注射用奧美拉唑鈉HPLC含量測定方法研究

胡 翔，曹淑玲

（江西贛南海欣藥業股份有限公司，江西 贛州341000）

奧美拉唑鈉為奧美拉唑（Omeprazole，OME）的鈉鹽，是一種新型的胃酸分泌抑制劑——質子泵抑制劑。該藥是瑞典Haasle公司于1979年首次合成的苯并咪唑衍生物，是一種新型抗消化性潰瘍藥，與現有的抗消化性潰瘍藥物相比，具有更強大的抗酸作用。本品可以減少胃酸分泌，用于消化道潰瘍，反流性食道炎和卓－艾綜合征，應激狀態時并發的急性胃黏膜損害，和非甾體類抗炎藥引起的急性胃黏膜損傷的治療，預防重癥疾病（如腦出血、嚴重創傷等）胃手術后再出血等［1－4］。該品種已經得到廣泛的應用，為完善質量標準，更好地控制產品質量，我們對該品種的高效液相含量測定方法進行了研究。

1 儀器和試劑

1.1 儀器

Waters1525泵；2487紫外檢測器。

1.2 試劑

原料為錦州九泰藥業有限責任公司生產，批號：100402；對照品：中國藥品生物制品檢定所提供，含量：92.1% ，批號：100760－200501。注射用奧美拉唑鈉為本公司粉劑車間生產，批號：100713、100716、100717，乙腈為色譜純；水為注射用水；磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、三乙胺為分析純。

2 實驗方法和結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18（4.6mm×250mm，5μ，天津特納科學儀器公司）；保護柱：C18（4.6mm×20mm，5μm）；流動相：乙腈：磷酸鹽緩沖液（pH7.3）：三乙胺＝22∶78∶0.7；流速：1.0mL·min－1；波長：302nm 進樣量：20μL。

2.2 色譜行為和系統適應性

取奧美拉唑鈉對照品適量，加流動相溶解并稀釋制成含奧美拉唑鈉約0.2mg·mL－1的對照品溶液；按處方配方，用流動相將輔料溶液稀釋成不含奧美拉唑鈉的空白溶液；取注射用奧美拉唑鈉適量，加流動相溶解并稀釋制成含奧美拉唑鈉約0.2mg·mL－1的樣品溶液。分別進樣20μL，記錄色譜圖。結果表明，在奧美拉唑鈉色譜峰周圍，沒有輔料峰、溶劑峰和其它的干擾峰，故輔料和雜質對制劑的含量測定沒有干擾，奧美拉唑鈉的保留時間為6.5min，理論塔板數為4 900，色譜見圖1。

圖1 專屬性考察圖譜

2.3 線性試驗

取奧美拉唑鈉對照品，用流動相配制成濃度為16.56，18.63，20.70，22.70，24.84mg·mL－1的溶液，各取20μL 注入色譜儀，記錄色譜圖，以5次測定的峰面積平均值A 對樣品濃度C 做線性回歸，得回歸方程為：A＝117713.8C＋114419，r＝0.9998，n＝5。表明在16.56～24.84mg·mL－1范圍內線性關系良好。

2.4 最低檢測限和定量限

取標準曲線制備中奧美拉唑鈉對照品溶液，加流動相稀釋至0.02μg·mL－1，進樣20μL，色譜峰面積約為基線噪音的10倍，定量限為0.4ng。取標準曲線制備中奧美拉唑鈉對照品溶液，加流動相稀釋至約0.005μg·mL－1的溶液，進樣20μL，色譜峰面積約為基線噪音的3倍，檢測限為0.1ng。

2.5 精密度試驗

日內精密度：取原料（批號100402），在一個工作日內先后進行5次測定，每次測定獨立配制樣品溶液，以外標法計算含量，均值為99.9%，RSD為0.31%。

日間精密度：取原料（批號100402），以外標法計算含量，連續測定5天，計算日間精密度，均值為100.0%，RSD為0.35%。結果見表1。

表1 精密度測定結果 （%）

2.6 溶液穩定性

取上述線性關系項下奧美拉唑鈉濃度為20.7 mg·mL－1的溶液，室溫放置，分別于0、1、2、3、4h取樣20μL，注入色譜儀，記錄色譜圖，以外標法計算含量，均值為99.8%，RSD為0.41%，可見溶液在4h內穩定性好。

2.7 加樣回收率試驗

精密稱取奧美拉唑鈉對照品約16、20、24mg各3份，分別置100mL量瓶中，加入處方量的輔料適量，再加入流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。按外標法測定含量，計算回收率。平均回收率為100.0%，RSD為0.48%。結果見表2。

表2 回收率測定結果

2.8 樣品測定

精密稱取3批樣品和內容物適量，加流動相溶解并稀釋制成含奧美拉唑鈉約0.2mg·mL－1的溶液。精密稱取奧美拉唑鈉對照品適量，加流動相溶解并稀釋制成含奧美拉唑鈉約0.2mg·mL－1的溶液。以上溶液各進20μL，記錄色譜圖。結果見表3。

表3 注射用奧美拉唑鈉含量測定結果

3 討論

我們在比較了現行標準、美國藥典標準和國外廠家質量標準后，制定了本含量測定方法，出峰時間合適（保留時間約6.5min），無特殊試劑，操作簡單，穩定性好。各標準所用流動相和色譜柱見表4。

表4 各標準高效液相法中所用流動相和色譜柱比較

采用奧美拉唑鈉進口質量標準中的HPLC法對本品進行檢查時我們發現，奧美拉唑鈉有較好的峰形，但與雜質分離度稍差。而且，其使用的流動相條件較為繁雜，且硫酸氫四丁基胺不常用。我們參照USP中的流動相，并對流動相進行調整，在流動相中加入0.7%的三乙胺作為掃尾劑，色譜峰有了較為明顯改善，見圖2。

圖2 兩種流動相對照色譜

我們開發的本HPLC 試驗方法可以將在302nm 附近有吸收的雜質很好地分離，從而有效控制產品的質量水平。改進的高效液相色譜方法，對奧美拉唑鈉及其粉針制劑含量的測定結果精密度良好、準確度高，并且操作方便、快速，適合生產中對質量的控制和成品的檢驗工作。

［1］ 吳小平，周伏喜.靜滴國產奧美拉唑對消化性潰瘍并出血的療效及對胃內pH 值的影響［J］.醫學新知，2003，13（3）：140－141.

［2］ 艾尼·阿布都熱依木，木尼拉·馬哈德.靜脈滴注洛賽克粉針劑治療上呼吸道出血50例療效觀察［J］.新疆醫科大學學報，2004，27（1）：38.

［3］ 謝延.奧美拉唑預防應激性消化道出血的療效觀察［J］.現代醫藥衛生，2003，19（7）：851－852.

［4］ 楊獻良.奧美拉唑治療110例胃食管返流病臨床觀察［J］.中原醫刊，2003，30（18）：52－53.