左軍 孔繁軍 丁旭
全血或血漿測定dimer的研究
左軍 孔繁軍 丁旭
目的全血或血漿測定dimen的研究。方法目前測定D-二聚體多數采用109 mmol/L或105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑,全血與抗凝劑的比例為9∶1分離血漿來測定,離心、測試時間長,我們采用瑞萊生物工程(深圳)有限公司提供的ReLIA多功能免疫檢測系統及其試劑,用抗凝全血(105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑)和(EDTA2 k抗凝劑)全血及血漿分別測定D-二聚體。結果三者結果有顯著的差異,用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑全血測定結果最低。EDTA2 k抗凝劑的全血測定高于前者,而用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑的血漿結果最高。結論用抗凝全血檢測D-二聚體可以作為一種快速篩查手段。
全血D-二聚體ReLIA;免疫檢測
1.1 材料瑞萊生物工程(深圳)有限公司提供的ReLIA多功能免疫檢測系統試劑批號20111001023。凝血常規檢測抗凝管(105 mmol/L枸櫞酸鈉)、EDTA2K抗凝劑采血管
1.2 方法分別選取30分兩種抗凝全血和105 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝血漿來測定第二聚體含量觀察測試結果
1.3 統計學方法使用SPSSl3.0軟件系統,兩樣本均數比較,用配對資料t檢驗。
抗凝全血和抗凝血漿檢測D-二聚體兩種方法T=2.8452 (P<0.01)有顯著差異用105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑全血和EDTA2 k抗凝劑的全血兩者比較T=0.7656(P>0.05)無顯著差異。用枸櫞酸鈉作為抗凝劑分離血漿樣本和EDTA2 k抗凝劑的全血兩者比較T=2.2088(P<0.05)顯著差異。見表1。

表1
ReLIA多功能免疫檢測系統采用的是專利雙向免疫測流技術[1]。人體纖維蛋白溶解系統,是人體最重要的抗凝系統,對保持血管壁的正常通透性,維持血液流動狀態和組織修復起到極為重要的作用,纖溶系統有4個主要成分,纖溶酶原纖溶酶原激活劑(如tpa)纖溶酶和纖溶酶抑制物,當血液凝固時,纖維蛋白形成結塊,tpa激活后,使纖溶酶原轉化為纖溶酶,其可以溶解凝血中的纖維蛋白凝塊其降解產物即各種可溶性蛋白片段組成為X-寡聚體、第二聚體、中間片段和片段E.D-二聚體來源于纖溶酶溶解的交聯纖維蛋白凝塊,因此D-二聚體與靜脈血栓的診斷、肺栓塞、DIC心肌梗死及腦血栓、白血病、妊娠、組織損傷惡性實體腫瘤、外科手術以及纖溶亢進等多種疾病有著密切的關系。卡米拉,木克代斯[2],因此D-二聚體的檢測對臨床有著重要的輔助診斷價值。為了能夠快速檢測D-二聚體含量[3]。夏訊生。我們嘗試用全血法來測定該項目,以便為臨床快速提供參考依據。
從表中數據可以看出105 mmol/L枸櫞酸鈉作為抗凝劑的全血結果最低、EDTA2 k抗凝劑的全血結果高些,而用105 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝血漿結果最高(其參考值范圍為0-2400 ng/ml)經過統計學比較三者有統計學意義.
實驗數據表明D-二聚體可以用全血法來檢測,也可以用血漿來檢測,但是全血法的穩定性和血漿法比較穩定性略差,特別是對于D-二聚體含量較低的樣本檢測結果不是很理想當低于50 ng/ml時候不能呈現良好的線性關系,這可能與全血中的有形成分的干擾有一定的關系,其正常參考范圍還有待進一步的測試統計,但也是某一地域性的范圍,如果作為過篩檢測初步判斷D-二聚體的含量便于臨床快速診斷還是有很大的幫助的。
由于D-二聚體測定方法很多。崔樹明[4],沒有一個統一的或者說一種金方法來衡量,因此其正常參考范圍也由很大區別,ReLIA法的參考范圍為0-2400 ng/ml很大,而ACL9000則為0-255ng/ml兩種方法無法進行比較,這也給臨床診斷帶來一定的差異,對于ReLIA多功能免疫檢測系統測定D-二聚體是一項比較快速(<20 min)簡單的檢測手段,它的優勢在于可以用全血來檢測,免去了由于長時間離心而延遲的檢測機會。盡管全血法檢測D-二聚體還有待進一步的探討,但是作為一種快速檢測手段還是值得參考。
[1]瑞萊生物工程(深圳)有限公司試劑儀器使用指南.
[2]卡米拉.木克代斯D-二聚體檢測的意義.血栓與止血,2009,4 (4):100-101.
[3]夏訊生,唐寧,張碧玉,等.D-二聚體兩種定量檢測方法的檢測與評價.血栓與止血,2007,2:82-85.
[4]崔樹明.《醫學理論與實踐》D-二聚體測定及臨床應用研究進展,2011,24(8):896-898.
130011長春,一汽總醫院(吉大四院)檢驗科