鷹嘴豆的化學成分研究

陳玲芳，楊新洲，熊 慧，王劍俠，梅之南＊

（1.中南民族大學 藥學院，湖北 武漢430074；2.華中科技大學 藥學院，湖北 武漢430074）

鷹嘴豆（Cicer aretinum L.）為豆科（Leguminosae）鷹嘴豆屬（Cicer）植物，主產于半干旱熱帶地區（地中海氣候地區），中國新疆天山北坡海拔1300m 的木壘縣盛產鷹嘴豆已有2500年歷史［1］。作為維吾爾族常用藥，鷹嘴豆常被用來治療支氣管炎、黏膜炎、霍亂、便秘、痢疾、消化不良、營養不良等，其對糖尿病的有效治療率達到70%［2］。目前國內外關于鷹嘴豆化學成分研究較少，主要有黃酮、甾醇、有機酸、糖類、蛋白質等［3］。為深入開發其藥用和食療價值，我們對鷹嘴豆干燥種子進行了溶劑提取和色譜分離，從其乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇萃取部位分離得到7 個化合物。結合波譜數據和文獻資料，確定其分別為：亞油酸（linoleic acid，I）、β－谷 甾 醇（β－sitosterol，II）、對 羥 基 苯 甲 酸（phydroxybenzoic acid，III）、腺苷（adenosine，IV）、1，2－苯二甲酸二（2－甲基丙基）酯（1，2－benzenedicarboxylic acid，1，2－bis（2－methylpropyl）ester，V）、1－乙基－α－L－半乳糖苷（1－ethylα－L－galactoside，VI）、蔗糖（sucrose，VII）。其中化合物I，V，VII為首次從該植物中分離得到，I，V 亦為首次從該屬植物中分離得到。

1 儀器與材料

BrukerAM－400型（TMS為內標，瑞士Bruker公司）或Varian INOVA－500型（TMS為內標，美國INOVA 公司）核磁共振儀；VG Auto Spec－3000型質譜儀；Ultimate 3000型色譜儀（美國Thermo公司）；X－4 型顯微熔點測定儀（溫度計未校正，北京泰克儀器有限公司）；BETASIL C18（250mm×10mm）色譜柱（美國Thermo公司）；薄層層析硅膠H、柱層析硅膠（200～300目）、GF254高效薄層板（青島海洋化工廠）；MCI樹脂（CHP20P系列，75～150μm）（日本三菱化學公司）；Sephadex LH－20（Pharmacia公司）。所用色譜純為美國TEDIA 公司生產，其余試劑均為分析純（國藥集團化學試劑有限公司）。

鷹嘴豆采于新疆阿克蘇地區拜城縣，經中南民族大學藥學院萬定榮教授鑒定為豆科鷹嘴豆屬植物鷹嘴豆Cicer arietinum 的干燥種子。

2 提取與分離

鷹嘴豆干燥種子粗粉15kg，70%乙醇溶液浸泡提取3次，每次浸泡48h，回收乙醇。將所得的1 360g乙醇浸膏用水溶解后，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。

乙酸乙酯部位17g以二氯甲烷－甲醇（1∶0，40∶1，20∶1，10∶1，8∶1，5∶1，2∶1，1∶1，0∶1）梯度洗脫，用硅膠柱進行分離，洗脫液減壓濃縮，TLC檢驗合并相同留分后得到14個組分（Fr.1～14）。Fr.3 和Fr.4 分別進行硅膠柱層析，以環己烷：乙酸乙酯（10∶0→0∶10）梯度洗脫后得化合物I（1.9mg）和化合物II（2.8mg）。Fr.6 先后用葡聚糖Sephadex LH－20、半制備HPLC（CH3CN／H2O，20∶80）純化后得到化合物III（29.1mg）和化合物V（3.9mg），Fr.12先后用葡聚糖Sephadex LH－20和半制備HPLC（CH3CN／H2O，5∶95）純化后得到化合物IV（4.2mg）。

