降脂通便顆粒治療小鼠便秘的療效及對血中肽類神經遞質、一氧化氮水平的影響

蔣 筱 (廣西中醫學院，廣西 南寧 530001)

中醫認為便秘是脾胃氣機失調的一種表現，與胃腸動力學的關系非常密切。降脂通便顆粒主要由丹參、田七、川芎、澤瀉、人參、當歸、首烏、黃精等組成，具有益氣通脈、活血化瘀、潤腸通便之功效，臨床主要用于治療老年性便秘、習慣性便秘等氣血兩虛型患者，治療效果顯著。本實驗觀察降脂通便顆粒對小鼠便秘的治療效果以及對小鼠血清肽類神經遞質(SP)、一氧化氮(NO)水平的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 藥物及試劑 降脂通便顆粒(規格:5 g/袋，本院自行研制，使用前將顆粒磨細，以通過80目篩為標準，用0.9%氯化鈉溶液配成0.2、0.4 g/ml的混懸液)。SP、NO的 ELISA檢測試劑盒購自上海滬峰生物科技有限公司。

1.1.2 動物 清潔級(Ⅱ級)昆明種雄性小鼠48只，體重18～22 g，廣西醫科大學醫學實驗動物中心(桂動許字〈2000〉第001號)提供。實驗動物房合格證號:桂醫動字第23003號。

1.2 方法

1.2.1 分組 48只小鼠隨機分為4組:①健康對照組，②模型組，③降脂通便顆粒低劑量組(0.2 g/ml，0.2 ml/10 g)，④降脂通便顆粒高劑量組(0.4 g/ml，0.2 ml/10 g)，每組12只，單籠喂養，健康對照組飲水、飼料不限，其余各組控制飼料量平均為80 g·kg-1·d-1，飲水不限。除健康對照組外，均建立小鼠便秘模型:用5 000 g沸水浸泡番瀉葉500 g，10 min，75℃水浴中將濾液蒸發濃縮成含生藥1 g/ml的水煎液。按0.8 ml/d灌胃，小鼠正常飲食水，可造成脾虛模型;從第8天開始，停止灌胃番瀉葉水，采用隔天喂生大米4～8 g，自由飲水1次，可最終造成小鼠便秘模型，造模時間共需15 d〔1〕。造模后，模型組小鼠灌胃生理鹽水0.2 ml/10 g，治療組分別給予降脂通便顆粒0.2 g/ml(0.2 ml/10 g)和 0.4 g/ml(0.2 ml/10 g)，連續給藥7 d，所有動物自由飲水，飲食同前。

1.2.2 觀察指標 記錄各組小鼠4 h內大便次數、4 h濕糞數，稱量平均便重，并記錄第1次排便時間。

1.2.3 血液SP、NO水平檢測 收集血樣置于含EDTA的LV管中，防止血液凝固。然后將血樣轉移到含抑蛋白酶肽(0.6 TIU/ml血樣)的離心管中，輕輕混勻，抑制樣品中蛋白酶的活性。4℃，1 600 r/min，離心15 min，收集血漿。于-70℃保存。采用ELISA方法檢測SP和 NO水平〔2〕。

1.3 統計學方法 采用SPSS10.0統計軟件，計量資料以s表示，組間比較采用t檢驗。

2 結果

2.1 各組小鼠大便次數、平均便重、排便時間比較 與健康對照組比較，模型組大便次數減少、平均便重減少、排便時間延長、糞便硬并且量少(P＜0.05)。與模型組比較，各治療組大便次數明顯增多，排便時間減少，平均便重增加，大便變軟(P＜0.05)，且存在劑量依賴性。見表1。

表1 各組小鼠大便次數、平均便重、排便時間比較( s，n=12)

表1 各組小鼠大便次數、平均便重、排便時間比較( s，n=12)

與健康對照組比較:1)P＜0.05;與模型組比較:2)P＜0.05;與低劑量組比較:3)P＜0.05;下表同

組別 排便次數 第1次排便時間(min)平均便重(g)健康對照組5.2±0.9 62.3±7.5 0.092±0.003模型組 3.8±1.21) 143.3±23.61) 0.052±0.0021)低劑量組 7.1±1.11)2) 96.4±16.51)2) 1.034±0.0051)2)高劑量組 5.5±1.22)3) 73.5±12.42)3) 0.098±0.0032)3)

