快中子與DES復合誘變選育高產木聚糖酶黑曲霉菌株

韓冰瑩 陳 光 王 剛 費卓群

(吉林農業大學生命科學學院，吉林長春 130118)

飼料原料中含有較多的木聚糖(Xylan),木聚糖在動物體內難以被吸收利用,使進食動物消化道中的食糜體積變大,黏度增加,阻礙營養物質的吸收。食糜在消化道中的滯留會使動物生長減慢，嚴重降低生產性能[1]。木聚糖酶(xylanase)是一類能夠降解木聚糖的復合酶系，以內切的方式降解木聚糖分子中β-1，4木糖苷鍵[2]。木聚糖酶的研究對于木聚糖的利用有著重大意義,在飼料工業中具有廣闊的應用前景[3-4]。國外對于木聚糖酶的研究較多,國內的研究較少且所產木聚糖酶活力不高。本文通過快中子與硫酸二乙酯復合誘變黑曲霉AS3.350，篩選出一株高產木聚糖酶的黑曲霉,得到最佳的誘變條件，為誘變技術應用于微生物的品種改良提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌種

AS3.350購自中科院微生物研究所。

1.1.2 中子源

中子源是利用高壓倍加器使離子源產生的氘離子加速轟擊氘靶產生的14Mev快中子。該設備由東北師范大學輻射技術研究所提供。

1.1.3 試劑

pH值5.0檸檬酸緩沖液、DNS試劑、pH值4.5醋酸緩沖液、pH值6.0磷酸緩沖液、D-木糖溶液、硫酸二乙酯(DES)。

1.1.4 儀器

電子天平（德國賽多利斯股份公司）、PB-10型數字酸度計（德國賽多利斯股份公司）、低溫高速離心機（美國Sigma公司）、培養箱（上海新苗醫療器械制造有限公司）、722型光柵分光光度計（山東高密彩虹分析儀器有限公司）。

1.1.5 培養基

① PDA 培養基：葡萄糖 20 g、KH2PO41 g、Mg－SO4·7H2O 1.5 g、馬鈴薯 200 g、瓊脂粉 20 g、蒸餾水1 000 ml，pH 值自然；

② 液體發酵培養基：KH2PO426 g、CaCl25 g、Mg－SO4·7H2O 10 g、FeSO4·7H2O 0.16 g、酵母膏 10 g、麩皮20 g、Tween-80 5 ml，pH 值 5.0；……