肉羊人工授精技術(shù)操作規(guī)程

一、適用范圍

本技術(shù)適用于規(guī)模養(yǎng)羊戶、配種專業(yè)戶和綿（山）羊人工授精站。

二、器械、用具的洗滌和消毒

1. 新購入的用具、器械，要先將其表面擦干凈，用2%~3%碳酸鈉溶液清洗后，再用溫水沖洗幾次，并擦干或晾干，備用。

2. 集精杯、輸精器、吸管等用65％酒精棉球擦洗或煮沸消毒。

3. 假陰道先用65%酒精棉球擦洗（連續(xù)使用時，可用96%酒精棉球消毒），再用0.9%氯化鈉棉球擦洗數(shù)次，直至酒精氣味完全消失為止。擦洗假陰道時注意不要將凡士林和污垢殘留在橡皮內(nèi)胎皺褶內(nèi)。

4. 金屬器械可用65%酒精擦洗或用酒精燈火焰消毒。

5. 凡士林應(yīng)每天帶瓶隔水煮沸消毒20分鐘，瓶蓋下墊濾紙，瓶底墊脫脂棉或紗布，以防煮沸時破裂。

6. 工作服、紗布、毛巾等要經(jīng)常清洗，保持清潔，并用蒸汽法或煮沸法進行消毒。

7. 凡是接觸精液的器械和用具，使用前必須用0.9%氯化鈉溶液沖洗兩次以上。

三、精液的采取

1. 采精前的準(zhǔn)備

①種公羊的選擇與飼養(yǎng)管理。種公羊年齡應(yīng)在1.5~6.0歲之間，或體重在50千克以上時方可，要求體質(zhì)結(jié)實，生產(chǎn)性能好，生殖器官發(fā)育正常，有明顯品種特征，而且精液品質(zhì)優(yōu)良。公羊采精前1~1.5個月應(yīng)加強飼養(yǎng)管理，提高營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，每天每只供給0.75~1.5千克混合精料。若采精次數(shù)多，每天再補喂2~3個雞蛋。在加強飼養(yǎng)管理的同時，應(yīng)對公羊進行驅(qū)蟲、修蹄，并堅持每天刷拭羊體，每周進行2~4次采精訓(xùn)練。種公羊在配種前需排精15~20次，以排除陳舊精液，促進鮮精生成和提高其性欲。

②臺母羊的選擇。采精用臺母羊應(yīng)選體格適中（根據(jù)種公羊體格而定）、體質(zhì)結(jié)實、性情溫馴、健康無疾病的羊只。采精前應(yīng)對臺母羊后軀進行擦拭消毒（避免用有氣味的消毒劑），并提前2~3天注射雌激素誘導(dǎo)發(fā)情。若有發(fā)情的母羊更好。

③假陰道的準(zhǔn)備。將假陰道內(nèi)胎套在外殼上，要求內(nèi)胎舒展平整、表面光滑，再將集精杯插入假陰道一端的內(nèi)層，深入2~3厘米。采精前用漏斗向假陰道的夾層中注入50~55℃的溫水150~180毫升，保證采精時內(nèi)腔的溫度在38~42℃。用消毒過的玻璃棒蘸取滅菌的凡士林，由里向外均勻涂抹在內(nèi)胎前1/2區(qū)域，使之潤滑。從氣門活塞處向假陰道夾層內(nèi)吹氣加壓，使之松緊適度，一般以假陰道內(nèi)胎呈三角形為宜。

2. 采精方法

采精員蹲在母羊右側(cè)后方，右手橫握假陰道，活塞向下，中指和食指壓住集精杯，其他手指和手掌握緊假陰道，安裝集精杯的一端傾斜向上，假陰道與地面呈35~40度。當(dāng)公羊爬跨母羊伸出陰莖時，采精員右手將假陰道推向母羊臀部與公羊陰莖相平行，左手輕輕托住陰莖包皮，細心而迅速地將陰莖導(dǎo)入假陰道內(nèi)。當(dāng)公羊聳身向前完成射精后，隨公羊自母羊身上跳下時，采精員順著公羊的動作將假陰道慢慢向后移動，輕輕取下，立即將集精杯一端向下，豎立假陰道，打開活塞，放出空氣，取下集精杯，蓋好杯蓋，送精液處理室檢查。集精杯取下后，立即將假陰道夾層里的水放出，拆卸清洗，消毒備用。

