丹紅注射液對老年冠心病患者血管內皮生長因子濃度的影響1）

馬金霞，魏旭明，任明芬

隨著社會的老齡化，老年冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的發病率逐漸升高。血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是一種強烈的特異血管內皮細胞促有絲分裂劑和促血管生成因子，有刺激血管形成、內皮再生和調節血管通透性的作用。動物實驗證實VEGF在治療缺血性心臟病方面有廣闊前景［1］。丹紅注射液可明顯減少患者心絞痛發作次數和硝酸甘油用量，顯著增加患者的運動耐量和生活質量，其遠期療效優于硝酸異山梨酯，且不良反應較少。本研究采用雙抗夾心法檢測老年冠心病患者用丹紅注射液治療前后外周血中VEGF含量，并探討其對心絞痛癥狀的緩解程度。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2006年7月—2009年12月南陽市第一人民醫院及新鄉醫學院第二附屬醫院心內科住院的老年冠心病患者102例，均有心絞痛發作。隨機分為兩組，試驗組51例，男34例，女17例，年齡63歲～82歲（66.3歲±7.8歲）。對照組51例，男36例，女15例，年齡62歲～81歲（67.3歲±6.9歲）。兩組患者均行冠狀動脈造影檢查示至少1支血管狹窄程度＞50%。所有病例均排除腫瘤、感染等。兩組患者性別、年齡等差異無統計學意義。

1.2 方法

1.2.1 VEGF檢測方法 兩組患者均采靜脈血5mL，乙二胺四乙酸抗凝，5min內分離血漿，置-80℃冰箱保存。VEGF試劑盒購于晶美生物工程有限公司，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附測定法。主要步驟：鼠抗人VEGF單克隆抗體包被96孔聚乙烯酶標板后，每孔加入100μL樣本稀釋液，再分別加入標準品和待測血清100μL，標準品VEGF 1 6 5濃度分別為2 0 0 0 ng／L、1 000ng／L、500ng／L、250ng／L、125ng／L、62.5ng／L、31.25ng／L，以稀釋液作空白對照，所有標本均設雙孔檢驗。余具體操作步驟按說明書進行。然后用酶標儀450nm波長測定各孔光密度值，以VEGF標準品濃度為橫坐標，相應的光密度值為縱坐標作圖，根據待測標本的光密度值在直線上查出相應的VEGF含量。

1.2.2 治療方法 兩組患者均給予阿司匹林、硝酸異山梨酯、血管緊張素轉換酶抑制劑等常規治療。試驗組給予丹紅注射液20mL加入5%葡萄糖注射液或生理鹽水250mL靜脈注射，每天1次，療程14d。

1.3 臨床療效標準 顯效：心絞痛癥狀完全或基本消失；有效：心絞痛發作明顯減少（每周發作次數減少50%）；無效：心絞痛發作無改善或加重。

1.4 統計學處理 采用SPSS11.0統計軟件分析，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗。

2 結 果

2.1 兩組患者血漿VEGF含量比較 治療前兩組患者血清VEGF含量比較差異無統計學意義（P＞0.05），治療后試驗組VEGF含量較治療前顯著升高，與治療前比較差異有統計學意義（P＜0．01），且兩組比較差異有統計學意義（P＜0.01）。詳見表1。

表1 兩組患者血漿VEGF含量比較（x±s） ng／L

2.2 臨床療效 試驗組顯效31例，有效19例，無效1例；總有效率98.0%。對照組顯效18例，有效22例，無效11例，總有效率78.4%，兩組比較差異有統計學意義（χ2=9．44，P＜0.01）。

3 討 論

VEGF是一個富含半胱氨酸的糖蛋白家族，以二聚體作為活性形式存在，是一類特異性促內皮細胞增殖并增加血管通透性的細胞因子。VEGF是反映冠狀動脈病變程度的敏感指標，在正常心肌含量極低，心肌缺血、缺氧可刺激其表達。急性心肌梗死患者由于冠狀動脈堵塞，導致心肌缺血缺氧，隨著缺氧時間的延長，心肌產生VEGF增加，缺血時間與VEGF產生量成正比［2］。本研究結果顯示，狹窄血管的支數愈多，血漿VEGF含量愈高。Ray等［3］試驗證實，當冠狀動脈明顯狹窄時，VEGF的生物反應會加速產生，經過一段時間逐漸減弱，這說明可能存在一種天然反饋機制，保持著血管生成和抗血管生成的微妙平衡，以防止不當的過度血管生成。本研究結果顯示，試驗組患者給予丹紅注射液治療后血清VEGF含量明顯升高，與治療前比較差異有統計學意義（P＜0.01），且兩組間比較差異有統計學意義（P＜0.01）。提示丹紅注射液可提高患者血清VEGF含量，促進新生血管的形成。丹紅注射液中丹參改善缺血區心肌的側支循環及局部供血，改善缺氧心肌的代謝紊亂，增加心肌耐缺氧的能力，抑制血小板聚集和抗血栓形成；紅花具有擴張冠狀動脈，增加冠脈脈血流量，能降低血液黏度，改善血液循環，能清除自由基，抑制細胞膜脂質過氧化作用。實驗顯示［4］，用VEGF轉染到慢性缺血的小型豬的心肌內，可在缺血局部顯著促進側支循環形成，將VEGF轉染到培養鼠心肌細胞中，結果測定被轉染的心肌細胞中VEGF蛋白水平較高［5］。而人類心肌生成新生血管的能力與心肌缺氧狀態下生成VEGF的量明顯相關。故丹紅注射液可能促進有冠狀動脈狹窄的老年冠心病患者側支循環的形成，從而很好地緩解了臨床癥狀。

［1］ Sato K，Wu T，Laham RJ，et al.Efficacy of intracoronary or intravenous VEGF 165in a pig model of chronic myocardial ischemia［J］.J Am Coll Cardiol，2001，37（2）：616-623.

［2］ 晉軍，黃嵐，祝善俊，等.VEGF在大鼠心肌梗死急性期表達的意義及蛻皮甾酮的促側枝循環作用［J］.中國介入心臟病學雜志，2002，10（3）：158-161.

［3］ Ray PS，Estrada HT，Sasaki H，et al.Early effect of hypoxia／reoxygenation on VEGF，Ang-1，Ang-2and their receptor in the rat myocardium：Implications for myocardial angiogenesis［J］.Mol Cell Biochem，2000，213（1-2）：145-153.

［4］ 施冰，鄧曉麗，吳曉兵，等.直接心肌注射血管內皮生長因子對慢性缺血心肌側枝循環生成的影響［J］.中國臨床保健雜志，2006，9（1）：56-60.

［5］ 郝亞榮，李建軍，李庚山.血管內皮生長因子真核表達載體的構建及其在培養鼠心肌細胞中的表達［J］.中華老年心血管病雜志，2005，7（1）：46-49.