HPLC分析方法在含麻黃制劑中的應(yīng)用

毛泉明 王憶勤 燕海霞 張 寧* 王松濤 李浩浩

（上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海 201203）

麻黃堿與偽麻黃堿色譜分析方法眾多[1-3]，本研究參考2010年版中國(guó)藥典[4]，在復(fù)方寧喘顆粒劑的基礎(chǔ)上，建立一種新型的分離分析麻黃堿與偽麻黃堿的色譜方法，并能適用于某些含量麻黃制劑的分離分析。

復(fù)方寧喘顆粒劑源于上海市名中醫(yī)朱瑞群教授的臨床經(jīng)驗(yàn)方，由麻黃、黃芩、地龍等八味藥材組成，經(jīng)臨驗(yàn)證本方具有良好的平喘、解痙、抗過(guò)敏等功能，并能改善微循環(huán)，控制炎癥病灶及炎癥反應(yīng)等[5]。

1 儀器與試劑材料

儀器有安捷倫1200系列高效液相色譜儀，Satorius CP 225D 電子天平。 試劑材料是乙醚、三乙胺、磷酸、二正丁胺，分別為分析純并購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，甲醇（色譜純）；麻黃堿（171241-200404）與偽麻黃堿（171237-200505）購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所；麻黃等中藥分別購(gòu)于上海藥房股份有限公司徐重道中藥飲片廠。小青龍合劑（110102）產(chǎn)于江西濟(jì)民可信藥業(yè)有限公司，通宣理肺丸（0015247）產(chǎn)于北京同仁堂股分有限公司同仁制藥廠，小兒清肺化痰顆粒（11020923）產(chǎn)于神威藥業(yè)有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱： Phenomenex 4u Polar-Rp 80A 250×4.6mm，保護(hù)柱：Phenomenex 填料同色譜柱；溫度為15℃；波長(zhǎng)是210nm；流速為1.0mL/min；流動(dòng)相：0.092%磷酸水溶液，含0.04%三乙胺與0.02%二正丁胺。

2.2 供試液的配制

2.2.1 對(duì)照品

精密稱取對(duì)照品麻黃堿與偽麻黃堿適量，分別用1.44%磷酸溶液定容備用，測(cè)定前用1.44%磷酸溶液稀釋并配制成混合對(duì)照品溶液。

2.2.2 樣品與陰性樣品

樣品供試液是根據(jù)復(fù)方寧喘顆粒劑處方，經(jīng)水煎提取制成樣品試液；同樣制成相應(yīng)的陰性供試液。

2.3 結(jié)果

經(jīng)對(duì)色譜條件選擇與優(yōu)化，確定了2.1的色譜條件，進(jìn)樣量為10μL，并在該條件下對(duì)麻黃堿與偽麻黃堿兩組分分離分析，結(jié)果麻黃堿與偽麻黃堿均達(dá)到基線分離，而且色譜峰峰形與間距較好；陰性樣品無(wú)干擾（圖1）。此外，應(yīng)用該方法對(duì)含麻黃制劑進(jìn)行色譜分析，也得到較滿意的結(jié)果，證明該方法穩(wěn)定可靠，快速，簡(jiǎn)便易行，具有應(yīng)用價(jià)值。

3 討 論

應(yīng)用HPLC測(cè)定麻黃中的麻黃堿與偽麻黃堿的方法眾多[1-3]，2010版藥典規(guī)定應(yīng)用新方法[5]測(cè)定單味麻黃中的麻黃堿與偽麻黃堿，該方法對(duì)于一些含麻黃的制劑可能有一定的局限性，因此本研究在該色譜條件的基礎(chǔ)上對(duì)復(fù)方寧喘顆粒劑中麻黃的色譜條件進(jìn)行探索。

3.1 不同流動(dòng)相配比對(duì)分離的影響

圖1

圖2

當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)在210nm、流速為1.0mL/min，柱溫30℃時(shí)，甲醇與0.092%磷酸（含0.04%三乙胺與0.02%二正丁胺）配比為1.5∶98.5（2010版藥典法）及（0∶100），以處方藥為供試液，分別進(jìn)樣，進(jìn)樣量10μL，進(jìn)行色譜分析，結(jié)果麻黃堿與偽麻黃堿沒(méi)法分離。

3.2 不同溫度對(duì)分離的影響

以100%的含0.092%磷酸水溶液為流動(dòng)相，波長(zhǎng)與流速不變，分別在30、25、20、18、與15℃時(shí)分析樣品，結(jié)果當(dāng)溫度15℃時(shí)，樣品中的麻黃堿與偽麻黃堿達(dá)到基線分離，而且色譜峰峰形與間距較好（見(jiàn)圖1中的樣品圖）。溫度在此對(duì)分離的影響較大，因此在進(jìn)行色譜分析時(shí)要嚴(yán)格控制柱溫。

3.3 應(yīng)用

本研究首次應(yīng)用極性乙醚連接苯基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱來(lái)分析復(fù)方中的麻黃成分，分別進(jìn)行色譜分析的制劑有：小青龍合劑，通宣理肺丸，小兒清肺化痰顆粒（圖2），結(jié)果較滿意。該方法不僅適用于分離分析復(fù)方寧喘顆粒劑，也適用于其他一些含量有麻黃藥物的制劑，具有一定的應(yīng)用于價(jià)值。

[1]葛斌,羅燕梅,許愛(ài)霞,等.HPLC測(cè)定麻黃藥材中麻黃堿與偽麻黃堿的含量[J].中國(guó)中藥雜志,2008,43(3):173-175.

[2]周斌,鄭鵬武,張鐵軍,等.HPLC測(cè)定麻杏石甘湯中麻黃堿和偽麻黃堿的含量[J].上海中醫(yī)藥雜志,2008,42(1):71-73.

[3]王寶琴,蘇健,韓敏彩,等.天麻及其制劑中天麻素含量測(cè)定方法研究概述[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2004,11(3):274-275.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典,2010年版 一部[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:300.

[5]燕海霞,王憶勤,王廣東,等.復(fù)方寧喘霧化劑提取工藝的正交實(shí)驗(yàn)研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2008,19(10):2392-2393.