PAPP-A在婦產科妊娠期高血壓臨床的應用價值

段嫦麗 江敏 潘麗

妊娠期高血壓疾病是妊娠期常見的并發癥，嚴重威脅母嬰健康，妊娠期高血壓疾病多發生于妊娠20周以后，臨床表現多為高血壓、蛋白尿、浮腫，嚴重時出現抽搐、昏迷，甚至母嬰死亡。迄今為止，妊娠期高血壓疾病仍為孕產婦及圍生兒死亡的重要原因。大量的研究表明，妊娠期高血壓疾病發病的中心環節為廣泛的血管內皮損傷，而胎盤滋養細胞缺血在妊娠期高血壓疾病發病中起重要作用。本研究通過測定、比較妊娠期高血壓疾病孕婦與正常孕婦血清妊娠血漿PAPP-A水平，旨在分析PAPP-A與妊娠期高血壓疾病發病的關系，探討其在臨床中的應用價值。

1 材料與方法

1.1 一般資料 選擇2009年8月至2011年9月在我院分娩的60例妊娠期高血壓疾病孕婦為研究對象，其中患有妊娠期高血壓的患者共30例，子癇前期患者共20例，子癇患者共10例，平均年齡為(26.5±4.3)歲，平均孕周約為(37.4±2.1)周，60例患者均為初產婦。選擇與之同期分娩的60例正常孕婦作為對照組。病例組與對照組年齡、分娩孕周在統計學分析中均無顯著性差異，具有可比性。

1.2 操作方法 取空腹時前靜脈血5 ml置試管中，以3000 r/min離心15 min，取血清置-20℃冰箱中保存待測。PAPP-A酶聯免疫定量試劑盒，購自美國DSL公司。操作步驟:實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.2.1 加樣 分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100 μl，余孔分別加標準品或待測樣品100 μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120 min。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

1.2.2 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液樣品稀釋液100 μl(在使用前一小時內配制)，酶標板加上覆膜，37℃反應60 min。

1.2.3 溫育60 min后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1～2 min，大約400 μl/每孔，甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

1.2.4 每孔加檢測溶液樣品稀釋液100 μl，酶標板加上覆膜37℃反應60 min。

1.2.5 溫育60 min后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1～2 min，350 μl/每孔，甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

1.2.6 依序每孔加底物溶液90 μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30 min內，此時肉眼可見標準品的前3～4孔有明顯的梯度蘭色，后3～4孔梯度不明顯，即可終止)。

1.2.7 依序每孔加終止溶液50 μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

1.2.8 用酶聯儀在450 nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

1.3 統計學方法 采用SPSS 1.0軟件，輸入觀察記錄的數據，進行統計學處理.繪制表格，數據組間比較采用t檢驗

2 結果

妊娠期高血壓疾病組孕婦血清中PAPP-A含量均高于正常對照組，且隨病情的加重，血清中PAPP-A值逐漸增高。見表1。

表1 正常孕婦和妊娠期高血壓疾病孕婦血清PAPP-A水平

3 討論

PAPP-A與妊娠期高血壓疾病的關系:PAPP-A是一種與妊娠相關的人分子糖蛋白，1974年由Lin等人從孕婦血清中分離得出，經過試驗分析，認證其是一種胎盤組織中的糖類蛋白質，后因經免疫組化證實PAPP-A定位于絨毛細胞的滋養細胞層。因此，血清中PAPP-A的水平可反映滋養細胞的具體功能［1］。而且人們也早已認識到妊娠期高血壓這種疾病總是與胎盤相互共存，即使是孕婦所懷的根本無胎兒存在的葡萄胎，也可發病，并且隨著妊娠的終止，胎盤祛除，病情可自然緩解，因此，妊娠期高血壓疾病亦被稱為胎盤性疾病。而對于妊娠期高血壓疾病病因，目前比較公認的看法是:滋養細胞生理功能的改變可能是導致妊娠期高血壓疾病胎盤生理性血管重鑄障礙(淺植入)，最終導致妊娠期高血壓疾病發病的重要環節［2］。但這種說法在學術界仍然存在著許多爭議，依舊需要探討和商榷。

同時，有國外學者通過具體研究，發現患有妊娠期高血壓一病的孕婦的血清中PAPP-A的濃度會升高，尤其是先兆子癇患者出現任何明顯癥狀前，在其他蛋白質未受影響時就可測出PAPP-A值明顯升高，且其增高幅度與病情輕重呈正相關。Bersinger等［3］將妊娠期高血壓疾病患者(實驗組)與正常孕婦(對照組)的胎盤組織進行檢測，發現實驗組的PAPPA的濃度明顯高于對照組。認為PAPP-A可作為了解妊娠期高血壓疾病患者胎盤功能的個指標。Bersinger等［4］的研究表明妊娠期高血壓疾病患者血清中的PAPP-A水平與妊娠期高血壓疾病的發生存在著相關性同時，根據有關資料顯示:PAPP-A主要是由由胎盤和蛻膜產生的大分子糖蛋白，在懷孕期間，PAPP-A由蛻膜大量產生并釋放到母血循環中。母血中PAPP-A濃度隨著孕期的增加而不斷升高直到分娩。但是在DS綜合征和18染色體三體患者的母血中PAPP-A濃度卻明顯降低［5］

本研究發現妊娠期高血壓疾病孕婦血清PAPP-A水平明顯高于正常孕婦(P＜0.05;P＜0.01和P＜0.001)，且與病情的嚴重程度呈正相關［6］。PAPP-A升高的原因可能是由于妊娠期高血壓疾病時，胎盤淺著床，滋養細胞缺血缺氧而大量增殖，PAPP-A反應性分泌增多，并且是敏感的指標，在妊娠期高血壓階段即升高，進一步證實妊娠期高血壓疾病與胎盤滋養細胞功能有關。

綜上所述，PAPP-A在妊娠期高血壓疾病發病中起重要作用，可用于對妊娠期高血壓臨床的檢測和評估，通過對患者血清中PAPP-A的水平變化，即可分析出患者的病情階段及其變化情況，PAPP-A在婦產科妊娠期高血壓疾病發病中具有極高的臨床應用價值。

［1］Bersinger NA，Groome N，Mut Tukrishna S.Pregnancy associated and placental proteins in the placental tissue of normal pregnant women and patients with preeclampsia at term.Eur J Endocrinol，2002，147(6):785-793.

［2］Bersinger NA，Smarason AK，Mut Tukrishna S，et al.Women with preeclampsia have increased serum levels of pregnancy associated plasma protein A(PAPP-A)，inhibin A，activin A and soluble E2 selectin.Hypertens Pregnancy，2006，22(1):45-55.

［3］Wilczynski JR，Glowacka E，Nowak M，et al.Serum concentration of soluble vascular-cellular adhesion molecule-1(VCAM-1)and expression of its receptor VLA-4 on the surface of peripheral blood and decidual lymphocytes of preeclamptic women.Ginekol Pol，2008，74(10):1335-1342.

［4］Hey LW.The role of soluble adhesion molecules in evaluating chdothelial cell activation in preeclampsia.Am J Obstet Gynecol，1999，180(11):68-72.

［5］Stein A.Labor-associated expression of intercellulas adhesion molecule-1 in placental endothelial cells indicates participation of immunological process in parturition.Placenta，1999，20(7):567-573.

［6］林明懷.子癇前期、子癇病因及發病機制的研究進展.中國實用婦 科與產科雜志，2008，20(10):577-579.