活絡鎮痛片鎮痛、抗炎作用實驗研究

劉 剛，胡還甫

（1.岳陽職業技術學院 生物醫藥系，湖南 岳陽414000；2.岳陽市洞庭湖區特色中藥材綜合利用重點實驗室，湖南 岳陽414000）

類風濕性關節炎在我國的發病率為0.32%～0.36%［1］，活絡鎮痛片對于類風濕等所致的關節疼痛有較好的解除作用［2］。活絡鎮痛片是由天南星、紅花、防風、白芷、當歸等藥物組成的片劑，臨床上具有良好的舒筋活血、消瘀止痛作用。現將其鎮痛、抗炎方面的實驗研究報告如下。

1 儀器與資料

1.1 儀器

TF－1000型電子天平，湘儀天平儀器廠；FA104型電子分析天平，上海精密科學儀器有限公司；SHH－WH－420型高效三用恒溫水箱，天津市泰斯特儀器有限公司；高效恒溫水浴鍋，北京長安科學儀器廠。

1.2 資料

實驗動物：清潔級昆明種小鼠，體重18～22g，雌雄不限。以上實驗動物均由華中科技大學同濟醫學院實驗動物學部提供。

實驗藥品：活絡鎮痛片由中國藥科大學提供（批號：040425）。

陽性對照藥：骨刺寧膠囊：山西忻州市云中制藥廠生產，批準文號：國藥準字Z10970098，生產批號20040403。

其他藥品及試劑：冰醋酸，上海佘山化工廠生產（批號：950710）。對二甲苯，武漢有機合成化工廠生產（批號：940826）。

2 方法與結果

2.1 對小鼠熱板法致痛的影響

2.1.1 分組與實驗方法

參照文獻［3］取18～20g雌性清潔級小鼠若干只，于室溫環境下放入恒溫水浴鍋頂加熱到（55±0.5）℃的500mL 燒杯中，每次1只，用秒表記錄小鼠自投入燒杯至出現舔后足的時間（s）作為該鼠的痛閾值，如此測定2次，間隔30min，取均值即為藥前痛閾值（平均值不超過30s者為合格）。取符合要求的小鼠50只，按體重隨機分成5組即：空白對照組，骨刺寧組，活絡鎮痛片低、中、高劑量組。各組動物每天灌胃給藥1 次，于第3 次給藥后分別于30min、60min、90min、120min按前法測定痛閾值，如痛閾值超過60s，即停止，測試值按60s計（時間過久，易燙傷足部）。

2.1.2 給藥方法

空白對照組給予蒸餾水10mL／kg，其它各組按小鼠設定劑量給藥，每天1次，連續給藥3天。

2.1.3 檢測指標及結果

實驗結束，比較各組間的痛閾值，結果見表1。

表1 活絡鎮痛片對雌性小鼠熱板法所致疼痛的影響 （±s）

表1 活絡鎮痛片對雌性小鼠熱板法所致疼痛的影響 （±s）

注：與空白組比較＊P＞0.05，＊＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.01。

組別 劑量（g／kg） 給藥前痛閾值（s） 給藥后痛閾值（s）及痛閾提高百分率（%）30min 60min 90min 120min空白對照組 等體積 18.8±2.6 19.0±2.3（1.1）19.0±4.4（1.1）19.8±4.5（5.3）19.3±2.5（2.7）骨刺寧組 0.96 18.6±1.8 23.0±2.7＊＊＊（23.7）28.0±2.9＊＊＊（50.5）26.8±4.0＊＊＊（44.1）23.8±3.2＊＊＊（28.0）活絡鎮痛片低劑量組 6 19.0±2.2 22.1±3.6＊＊（16.3）27.0±5.4＊＊＊（42.1）26.4±3.2＊＊＊（38.9）24.2±3.8＊＊＊（27.4）活絡鎮痛片中劑量組 12 18.9±1.5 23.7±3.3＊＊＊（25.4）30.7±4.9＊＊＊（62.4）28.2±3.5＊＊＊（49.2）25.5±4.7＊＊＊（34.9）活絡鎮痛片高劑量組 24 17.9±2.1 24.6±3.2＊＊＊（37.4）32.6±5.0＊＊＊（82.1）30.2±4.3＊＊＊（68.7）26.2±2.5＊＊＊（46.4）

括號內為痛閾提高百分率（%）＝（給藥后痛閾值－給藥前痛閾值）／給藥前痛閾值×100%

由表1可見：與空白對照組比較，活絡鎮痛片各劑量組在給藥后30～120min均有顯著性差異。各組痛閾提高百分率在藥后30min時，呈劑量相關性提高，在藥后60min最明顯，表明活絡鎮痛片對熱刺激具有較好的鎮痛作用。

