ER、PR、CerbB-2、P53、Ki-67在乳腺癌中的表達(dá)及意義

萬春生 何婷玉 劉磊

乳腺癌是全球中年女性最常見的惡性腫瘤，目前檢測乳腺癌患者的ER、PR、C-erbB-2、P53、Ki-67的意義主要是判斷預(yù)后，指導(dǎo)其內(nèi)分泌治療及化療。本文以我院病理確診的338例乳腺癌資料為依據(jù)，行免疫組化五項(xiàng)檢測，對其陽性表達(dá)及相關(guān)性進(jìn)行分析，旨在進(jìn)一步了解癌基因蛋白，激素受體的陽性表達(dá)與乳腺癌預(yù)后判斷的關(guān)系，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院2009年3月至2001年12月期間原發(fā)的乳腺癌手術(shù)病例338例，所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋切片，4 μm厚，行HE染色鏡檢觀察，確診。作免疫組化標(biāo)記，采用SP法，所用ER、PR、C-erbB-2、P53、Ki-67抗體試劑均購于基因科技(上海)有限公司。

1.2 方法 采用 SP法 ER、PR、C-erbB-2、P53、和 Ki-67單克隆抗體和免疫組化試劑盒均購于基因科技(上海)有限公司，常規(guī)免疫組化染色，用已知的陽性切片作陽性對照，用PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn) 陽性結(jié)果呈棕黃色或棕褐色，C-erbB-2蛋白陽性物質(zhì)主要定位于細(xì)胞膜，ER、PR、P53陽性物質(zhì)主要定位于細(xì)胞核，Ki-67陽性細(xì)胞為核境界清晰的棕色、棕褐色顆粒沉著細(xì)胞，根據(jù)切片中陽性細(xì)胞的比例將其分為［1］:陽性細(xì)胞數(shù)＜5%為陰性(-)，陽性細(xì)胞數(shù)6% ～25%為陽性(+)，陽性細(xì)胞數(shù)26% ～75為(++)，陽性細(xì)胞數(shù)＞75%為強(qiáng)陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。應(yīng)用Spearman相關(guān)系數(shù)計(jì)算指標(biāo)間相關(guān)系數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 年齡與性別 338例均為女性，發(fā)病年齡24～81歲，平均48歲。21～30歲 3例占 0.09%，31～40歲 48例占14.2%，41～50歲 164例占 48.5%，51～60歲 93例占27.5%，61～70歲29例占8.58%，71歲以上12例占3.55%。

2.2 好發(fā)部位 左乳175例，右乳163例，左側(cè)多與右側(cè)

2.3 組織學(xué)分級 Ⅰ級75例、Ⅱ級199例、Ⅲ級64例。TNM分期Ⅰ期75例、Ⅱ期152例、Ⅲ期111例、Ⅳ期0例。按WHO(2003)乳腺腫瘤標(biāo)準(zhǔn)對乳腺癌進(jìn)行分級、分期。

2.4 免疫組化結(jié)果 本組全部病例中ER、PR、C-erbB-2陽性表達(dá)率分別為51.75%、34.9%、36.7%。P53和Ki-67陽性表達(dá)率分別為53.8%和91.1%。由表1可見腫瘤大小不同的乳腺癌病例組中，ER、PR的陽性表達(dá)率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在腫瘤直徑≤2 cm組中，ER、PR表達(dá)率最高分別為61.6%、43%而C-erbB-2表達(dá)率最低32%。腫瘤直徑＞5 cm的乳腺癌患者C-erbB-2陽性表達(dá)率最高為43%，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中C-erbB-2表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。

2.5 P53、Ki-67與 ER、PR、C-erbB-2之間的關(guān)系 經(jīng)Spearman相關(guān)系數(shù)近一步分析 P53、Ki-67指標(biāo)與ER、PR、及C-erbB-2的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)P53、Ki-67陽性表達(dá)與ER、的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，而P53、Ki-67的陽性表達(dá)與C-erbB-2的表達(dá)呈正相關(guān)(表2)。

表1 338例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌臨床病理特征比較(例，%)

表2 ER.PR.C-erbB-2與P-53.Ki-67表達(dá)的關(guān)系

3 討論

乳腺是性激素依賴器官，其生長發(fā)育和細(xì)胞的增殖受雌激素和孕激素的影響［2］，ER、PR是具有特定功能的蛋白，對乳腺癌的生長、分化有調(diào)節(jié)作用，用ER、PR的檢測對判斷預(yù)后、指導(dǎo)內(nèi)分泌治療具有一定的指導(dǎo)意義［3］，雌激素受體升高，為激素依賴性腫瘤，對內(nèi)分泌治療有效;雌激素受體低者，為激素非依賴性腫瘤，可以選擇輔助治療方案［4］，余輝等［5］，研究表明ER、PR的表達(dá)與腫瘤大小無關(guān)。而本研究發(fā)現(xiàn)乳腺腫瘤越小，組織中ER、PR的表達(dá)率越高。席平等［6］，研究顯示ER+比ER-腫瘤容易發(fā)生骨轉(zhuǎn)移，ER自身的狀態(tài)只對高級別腫瘤具有預(yù)測作用。PR自身狀態(tài)對低級別和高級別腫瘤都沒有預(yù)測作用，然而ER+/PR-對低級別和高級別腫瘤都有預(yù)測骨轉(zhuǎn)移的作用。

