)

岷山紅三葉草異黃酮合酶基因的克隆及序列分析

胡煥煥1，劉 瑞2，姬國杰1，李衛(wèi)東1，豐慧根1，*

(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學院生命科學技術(shù)系，河南新鄉(xiāng) 453000;

2.新鄉(xiāng)醫(yī)學院三全學院，河南新鄉(xiāng) 453000)

從岷山紅三葉克隆異黃酮合酶基因，并對序列進行比對和進化分析。建立岷山紅三葉愈傷組織培養(yǎng)體系，采用RT－PCR擴增從愈傷組織總RNA中分離了異黃酮合酶基因，并將其克隆到pGEM－T Easy載體，測序，得到全長1575bp的片段。序列分析表明，異黃酮合酶基因含1575個核苷酸，和大豆等其他植物中異黃酮合酶具有很高的同源性。

岷山紅三葉，異黃酮合酶，基因克隆，序列分析

岷山紅三葉產(chǎn)于甘肅省岷縣，也稱紅車軸草，是著名珍稀的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)牧草。1944年由美國引進，在岷縣已有60余年的種植歷史，經(jīng)多年的選育、馴化，成為當?shù)氐膬?yōu)勢草種。1987年經(jīng)全國飼料牧草品種審定委員會審定登記并命名為岷山紅三葉，被譽為中國第一草［1］。岷山紅三葉中異黃酮含量是1.0%～2.6%，是大豆異黃酮含量的8～10倍［2］。其提取物異黃酮類的主要成分是芒柄花素、鷹嘴豆牙素、異黃酮、染料木素、染料木甙、大豆甙元、大豆甙等，其中鷹嘴豆牙素A和芒柄花素含量最高［3］。并且含有大豆所沒有的異黃酮—鷹嘴豆芽素A、B(被譽為“女性生命素”)，而且比大多數(shù)異黃酮的雌激素樣活性高。紅三葉異黃酮作為天然植物雌激素是深受國際市場歡迎的健康食品。研……