2.2 對冰醋酸所致小鼠疼痛的影響

2.2.1 分組與實驗方法

參照文獻［4］方法，取體重18～22g清潔級小鼠50只，雌雄各半，隨機分成5組，分別為空白對照組，骨刺寧組，活絡鎮痛片低、中、高劑量組。于末次給藥30min后，每鼠腹腔注射（ip）0.6%醋酸0.1mL／10g，記錄30min內扭體次數及各鼠首次出現扭體的時間（潛伏期）。

2.2.2 給藥方法

空白對照組給予蒸餾水10mL／kg，其他各組按小鼠設定劑量給藥，每天1次，連續給藥3天。

2.2.3 檢測指標及結果

實驗結束，比較各組間的痛閾值，結果見表2。由表2可見：與空白對照組比較，活絡鎮痛片低、中、高劑量相關性地使小鼠扭體反應出現的時間延長，并顯著降低扭體反應的次數，其中高劑量組扭體抑制率大于50%作用非常明顯（P＜0.01），表明活絡鎮痛片有較好的鎮痛作用。

表2 活絡鎮痛片對冰醋酸所致小鼠疼痛的影響 （±s）

表2 活絡鎮痛片對冰醋酸所致小鼠疼痛的影響 （±s）

注：與空白組比較＊P＞0.05，＊＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.01。

組別 動物數（只） 劑量（g／kg） 疼痛潛伏時間（s） 扭體次數／30min 鎮痛率（%）空白對照組 10 等體積3.1±0.7 41.7±6.3－骨刺寧組 10 0.96 5.3±1.3＊＊＊ 28.3±3.0＊＊＊ 32.1活絡鎮痛片低劑量組 10 6 6.2±1.4＊＊＊ 28.8±4.9＊＊＊ 30.9活絡鎮痛片中劑量組 10 12 7.3±1.1＊＊＊ 24.8±7.3＊＊＊ 40.5活絡鎮痛片高劑量組 10 24 7.4±1.4＊＊＊ 20.6±6.5＊＊＊50.6

2.3 抗炎試驗

對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響［5］。

2.3.1 分組與實驗方法

取體重18～22g，雄性NIH 系清潔級小鼠50只，隨機分成5 組，分別為模型對照組，骨刺寧組，活絡鎮痛片低、中、高劑量組。各組動物每天灌胃給藥1次。連續給藥3d，末次給藥后30min，每鼠右耳兩面涂二甲苯0.1mL／只致炎，左耳不涂為正常耳對照，1h后脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下雙耳，用直徑7mm 打孔器沖下左耳及右耳同一部位的圓片，立即在分析天平上稱重。以左、右兩耳重量差值為腫脹度，計算腫脹抑制率＝（模型組平均腫脹度－給藥組平均腫脹度）／模型組平均腫脹度×100%。

2.3.2 給藥方法

空白對照組給予蒸餾水20mL／kg，各組按小鼠設定劑量給藥，每天1次，連續給藥3天。

2.3.3 檢測指標及結果

實驗結束，比較各組間的痛閾值，結果見表3。

表3 活絡鎮痛片對二甲苯所致耳廓腫脹的影響 （±s，n＝10）

表3 活絡鎮痛片對二甲苯所致耳廓腫脹的影響 （±s，n＝10）

注：與模型組比較＊P＞0.05，＊＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.01。

組別 劑量（g／kg） 右耳重（mg） 左耳重（mg） 耳廓腫脹度（mg） 腫脹抑制率（%）空白對照組 等體積 24.13±3.12 8.51±1.05 15.62±2.50—骨刺寧組 0.96 19.58±1.92 9.34±2.27 10.24±3.17＊＊＊ 34.4活絡鎮痛片低劑量組 6 18.86±2.49 8.71±0.89 10.15±2.67＊＊＊ 35.0活絡鎮痛片中劑量組 12 17.67±2.13 8.69±0.59 9.00±1.88＊＊＊ 42.4活絡鎮痛片高劑量組 24 16.87±2.79 9.24±1.17 7.63±2.16＊＊＊51.2

由表3可見，與模型對照組比較，活絡鎮痛片低、中、高劑量組均有顯著性差異，且能呈劑量相關性地減輕二甲苯所致小鼠耳廓腫脹，其中高劑量組腫脹抑制率大于50%，作用非常明顯（P＜0.01）。表明活絡鎮痛片有較好的抗炎作用。

