間接熒光法測定水產品中L-谷胱甘肽的含量

潘煜辰，陳舜勝，*，宋 青，趙善貞

（1.上海海洋大學，上海 201306；2.上海出入境檢驗檢疫局，上海 200135）

間接熒光法測定水產品中L-谷胱甘肽的含量

潘煜辰1，陳舜勝1，*，宋 青2，趙善貞2

（1.上海海洋大學，上海 201306；2.上海出入境檢驗檢疫局，上海 200135）

建立了間接熒光法測定水產品中L-谷胱甘肽（GSH）含量的方法。樣品經三氯乙酸（TCA）沉淀蛋白，調上清液pH至10.5同時二次沉淀蛋白，提取液稀釋一定倍數后以鄰苯二甲醛（OPA）為熒光衍生劑，等體積（1∶1，v∶v）暗處混合反應1～2min，在Ex 325nm和Em 400nm條件下測得總熒光值A。同時以N-乙基馬來酰亞胺（NEM）屏蔽待測液中含巰基的化合物，測得雜質產生的熒光值B，以總熒光值A減去熒光值B，得出GSH所產生的熒光值，間接測得GSH含量。在0.125～1.250mg/L濃度范圍內GSH線性關系良好，R2=0.9963，回歸方程為Y=57.012X。該方法的相對標準偏差（RSD）為3.83%～5.25%，平均回收率為91.37%～102.20%。改進后的方法彌補了熒光法本身特異性不高的缺點，使得測定更精確，適用于水產品中L-谷胱甘肽含量的測定。

L-谷胱甘肽，間接熒光校正法，牡蠣，蠔油

L-谷胱甘肽（GSH），又稱還原型谷胱甘肽，是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通過肽鍵縮合而成的三肽化合物，是一種用途廣泛的活性短肽，廣泛存在于動植物中，在酵母、胚芽和動物肝臟中的含量極高[1]。目前，L-谷胱甘肽的主要檢測方法[2-3]有酶循環法、電化學法、熒光法和高效液相色譜法（HPLC）等。其中，酶循環法[4]雖然廉價，但如果待測體系中存在氧化型谷胱甘肽（GSSG），則該方法測得的是總谷胱甘肽的量，無法單獨測定GSH的含量；電化學法[5-6]的靈敏度很高，是唯一一種不需要對GSH進行衍生化就可測得其含量的方法，但是很多電極在長時間使用后，其表面被氧化，穩定性和靈敏度都會下降，而且多數電極的價格相當昂貴；……