C-erbB-2在正常狀態(tài)下處于非激活狀態(tài)，而被激活時(shí)則具有腫瘤轉(zhuǎn)化活性。CerbB-2蛋白可以促進(jìn)DNA合成增加，細(xì)胞分裂、蛋白水解酶分泌增多，癌細(xì)胞生長加快，運(yùn)動(dòng)能力增加，腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移增強(qiáng)，惡性程度增加［7］，Joensuu等［8］，分別采用免疫組織化學(xué)和熒光原位雜交(Fish)檢測852例單側(cè)PT1N0M0乳腺癌的HER-2狀態(tài)，隨訪結(jié)果顯示，不管采用哪種方式，HER-2陰性患者的9年無轉(zhuǎn)移生存率明顯高于HER-2陽性患者(免疫組織化學(xué)89%VS 73%，P=0.0003;Fish:88%VS 72%，P＜0.01)。可見C-erbB-2陽性患者預(yù)后較差。本組338例乳腺癌中C-erbB-2陽性表達(dá)率為36.7%，與國外報(bào)道的陽性率20% ～40%相一致［9］，本研究結(jié)果顯示，腫瘤越大，C-erbB-2陽性表達(dá)率越高，因此C-erbB-2是判定乳腺癌預(yù)后的重要指標(biāo)。

P53基因17號染色體即17p13，參與細(xì)胞增殖的負(fù)調(diào)控，其主要功能是使細(xì)胞周期阻滯，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡與促進(jìn)其分化［10］，P53基因分為野生型和突變型兩類。突變型P53基因有阻止野生型P53基因抑制腫瘤形成的功能，引起細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和癌變［11］，野生型P53在組織中幾乎不能檢測到，只有當(dāng)發(fā)生DNA損傷既發(fā)生腫瘤時(shí)可檢出突變型P53［12］，Dookeran-KA等人［13］，的研究證實(shí)P53蛋白陽性的乳腺癌患者五年生存率(54.7%)明顯低于P53陰性(66.7%)的乳腺癌患者。目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)為P53抑癌基因突變或蛋白質(zhì)過度表達(dá)與乳腺癌患者預(yù)后不良有關(guān)，P53表達(dá)陽性的乳腺癌更具有侵襲性，惡性程度高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移早，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高，生存質(zhì)量差，生存期短。本組中P53的陽性率為53.8%，與文獻(xiàn)中報(bào)道的相一致，本組P53陽性表達(dá)與ER、PR的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，與C-erbB-2的表達(dá)呈正相關(guān)(P＜0.05)，說明它們在腫瘤生長過程中有相互調(diào)節(jié)作用。

Ki-67作為細(xì)胞增殖標(biāo)志物，已成為監(jiān)測腫瘤細(xì)胞增殖活性最可靠的指標(biāo)。研究表明Ki-67表達(dá)能可靠而迅速地反映惡性腫瘤增殖率，與多種腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預(yù)后相關(guān)。目前已確定Ki-67與人類表皮生長因子-2(Her-2)編碼的蛋白質(zhì)的表達(dá)呈正相關(guān)［14］，Ki-67與C-erbB-2同時(shí)表達(dá)提示乳腺癌可能惡性程度高，預(yù)后較差。因此Ki-67可以用于判定乳腺癌的預(yù)后及指導(dǎo)治療。在本組338例乳腺癌病例中，Ki-67陽性表達(dá)率為91.1%，其陽性表達(dá)在年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移各組中均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)與ER的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性，P＜0.05)與C-erbB-2的表達(dá)呈正相關(guān)。提示Ki-67在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中與ER、C-erbB-2有一定的協(xié)同作用，聯(lián)合檢測更有意義。

總之，惡性腫瘤是一個(gè)多因素、多步驟作用的結(jié)果，其發(fā)生要經(jīng)過一系列基因表達(dá)變化的共同作用。ER、PR、C-erbB-2、P53、Ki-67在乳腺癌組織中有相當(dāng)高的表達(dá)率，又有一定相互聯(lián)系。通過多項(xiàng)指標(biāo)的聯(lián)合檢測，能更為準(zhǔn)確地判斷乳腺癌的預(yù)后，同時(shí)可以為靶向藥物的個(gè)體化治療提供參考和療效預(yù)測［15］。

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