2.4 對大鼠角叉菜膠致足跖腫脹的影響

2.4.1 分組與實驗方法

參照文獻［5］取體重180～220g，雄性SD 系清潔級大鼠50只，隨機分成5組，分別為模型對照組，骨刺寧組，活絡鎮痛片低、中、高劑量組。各組動物每天給藥1次，連續給藥4天，末次給藥后30min用螺旋測微器測量每鼠右后肢足跖的厚度為致炎前足跖厚度，連測2次，求其平均值為正常厚度。然后在每鼠足跖中央皮下注入1%角叉菜膠0.1mL／只。測量致炎后1h、2h、4h、6h大鼠右后足跖的厚度，計算腫脹度及腫脹抑制率。

2.4.2 給藥方法

模型對照組給予蒸餾水10mL／kg，各組按大鼠設定劑量給藥，每天1次，連續給藥4天。

2.4.3 檢測指標及結果

實驗結束，比較各組間的痛閾值，結果見表4。

由表4可見：活絡鎮痛片低、中、高劑量組對角叉菜膠所致大鼠足跖腫脹有顯著的抑制作用，作用持續數小時之久，其中在致炎4h作用最為明顯。

表4 活絡鎮痛片對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹度的影響 （mm＋s，n＝10）

表4 活絡鎮痛片對角叉菜膠致大鼠足跖腫脹度的影響 （mm＋s，n＝10）

注：與模型組比較＊P＞0.05，＊＊P＜0.05，＊＊＊P＜0.01。

組別 給藥前厚度 給藥后實測值及腫脹度（抑制率%）1h腫脹度 2h腫脹度 4h腫脹度 6h 腫脹度模型對照組 4.85±0.28 1.43±0.27 2.34±0.44 2.87±0.59 1.62±0.34骨刺寧組 4.97±0.60 1.15±0.51＊ 1.66±0.68＊＊＊ 1.77±0.84＊＊＊ 1.18±0.58＊＊（19.58） （29.06） （38.33） （27.16）活絡鎮痛片低劑量組 4.74±0.49 1.12±0.55＊ 1.63±0.70＊＊＊ 1.87±0.48＊＊＊ 1.28±0.49＊（21.68） （30.34） （34.84） （20.99）活絡鎮痛片中劑量組 4.71±0.41 1.12±0.38＊ 1.65±0.34＊＊＊ 1.90±0.37＊＊＊ 1.30±0.51＊（21.68） （29.49） （33.8） （19.75）活絡鎮痛片高劑量組 4.90±0.28 1.02±0.47＊＊ 1.63±0.34＊＊＊ 1.74±0.36＊＊＊ 1.02±0.33＊＊＊（51.11） （30.34） （39.37） （37.04）

3 討論

本實驗通過選用小鼠熱板法、冰醋酸致小鼠扭體法，對二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、大鼠角叉菜膠足跖腫脹法共四種實驗方法進行研究活絡鎮痛片的鎮痛抗炎的藥理作用。實驗結果顯示活絡鎮痛片具有良好的抗炎、鎮痛作用。類風濕關節炎屬祖國醫學中“痹癥”范疇。該病以感受風寒濕邪、邪瘀凝結、痹阻經絡為主，故在中醫治療上應根據邪氣的盛衰，運用祛風除濕、活血通絡等方法，標本兼治。活絡鎮痛片即為依據上述原理制定的以補血、活血、祛風為法則的抗炎止痛方劑，紅花、當歸均可使局部血液循環加快，當歸補血活血，達到改善局部血液循環，增加局部營養，促進炎癥消除并減輕炎癥介質分泌等作用；防風、南星、白芷等祛風止痛、祛風濕，上藥共達消除或減輕局部炎癥和疼痛的效果，故有促進病變關節康復的作用。

［1］ 田廣芳，楊小芳，雒生梅.類風濕，陡關節炎的護理體會［J］.中華實用中西醫雜志，2011，24（9）：42－43.

［2］ 高茉，高文遠，游強蓁，等.活絡鎮痛片質量標準研究［J］.天津中醫藥大學學報，2008，27（1）：33－34.

［3］ 李儀奎，中藥藥理實驗方法學［M］.上海：上海科學技術出版社，2006.

［4］ 宮毅，謝均，楊陽.銀芷肛腸熏洗劑鎮痛、抗炎作用的實驗研究［J］.中國中醫藥科技，2011，18（5）：398－399.

［5］ 馬四補，隋艷華，李開斌，等.汝痔康膠囊抗炎鎮痛作用的實驗研究［J］.貴陽中醫學院學報，2011，33（4）：146－147.