HPLC法測定苦瓜清脂素膠囊中鹽酸西布曲明

姜嘉鑫 訾陽

HPLC法測定苦瓜清脂素膠囊中鹽酸西布曲明

姜嘉鑫 訾陽

建立高效液相色譜法測定鹽酸西布曲明的含量。色譜柱為Venusil MP C18，流動相為含0.1%甲酸的20 mmol/L醋酸銨-甲醇(35∶65)。檢測波長為224 nm，流速為1.0 ml/min。鹽酸西布曲明在0.0225～0.225 mg/ml范圍內與峰面積線性關系良好(r=0.9998);平均回收率為98.87%，RSD為0.65%(n=6)。本方法簡便、準確、靈敏、重現性好，可作為鹽酸西布曲明的含量測定方法。

高效液相色譜法;苦瓜清脂素膠囊;鹽酸西布曲明

鹽酸西布曲明(Sibutramine)為非苯丙胺類食欲抑制藥，是作用于中樞神經系統的減肥藥物，近年來有鹽酸西布曲明多例的死亡報告［1］。一些不法分子在減肥類保健食品中非法添加鹽酸西布曲明，嚴重危害消費者健康。為有效地打擊這種制假摻偽的不法行為，參照有關文獻［2，3］，采用高效液相色譜法，對市售的減肥保健品進行了檢驗。本文選擇在流動相中加入0.1%甲酸，改善了分離效果，使樣品中鹽酸西布曲明和其他成分得到了很好的分離，建立了HPLC法測定苦瓜清脂素膠囊中鹽酸西布曲明的分析方法，結果令人滿意。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 LC-20AD液相色譜儀(日本島津公司);CP225 d分析天平(德國賽多利斯公司);KQ-250 dB型數控超聲波清洗器(江蘇昆山超聲儀器有限公司)。

1.2 試藥 鹽酸西布曲明對照品(批號:100624-200401，中國食品藥品生物制品檢定院);苦瓜清脂素膠囊(A企業，批號:100106、100804和110203);甲醇為色譜純;其余試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 溶液的制備 ①對照品溶液精密稱取鹽酸西布曲明對照品11.25 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。②供試品溶液 取本品膠囊10粒，精密稱定重量，傾出內容物，混勻，精密稱取內容物0.12 g，置25 ml量瓶中，加甲醇適量，超聲15 min使溶解，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，經0.45 μm濾膜濾過，即得供試品溶液。

2.2 色譜條件 色譜柱:venusil MP C18(4.6 mm×100 mm，3 μm);流動相:20 mmol/L醋酸銨(含0.1%甲酸)-甲醇(35∶65);檢測波長:224nm;流速:1.0 ml/min;進樣量:10 μL;柱溫:室溫;色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.3 線性關系考察 精密量取對照品儲備液1、2、4、6、8、10 ml，分別置10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取10 μL進樣，以峰面積Y對含量X(mg/ml)作線性回歸。得回歸方程為:Y=19907500X+12929.25 r=0.9998結果表明，鹽酸西布曲明在0.0225～0.225 mg/ml范圍內濃度與峰面積線性關系良好。

2.4 精密度試驗 精密量取鹽酸西布曲明濃度為0.09 mg/ml的對照品溶液，連續測定6次，以峰面積計算 RSD為0.1%。

2.5 重復性試驗 稱取苦瓜清脂素膠囊(批號:100106)6份，同2.1.2進行測定，計算含量，RSD為1.4%(n=6)。

2.6 穩定性試驗 精密量取同一供試品溶液，分別于0、2、4、6、8 h測定以峰面積計算RSD為0.52%(n=5)，結果表明，供試品溶液室溫8 h內穩定。

2.7 加樣回收試驗 精密稱取已知含量的樣品(批號:100106)6份，分置25 ml量瓶，分別精密加入0.229 mg/ml的鹽酸西布曲明對照品溶液4、5和6 ml，加甲醇適量，同2.1.2進行測定，平均回收率為98.87%，RSD為0.65%。

2.8 樣品含量測定 取本品苦瓜清脂素膠囊(批號:100106、110203、100804)10 粒，傾出內容物，混勻，精密稱取0.12 g，置25 ml量瓶中，加甲醇適量，同2.1.2操作進行測定，三批的含量分別為20.34、18.06和0 mg/g。

3 討論

3.1 檢測波長的選擇 取對照品溶液經二極管陳列檢測器在190～300 nm波長范圍內掃描，在224 nm波長處有最大吸收，故將224 nm作為檢測波長。

3.2 流動相的選擇 以20 mmol/L醋酸銨-甲醇為流動相，用甲酸調節pH值2.5～6.0，經試驗，當流動相pH值為4.5(含0.1%甲酸)時鹽酸西布曲明色譜峰形對稱，與其他成分的分離度符合規定，故流動相確定為20 mmol/L醋酸銨(含0.1%甲酸)-甲醇(35∶65)。

［1］ 魏艷紅.關于鹽酸西布曲明審查的早期報告．藥品評價雜志，2010，7(2):29．

［2］ 張小松，夏錚錚，周琳，等.檢測中藥保健品中非法摻入的鹽酸西布曲明．華西藥學雜志，2005，20(4):293-2951．

［3］ 鄭萍，朱蘭，羅霞，等.RP-HPLC測定鹽酸西布曲明中的有關物質．華西藥學雜志，2005，20(2):80-82．

Determination of Sibutramine in Kuguaqingzhisu capsule by HPLC

JIANG Jia-xin，ZI Yang．Department of Bidogical Resource，Lushan Branch Institate of Guangxi Technical College，Liuzhou 545616，China

To establish a method for the determination of Sibutramine in kuguaqingzhisu capsule by HPLC.HPLC was used Venusil MP C18column，mobile phase was methanol-20 mmol/L ammonium acetate(0.1%formic acid)(35:65)，The flow rate was 1.0 ml/min with detection wavelength at 224nm.The linear range of sibutramine was from 0.0225～0.225 mg/ml(r=0.9998).The average recoverery was 98.87%and RSD was 0.65%(n=6).The method is simple，accurate and suitable.It can be used for the determination of Sibutramine in kuguaqingzhisu capsule．

HPLC;Kuguaqingzhisu capsule;Sibutramine

545616 柳州，廣西工學院鹿山學院生物資源系(姜嘉鑫);河北省食品藥品檢驗院(訾陽)

訾陽 E-mail:zxr3487@126.com