2.2 各組小鼠血清SP、NO水平比較 與健康對照組比較，模型組SP水平明顯降低，NO水平明顯增高(P＜0.05)。與模型組比較，各治療組SP水平明顯增加，NO水平明顯降低(P＜0.05)，且有劑量依賴性。見表2。

表2 各組小鼠血清SP、NO水平比較( s，n=12)

表2 各組小鼠血清SP、NO水平比較( s，n=12)

組別 SP(pg/ml)NO(ummol/L)健康對照組57.2±12.2 23.6±12.7模型組 18.9±6.21) 64.7±7.91)低劑量組 43.3±10.11)2) 49.2±13.51)2)高劑量組 60.5±15.72)3) 21.4±11.42)3)

3 討論

功能性便秘是指排除藥物原因及器質性疾病后，由其他原因引起的慢性便秘，現實生活中發生率比較高，主要原因是進食量、纖維素、飲水量的攝入少〔3〕;主要表現為直腸感覺功能衰退，肛門直腸反射減退，排便時盆底肌肉紊亂。祖國醫學認為本病之因“思慮，氣怫郁，氣壅大腸，大便乃結”。勞倦內傷、氣血陰津虧虛、肝腎不足、絡脈血行不暢，則大腸傳導無力而造成。肺氣虛津液輸布異常，氣機宣降失職，腸道津液虧少，脾氣虛，氣血津液無以化生，津血枯燥，而成無水行舟之候，腎氣虛開合失司，腸道津枯失于傳導。肺脾腎氣虛，津血虧乏是本病發病的主要原因〔4，5〕。

降脂通便顆粒主要由田七、丹參、川芎、人參、澤瀉、首烏、當歸、黃精等組成，具有益氣通脈，活血化瘀之功效。方中丹參去滯生新、善治血分，調經順脈，具有改善全身血液循環、降低血小板凝聚等作用。首烏固精益腎、養血益肝;黃精壯骨添精、補中益氣;田七散瘀定痛，止血消腫;配合人參益氣，當歸養血〔6〕;諸藥配合，具有益氣通脈、活血化瘀、潤腸通便之功效。臨床主要用于老年性便秘、習慣性便秘等氣血兩虛型患者，治療效果顯著。

已有研究表明，NO是一類腸道抑制性神經遞質，當患者由于某些原因出現腸壁內NO異常增多時，可導致結腸、直腸動力減弱，興奮性下降最終引起便秘。而SP對胃腸道的平滑肌具有興奮功能，慢性功能性便秘患者直腸組織活檢SP含量明顯下降，導致腸道處于麻痹狀態而出現便秘〔7，8〕。本研究也證實了這一點，同時發現降脂通便顆粒可能調節SP和NO在體內的變化，促進結腸和直腸恢復正常的生理功能。

綜上所述，降脂通便顆粒可以明顯增加排便次數及排便的重量，縮短便秘小鼠排便時間，改變小鼠大便的性狀，可能通過調節血清中SP、NO水平而發揮治療作用。

1 費改順，賈正平，孟慶常，等.潤腸便顆粒對小鼠便秘及腸推進作用的實驗研究〔J〕.解放軍軍醫學學報，2010;26(1):37-41.

2 郭淑云，徐江雁，高麗英.潤腸通便濃縮丸治療慢性功能性便秘30例臨床觀察及對患者血中SP、NO影響的研究〔J〕.中醫研究，2006;19(1):26-7.

3 張美玲，李 紅，張兆芳，等.大葉車前子膠膠囊對小鼠便秘影響的實驗研究〔J〕.甘肅中醫學院學報，2006;23(3):14.

4 林子洪，吳敬勛，肖梓棟，等.蘆薈對小鼠便秘的作用及其機制初探〔J〕.廣東醫學，2005;26(10):1336-8.

5 劉 彬，徐貴發，韓文婷，等.羅漢參對小鼠通便作用的研究〔J〕.山東大學學報(醫學版)，2009;47(2):95-8.

6 李明芳.益氣通便膠囊治療小鼠便秘的實驗研究〔J〕.山西醫科大學學報，2007;38(2):1103-5.

7 唐學貴，伍 靜，劉 芳.便塞通合劑調節慢性便秘大鼠血清GAS、MTL和SP含量實驗研究〔J〕.中華中醫藥學刊，2011;29(7):1549-51.

8 趙子劍.硝菔通結口服液對便秘大鼠腸神經遞質SP、VIP含量的影響〔J〕.山西中醫，2007;23(1):70-1.