正丁醇部位70g用硅膠柱進行分離，以二氯甲烷－甲醇（19∶1，9∶1，8∶2，7∶3，5∶5，3∶7，0∶1）為洗脫劑，濃縮洗脫液，合并相同餾分后得到10個組分（Fr.1～10）。Fr.5用甲醇重結晶后得化合物VI（727.0mg），Fr.6用MCI樹脂吸附后得無色塊狀晶體VII（2.4mg）。

3 結構鑒定

化合物I淡黃色油狀物，C18H32O2，ESI－MS（m／z）：280［M］＋；1H－NMR（400MHz，CDC13）δ：2.35（2H，t，J＝7.2Hz，H－2），5.35（4H，m，H－9，H－10，H－12，H－13），2.77（2H，t，J＝6.1Hz，H－11），2.04（4H，m，H－8，H－14），0.89（3H，m，H－18）。以上數據和文獻［4］報道基本一致，故此化合物鑒定為亞油酸。

化合物II白色針狀晶體（乙酸乙酯），C29H50O，mp：138.0℃～139.0℃；Liebermann－Burehard 反 應 呈 陽性；1HNMR（400MHz，CDC13）δ：0.68（3H，s，H－18），1.01（3H，s，H－19），0.96（3H，d，J＝9.5Hz，H－21），0.85（6H，d，J＝6.4Hz，H－26，H－27），0.83（3H，t，J＝6.3Hz，H－29），；此外，3.52（1H，m，H－3），5.35（1H，d，J＝5.2Hz，H－6）。以上數據與文獻［5］報道基本一致。經TLC 與β－谷甾醇的標準品對照，5%硫酸香草醛加熱顯色呈紅色單一斑點，經TLC對照分析，兩者Rf值一致，并且混合熔點不下降。因而鑒定化合物II為β－谷甾醇。

化合物III白色粉末（丙酮），C7H6O3，mp：213.0℃～214.0℃；UV254下觀察有暗斑，FeC13反應顯藍黑色，溴酚藍反應 顯 黃 色；ESI－MS（m／z）：161［M ＋Na］＋；1HNMR（500MHz，CD3OD）δ：6.80（2H，d，J＝8.5Hz，H－3，H－5），7.87（2H，d，J＝8.5Hz，H－2，H－6），顯示有對位取代的苯環。此數據與文獻［6］報道的基本一致，故鑒定該化合物為對羥基苯甲酸。

化合物IV 白色柱狀結晶（甲醇），C10H13N5O4，mp：235.0℃～236.0℃；ESI－MS（m／z）：290［M ＋Na］＋；1HNMR（500MHz，DMSO－d6）δ：8.34（1H，s，H－2），8.12（1H，s，H－8），5.86（1H，d，J＝4.9Hz，H－1’），4.59（1H，H－2’），4.13（1H，H－3’），3.95（1H，H－4’），7.34（2H，s，NH2）。13CNMR（125MHz，DMSO－d6）δ：152.4（C－2），149.1（C－4），119.3（C－5），156.1（C－6），139.9（C－8），87.9（C－1’），73.5（C－2’），70.6（C－3’），85.9（C－4’），61.7（C－5’）。此數據與文獻［7］報道的基本一致，故鑒定該化合物為腺苷。

化合物V 黃色油狀物（甲醇），C16H22O4，ESI－MS（m／z）：301［M＋Na］＋；1HNMR（400MHz，DMSO－d6）δ：7.71（2H，dd，J＝4.8Hz，3.5Hz，H－3和H－6），7.53（2H，dd，J＝4.8Hz，3.5Hz，H－4和H－5），4.00（4H，d，J＝6.5Hz，H2－8和H2－8’），1.98（2H，m，H－9和H－9’），0.91（12H，d，J＝6.7Hz，H3－10 和 H3－10’，H3－l1 和 H3－l1’）。13CNMR（125MHz，DMSO－d6）δ：131.8（C－1和C－2），128.7（C－3和C－6），131.6（C－4和C－5），167.0（C－7和C－7’），71.1（C－8和C－8’），27.2（C－9和C－9’），18.9（C－10和C－10’，C－11和Cl1’）。此數據與文獻［8］報道的基本一致，故鑒定該化合物為1，2－苯二甲酸二（2－甲基丙基）酯。

