羥丙基-β-環糊精對吲達帕胺溶解度的影響

秦貞苗 陳燕忠 陳卉 孫美麗 梁兆豐 馮思欣 林世源 黃瓊 趙雪晴 陳超君

吲達帕胺(Indapamide)為非噻嗪類吲哚衍生物，具有降壓利尿雙重的作用。受其溶解度影響，體內吸收較差，目前臨床常用劑型為其緩釋片［1］。本實驗擬采用羥丙基-β-環糊精(HP-β-CD)對吲達帕胺進行包合，并對其包合物進行驗證。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 UV1101紫外可見分光光度計(上海天美科學儀器有限公司);SWB-2000恒溫水浴振蕩器(天津奧特賽恩斯儀器有限公司);DZF-6050真空干燥箱(上海博訊實業有限公司);DSC4000差示掃描量熱儀(美國Perkin-Elmer公司);FTS-40傅立葉紅外光譜儀(美國BIO-RAD);KQ-300DA型數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);PB-10pH計(德國Sartorius公司);CP225D分析天平(德國Sartorius公司)。

1.2 試藥 吲達帕胺對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號100257-200002);吲達帕胺原料藥(濟南高華制藥廠，批號20050701);HP-β-CD(山東淄博千匯精細化工有限公司);其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 HP-β-CD的增溶作用

2.1.1 紫外檢測波長的確定精密稱取吲達帕胺對照品、HP-β-CD適量，用pH7.0磷酸鹽緩沖液配制澄清溶液，在200～400 nm波長范圍內掃描。結果表明，吲達帕胺在242 nm處有最大吸收，而HP-β-CD在此波長處無吸收，因此確定242 nm為紫外檢測波長。

2.1.2 標準曲線的繪制精密稱取吲達帕胺對照品10 mg，置100 ml量瓶中，用乙醇溶解，稀釋至刻度，作為貯備液。精密移取貯備液 0.2、0.5、0.8、1.0、1.5 ml置 10 ml量瓶中，加磷酸鹽緩沖液(pH7.0)稀釋至刻度，搖勻，在242 nm處測定吸光度，以吸光度(A)對濃度(C)進行線性回歸，結果表明:吲達帕胺在2.0～15.0 μg/ml范圍內濃度與吸光度呈較好的線性關系，其回歸方程為A=0.0586C+0.021，R2=0.9999。

2.1.3 回收率試驗精密稱定HP-β-CD9份，以藥物與環糊精1∶1的比例，精密加入80%，100%，120%的吲達帕胺對照品溶液，配成低、中、高3種濃度的溶液，按上述方法測定，結果平均回收率分別為100.71%，103.28%和105.63%。

2.1.4 不同pH值下吲達帕胺的增溶試驗配制pH5.0、pH7.0、pH9.0的磷酸鹽緩沖液，在同一pH磷酸鹽緩沖液中，加入不同量的 HP-β-CD 制成濃度為 0、20、40、80和 100 mmol/L的HP-β-CD溶液，將過量的吲達帕胺加入上述各溶液中，超聲溶解15 min后，置37℃水浴振蕩器中震蕩72 h(100 r/min)。待達到平衡后，5000 r/min離心15 min，精密移取適量上清液用pH5.0、pH7.0、pH9.0的磷酸鹽緩沖液稀釋至適宜濃度，在242 nm處測定吸光度，代入線性方程，計算藥物濃度。以HP-β-CD濃度為橫坐標，藥物濃度為縱坐標，繪制相溶解圖，并對其進行線性回歸，得出不同pH條件下的回歸方程。由圖1可知，吲達帕胺的濃度隨HP-β-CD濃度的增加而增大，表明HP-β-CD對吲達帕胺以1∶1摩爾比例進行包合。根據回歸方程，按以下公式計算表觀穩定常數Kc［2］∶Kc=斜率/S0(1-斜率)，結果穩定常數根據 pH 從小到大依次為 77.86，71.65，27.52。

圖1 不同pH條件下HP-β-CD對吲達帕胺的增溶作用

2.2 吲達帕胺-HP-β-CD包合物的驗證

2.2.1 差示掃描量熱法驗證 以空坩堝為參比，升溫速率10℃/min，溫度范圍30℃ ～300℃，氣氛為高純氮氣，對吲達帕胺原料藥、HP-β-CD輔料、物理混合物及所制備的包合物進行差示掃描分析。結果表明:170℃左右吲達帕胺出現吸收峰，混合物曲線則基本為原料藥與輔料的疊加，而包合物此處未見峰出現。

2.2.2 紅外分光光度法驗證 以KBr壓片法分別制得吲達帕胺、HP-β-CD、包合物和混合物等樣品，在4000～400 cm范圍內掃描。結果表明:在物理混合物和原料中均有吲達帕胺特征峰出現，而包合物中該波處消失，說明物理混合物中HP-β-CD和吲達帕胺僅為簡單的機械混合，并未發生作用。綜合上述特征表明，HP-β-CD已包合了吲達帕胺，形成新的物質。

3 討論

3.1 HP-β-CD 是 β-CD 的一種羥烷基化衍生物［3］，與 β-CD一樣其與許多化合物可形成包合物，提高被包合物質的穩定性［4］，在提高藥物溶解度方面優于β-CD。

3.2 實驗中吲達帕胺的溶解度隨緩沖鹽的pH和HP-β-CD濃度的增加而增大，但表觀穩定常數卻隨pH的增大而減少，表觀穩定常數越小，說明HP-β-CD對藥物穩定作用越弱，解離度升高，使HP-β-CD飽和作用減弱。

HP-β-CD對吲達帕胺具有增溶作用，不同濃度的HP-β-CD對吲達帕胺的增溶作用不同，相同濃度的HP-β-CD在不同pH條件下增溶作用也有所不同。本研究為環糊精衍生物提高難溶藥物的溶解度提供了依據，但包合比相差懸殊，難以實現工業化生產，函待解決吲達帕胺的包封率問題。

［1］王昕，唐素芳，高立勤，等.吲達帕胺片體外溶出度考查.天津藥學，2011，(3):7-10.

［2］劉玉雯，余祥彬，吳宏霞.2-羥丙基-β-環糊精對酮洛芬的包合作用研究.中國現代應用藥學，2006，23(5):377-379.

［3］何仲貴，唐星，陳宣福等.β-環糊精及其衍生物2-羥丙基-β-環糊精對布洛芬的增溶作用.沈陽藥科大學學報，1998，15(4):235-237.

［4］Backensfeld，T.，Muller，B.W.，Kolter，K.Interaction of NSA with cyclodextrins and hydroxypropyl cyclodextrin derivatives.Int.J.Pharm，2007，74(2-3):85-93.