3. 采精次數(shù)

種公羊采精次數(shù)要根據(jù)羊的年齡、體況和種用價值來確定。青年羊（1.5歲左右）每天采精次數(shù)以1~2次為宜，采精1天休息1天。成年公羊每天可采精3~4次，個別情況下可采精5~6次，每次采精應(yīng)有1~2小時的間隔時間。頻繁采精時，要保證成年種公羊每周有1~2天的休息時間，以免因過度消耗體力而造成體況明顯下降。

四、精液品質(zhì)監(jiān)測

采出的精液，應(yīng)立即進行品質(zhì)監(jiān)測，監(jiān)測方法采用肉眼監(jiān)測和顯微鏡監(jiān)測兩種。肉眼監(jiān)測主要是評定射精量、顏色、狀態(tài)等，顯微鏡監(jiān)測主要是評定活力和密度。體質(zhì)結(jié)實的公羊平均射精量為1~2毫升，精液外觀為乳白色，比較濃稠，帶有精液特有的氣味，并呈回轉(zhuǎn)滾動的云霧狀，精子的密度越大、活力越強，則其云霧狀越明顯。精子活力是評定精液品質(zhì)優(yōu)劣的重要指標(biāo)，一般對采精后、稀釋后、輸精前的精液應(yīng)分別進行活力檢查。方法是用已消毒的干凈玻璃棒取出原精液1滴，或用生理鹽水稀釋過的精液1滴，滴在擦洗干凈的干燥載玻片上，并蓋上干凈的蓋玻片，然后在室溫18℃以上條件下，用400～600倍的顯微鏡觀察。根據(jù)在顯微鏡下所能觀察到的直線前進運動精子占視野內(nèi)總精子數(shù)的百分率來評定精子活力。如果精子全部呈直線前進運動，活力記為1.0，如果有50%的精子向前直線運動記為0.5，其余依此類推。活力0.3以上的精液方可用于輸精。為了確定稀釋倍數(shù)和輸精量，還要對精子密度進行檢查。精子密度監(jiān)測一般采用評定法。評定法依據(jù)顯微鏡視野內(nèi)精子的稠密稀疏進行評定，操作簡單，應(yīng)用廣泛，適用于羊群比較分散的地區(qū)。密度評定一般分為稠密、中等、稀薄3個等級，以“密”、“中”、“稀”表示。“密”即在顯微鏡視野中布滿密集的精子，彼此間沒有空隙，難于看出單個精子的活動情況；“中”即在顯微鏡視野中的精子，彼此間有1~2個精子長度的空隙，能清楚地看到單個精子的活動情況；“稀”即在顯微鏡視野中僅能看到少數(shù)精子，分散于各處，彼此間空隙很大，稀疏零散。用于輸精的精液必須是密度評定為“密”或“中”的精液。

五、精液的稀釋

在溫度20~25℃和無菌條件下，用吸管將稀釋液沿集精杯壁緩緩注入需要稀釋的精液中，用玻璃棒輕輕攪勻。稀釋液兩種配方如下：①脫脂奶粉10克，卵黃10克，蒸餾水100毫升，青霉素10萬國際單位。②檸檬酸鈉1.4克，葡萄糖3.0克，卵黃20克，蒸餾水100毫升，青霉素10萬國際單位。按以上配方配制時，分別將奶粉、檸檬酸鈉、葡萄糖加入蒸餾水中，經(jīng)過蒸煮消毒、過濾，最后加入卵黃和青霉素，振蕩溶解后即制成了稀釋液。稀釋液應(yīng)新鮮，精液和稀釋液的溫度應(yīng)一致，一般可做2~4倍的稀釋，以供鮮精輸精之用。

六、精液的保存

1. 常溫保存。精液稀釋后，在18~20℃的室溫環(huán)境中，可保存6小時。

2. 低溫保存。將經(jīng)過品質(zhì)檢查和稀釋的新鮮精液，盛于消毒過的干燥試管中，覆蓋一層經(jīng)過消毒的液體石蠟，然后加塞蓋緊封嚴(yán)，在常溫的基礎(chǔ)上逐漸降低溫度至2~5℃時進行暫時保存，降溫全過程為2~3小時，一般可以保存24小時以上。經(jīng)過保存的精液，使用時必須逐步升高溫度，在38~40℃溫度下檢查，合格的方可用于輸精。

