一種代謝蘆薈苷的微生物篩選及其酶學性質初步研究

牛艷豐，寇正福，劉坐鎮，，許建和，江邦和

(1.華東理工大學，上海200237;2.上海華震科技有限公司，上海 200237)

一種代謝蘆薈苷的微生物篩選及其酶學性質初步研究

牛艷豐1，寇正福1，劉坐鎮1，2，許建和1，江邦和2

(1.華東理工大學，上海200237;2.上海華震科技有限公司，上海 200237)

通過基因工程手段篩選到代謝蘆薈苷的菌種——大腸桿菌(E.coliBL21(DE3)，PET28(a))(ECUST0416，CGMCC NO.6114)，發酵產生的酶液能夠水解蘆薈苷為蘆薈大黃素。30℃、250r/min條件下發酵11h，產酶量可以達到148U/L發酵液。初步研究了酶液在不同溫度、pH、底物濃度、PBS濃度、NaCl濃度、反應時間下的活性，從而確定酶活測定的最佳條件為:30℃、pH7.5、5mL粗酶液與5mL 40mmol/L PBS(pH7.5)混合組成反應體系、底物濃度3mg/mL、Nacl 0.6%、反應時間為20min。酶反應產物經高效液相檢測，純度為98.5%，酶催化反應轉化率為73%。質譜和核磁共振圖譜結果表明，酶解產物為蘆薈大黃素。

蘆薈苷，蘆薈大黃素，優化，酶學性質

蘆薈大黃素(aloe－emodin)，又稱蘆薈瀉素，化學名稱為1，8－二羥基－3－羥甲基蒽醌，是重要的蒽醌類物質，主要存在于蘆薈葉表層中，具有抗腫瘤、抗菌、抗病毒、抗氧化等一系列生物活性，在醫藥、保健食品、化妝品、日用洗滌用品行業上被廣泛應用［1］。目前有關文獻資料報道中，化學合成制備蘆薈大黃素最常見的方法是以蘆薈苷為起始原料，經過水解氧化反應得到蘆薈大黃素。目前，利用蘆薈苷(aloin)制備蘆薈大黃素的方法有鐵鹽催化酸解法［2］、高溫氧化法［3］、過硫酸鹽氧化法［4］等化學方法。以上幾種方法要用強酸或高溫或者通入氧氣，需要特殊設備或者加入大量的金屬鹽，反應條件不溫和，對反應設備要求較高，而且能耗也相對較高。……