化合物VI白色柱狀結晶（甲醇），C8H16O6，ESI－MS（m／z）：231［M ＋Na］＋；1HNMR（400MHz，CD3OD）δ：4.82（1H，d，J＝3.0Hz，H－1），3.77（1H，H－2），3.73（1H，H－3），3.51（1H，H－4），3.79（1H，H－5），3.67（2H，m，CH2），1.24（3H，t，J＝7.1Hz，CH3）。13CNMR（125MHz，CD3OD）δ：100.1（C－1），70.2（C－2），71.5（C－3），71.1（C－4），72.3（C－5），62.7（C－6），64.5（CH2），15.3（CH3）。此數據與文獻［7］報道的基本一致，故鑒定該化合物為1－乙基－α－L－半乳糖苷。

化合物VII白色塊狀晶體（甲醇）；1H－NMR（500MHz，C5D5N）δ：6.22（1H，d，J＝3.5Hz，H－1），4.19（1H，dd，J＝9.4Hz，3.1Hz，H－2），4.69（1H，t，H－3），4.24（1H，t，H－4），4.78（1H，dd，J＝7.5Hz，2.4Hz，H－5），4.51（1H，H－1＇），5.03（1H，H－3＇），4.53（2H，H－6，H－4＇），5.07（1H，H－5＇），4.35（1H，H－6＇）。13C－NMR（125MHz，C5D5N）δ：93.5（C－1），73.6（C－2），75.2（C－3），71.5（C－4），75.1（C－5），62.4（C－6），63.0（C－1＇），105.9（C－2＇），84.4（C－3＇），79.6（C－4＇），75.5（C－5＇），64.8（C－6＇）。以上數據與文獻［9］蔗糖的核磁數據一致，故將化合物VI鑒定為蔗糖。

4 討論

目前，我國新疆的維吾爾醫院用鷹嘴豆粉來治療疾病，并開發了一系列鷹嘴豆的保健食品并上市，本文通過對鷹嘴豆干燥種子化學成分的初步分離鑒定，證實其含有不飽和脂肪酸、植物甾醇、酚性物質、糖類物質。從其乙醇提取物的乙酸乙酯、正丁醇部位分離得到了7個化合物，其中化合物I，V，VII更為首次從該植物中分離得到，這為今后鷹嘴豆的資源綜合利用開發提供了新的理論基礎和科學依據。同時我們對該藥材的各提取部位進行了降血脂的細胞活性測試，證實其有較好的作用，也為研究鷹嘴豆抗糖尿病機理研究奠定了一定基礎。

［1］ 張金波，苗昊翠，王威，等.鷹嘴豆的應用價值及其研究與利用［J］.作物雜志，2011，1（1）：10－12.

［2］ 馮婷.鷹嘴豆營養保健價值及其應用［J］.中國食物與營養，2011，17（1）：68－69.

［3］ 高鵬.維藥鷹嘴豆化學成分的研究［D］.上海：東華大學，2007.

［4］ 劉大有，王曉穎，夏忠庭，等.兩頭尖化學成分研究［J］.長春中醫學院報，2003，19（3）：71.

［5］ 胡彥君，劉燊，王定勇，等.芒果葉的化學成分研究［J］.亞太傳統醫藥，2010，2（6）：18－19.

［6］ 吳冬凡，房志堅.金鈕扣根化學成分的研究［J］.廣東藥學院學報，2008，24（2）：139－140.

［7］ 譚永霞，孫玉華，陳若蕓.鷹嘴豆化學成分研究［J］.中國中藥雜志，2007，32（16）：1650－1652.

［8］ 史大永，韓麗君，孫杰，等.海藻基根硬毛藻的化學成分研究［J］.中國中藥雜志，2005，30（5）：347－350.

［9］ 王平安，劉明川，楊勝杰.柘木的化學成分［J］.中國實驗方劑學雜志，2011，17（15）：113－115.