七、精液的運送

近程運送時可將精液在雙層集精杯中蓋好放入保溫瓶里，周圍用紗布包好，也可用滅菌小試管，將精液裝好封嚴(yán)，放入保溫瓶中運送。遠程運送時將降溫后的精液注入消毒過的試管內(nèi)，上面覆蓋一層消毒過的液體石蠟，管口用橡皮塞塞嚴(yán)，周圍裹一層藥棉并用紗布包好，試管外面貼上標(biāo)明公羊號、采精時間、精液量和精液品質(zhì)等的標(biāo)簽，裝入保溫瓶內(nèi)，保溫瓶內(nèi)放置一些冰塊或井水，即可運送。運送精液要盡量縮短時間，防止劇烈震動，同時，避免溫度、光線、化學(xué)藥品等造成的不良影響。

八、輸精

1. 輸精時間

比較適宜的輸精時間應(yīng)在發(fā)情中后期（即發(fā)情后12~16小時)。如以母羊外部表現(xiàn)來確定母羊發(fā)情，上午開始發(fā)情的，可在下午配種1次，間隔8~10小時再配種1次；下午和傍晚開始發(fā)情的，在次日上、下午各輸精1次。如母羊繼續(xù)發(fā)情，可再行輸精1次。

2. 輸精量

綿羊和山羊每次輸精時，應(yīng)輸入前進運動精子數(shù)0.5億個。對新鮮原精液，一般應(yīng)輸入0.05~0.l毫升，稀釋精液（2~3倍）應(yīng)為0.1~0.3毫升。

3. 輸精部位

母羊的輸精部位應(yīng)在子宮頸口內(nèi)1~2厘米處，但由于母羊的子宮頸細長，管腔內(nèi)有5~6個橫皺褶，因此需要仔細操作，才能在深部（0.5~1.5厘米）輸精。

4. 輸精方法

①子宮內(nèi)輸精。將待配母羊牽到輸精室內(nèi)的輸精架上固定好，將其外陰部和周圍擦洗干凈并消毒，輸精員右手持輸精器，左手持開腔器，先將開腔器慢慢插入陰道，再將開腔器輕輕打開，尋找子宮頸。如果在打開開腔器后，發(fā)現(xiàn)母羊陰道內(nèi)黏液過多或有排尿現(xiàn)象，應(yīng)先讓母羊排尿或設(shè)法使母羊陰道內(nèi)的黏液排凈，然后將開腔器再插入陰道，細心尋找子宮頸。子宮頸附近黏膜顏色較深，當(dāng)陰道打開后，向顏色較深的方向?qū)ふ易訉m頸口，可以順利地找到。找到子宮頸后，將輸精管前端插入子宮頸口內(nèi)1~2厘米深處，用拇指輕壓活塞，注入原精液或稀釋精液。

②陰道輸精。如果遇到初配母羊，陰道狹窄，開腔器插不進或打不開，無法找到子宮頸時，只有進行陰道輸精，但每次至少輸入原精液0.2~0.3毫升。輸精前，將裝有精液的塑料管從保存箱中取出，放在室溫中升溫2~3分鐘后，將管子的一端封口剪開，擠1小滴鏡檢合格后，將剪開的一端從母羊陰門向陰道深部緩慢插入，遇到有阻力時停止，再剪去上端封口，精液便自然流入陰道底部，然后拔出管子，把母羊輕輕放下，輸精完畢。輸精后的母羊應(yīng)保持2~3小時的安靜狀態(tài)，不要接近公羊或強行牽拉，因為輸入的精子通過子宮到達輸卵管受精部位需要一段時間。

5. 配種記錄

①種公羊采精記錄。主要記載采精日期和時間、射精量、精子活率、顏色、密度、精液稀釋倍數(shù)、輸精母羊號。

②母羊輸精記錄。主要記載輸精母羊號、年齡、輸精日期、精液類型、與配公羊號、精液稀釋倍數(shù)。

（作者聯(lián)系地址：甘肅省酒泉市南環(huán)西路26號酒泉市畜牧獸醫(yī)局 郵編：735000）