谷氨酰胺促進左半結腸切除術后大鼠殘余結腸的增殖作用

趙征紅

谷氨酰胺促進左半結腸切除術后大鼠殘余結腸的增殖作用

趙征紅

谷氨酰胺是人體含量最豐富的非必需氨基酸，近幾年來在谷氨酰胺的代謝，免疫功能的調節作用，以及在腸外營養中的應用等方面進行了大量研究，在腸外營養谷氨酰胺對結腸的及創傷大手術的患者臨床上已經嘗試性進行應用，但谷氨酰胺對結腸的各方面影響報導甚少，我們通過建立左半結腸切除的大鼠模型，觀察谷氨酰胺對大鼠殘余結腸的促進增殖作用。

1 材料與方法

2 結果

2.1 光鏡下所見 A正常對照組:結腸黏膜較平坦，大腸腺厚為1～5層，腺上皮細胞分裂偶見，可見杯狀細胞，少量內分泌細胞，黏膜下可見血管淋巴管和疏松結締組織，肌層較薄5～12層。B.手術組:結腸黏膜增厚，黏膜皺壁呈現半環形突起，黏膜住狀上皮間斷，不連續。大腸腺厚增厚10～20層，可見較多炎性細胞。漿膜層增厚，較多炎性細胞浸潤。C.手術添加谷氨酰胺喂養組:結腸黏膜顯著增厚，黏膜皺壁向腔內突起，似乳頭狀，黏膜柱狀上皮完整，連續。大腸腺增多5～12層，內分泌細胞，杯狀細胞明顯增多，分裂細胞顯著增多，黏膜下層無差異，肌層增厚15～25層。

2.2 結腸黏膜細胞DNA含量測定

表1

3 討論

3.1結腸在結腸切除術后有代償 實驗結果提示，術后10 d組大鼠和正常組相比較，光鏡下見殘余結腸黏膜略增厚，呈現半環狀凸起，以半杯狀細胞增多為主，黏膜下層肌層無明顯差異。肌層及漿膜層有較多炎性細胞浸潤。分子生物學檢測測定殘余結腸黏膜DNA含量，手術組略高于正常組，表明結腸黏膜處于增殖狀態，術后殘留結腸不能適應機體的需要，已經發生了代償性改變，另外，術后組大鼠結腸黏膜有炎癥表現，也是手術后肌體必然的反應。

3.2 谷氨酰胺對結腸代償有促進作用 術后添加谷氨酰喂養組和術后組相比較，結腸黏膜DNA含量明顯增高，光鏡下黏膜厚度增高，黏膜柱狀上皮完整，連續，黏膜皺壁呈乳頭狀凸起，以杯狀細胞增多為主。其內可見較多核分裂細胞，肌層及漿膜層正常，炎性細胞少見。實驗結果表明大鼠左半結腸切除術后殘余結腸即發生了適應性代償改變，但改變速率有限，外源性給予谷氨酰胺可明顯促進這一適應性代償改變?？赡軝C制如下:⑴谷氨酰胺是蛋白質，核酸等合成的重要前體，并為腸黏膜細胞提供能源，促進結腸黏膜增殖。⑵術后早期適量的給予外源性谷氨酰胺，可以減少骨骼肌蛋白的分解加速，迅速補充血漿組織中谷氨酰胺，減少谷氨酰胺缺乏引起的腸黏膜萎縮，腸通透性增加，細菌移位，繼發腸源性感染，結腸內細胞菌較多保持完整的結腸屏障功能很有意義。⑶谷氨酰胺可為生產Slg-A的漿細胞提供能源，從而降低腸道細菌對腸黏膜的附著和種植，保護了腸道免疫系統。

3.3 谷氨酰胺應用前景遠大 結腸性疾病較多 ，如先天性巨結腸，結腸炎，結腸癌等，治療較為棘手，在小兒外科領域，先天性巨結腸(無神經節細胞癥)性病率較高。國內資料為1∶4000(0.26%)，并有逐年增加的趨勢，該病病理改變主要是結腸肌間神經叢和黏膜下神經叢中沒有神經節細胞，臨床上以反復腹脹，便秘為主要癥狀，易并發小結腸炎，腸穿孔，水中毒等并發癥，先天性巨結腸不經治療死亡率高達93%，很少活到成年，盡可能切除病變腸管是最好的治療辦法，也就是行根治性手術，近年來腹腔鏡手術，經肛門根治術的推廣，已大大減少了患兒的痛苦和手術死亡率，但由于左半結腸甚至大部分結腸被切除，術后常常出現頑固性腹瀉，水電解質紊亂，肛門濕疹，術后小腸結腸炎及生長發育尺緩等并發癥，極難糾正。本實驗通過動物模型驗證了結腸在結腸切除術后雖有代償，但速率有限，谷氨酰胺對結腸代償有明顯的促進作用。谷氨酰胺對結腸免疫系統的影響有待下一步研究，對術后小腸結腸炎的發生將有更重要的作用。

130051長春市兒童醫院新生兒外科

1.1 實驗動物模型的制備 藥物谷氨酰胺顆粒劑(Glutamine Granules)為重慶藥友制藥有限責任公司產品(批號國準字H20020054)。實驗選用雄性Wistar大鼠(長春高新開發區醫學動物中心提供)隨機分三組，A正常對照組B左半結腸切除術組C左半結腸切除術后添加谷氨酰胺喂養組，術后每日谷氨酰胺顆粒(0.075 g)，溫水調勻口服。每組12只。

1.2 標本制作 完成喂養10 d后，處死大鼠，取距回腸盲部2 cm全部結腸，剝離結腸黏膜組織稱重量。

1.3 標本檢測

1.3.1 光鏡觀察 標本用Camoy液固定，常規酒精脫水，石蠟包埋切片，厚度為6 μm，常規HE染色。

1.3.2 結腸黏膜DNA含量測定 動物組織DNA提取試劑盒(由北京鼎國生物技術發展中心提供)，將所測的DNA通過紫外分光光度計檢測，測取OD260值。

所測結腸黏膜細胞DNA含量

1.4 統計學方法 用ANOVA方差分析。組間用Bon-ferronic方法差異性檢驗，統計計算采用STAT軟件，所有數據均以均數±標準差(±s)表示。