海沃德獼猴桃巰基蛋白酶的催化特性

張 倩，陳 彥，2，*，林曉艷，2，林金鳳

(1.西南科技大學材料科學與工程學院，四川綿陽 621010;

2.生物質材料教育部工程研究中心，四川綿陽 621010)

海沃德獼猴桃巰基蛋白酶的催化特性

張 倩1，陳 彥1，2，*，林曉艷1，2，林金鳳1

(1.西南科技大學材料科學與工程學院，四川綿陽 621010;

2.生物質材料教育部工程研究中心，四川綿陽 621010)

對以海沃德獼猴桃殘次果提取的巰基蛋白酶進行了動力學研究，考察了一些外加劑對酶活的影響，同時初步探討了酶液的穩定性。結果表明:以酪蛋白為底物的獼猴桃巰基蛋白酶的 Km值為6.56×10－3mmol，Vmax為163.93mg·mL－1·min－1;在其底物濃度為1.0g/L時，該酶的最適溫度和pH分別為55℃和5.5;L－半胱氨酸、2－巰基乙醇、硫代硫酸鈉、EDTA以及葡萄糖等外加劑對酶具有明顯的激活效果，且EDTA的激活作用最強;抗壞血酸、碘乙酸和過氧化氫等外加劑對酶則具有抑制作用。在最適酶促反應條件下，于4℃溫度存放的酶液活性隨時間延長呈急劇的降低，并以pH為3.5存放條件下的降低最少，約可保存80%的酶活性。

獼猴桃，巰基蛋白酶，催化，抑制劑，激活劑

1959年Arcus從獼猴桃果實中首次分離獲得獼猴桃蛋白酶，因其分子中含有巰基，故也稱獼猴桃巰基蛋白酶(Thiol Protease，TP)，其在許多功能特性方面與同屬巰基蛋白酶的木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等類似［1］。國內外對其分子量、等電點、Km值、催化功能基團、機理及激活動力學、胍脲和SDS導致的構象與活力變化等進行了較為廣泛的研究［1，2－5］。TP可用于降解奶過敏原α乳白蛋白和β乳球蛋白［6］，亦可代替木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等用于生產果凍、啤酒澄清、美容祛斑、農殘洗滌等食品、醫藥和化工等領域［7－9］。……