類風濕關節炎關節破壞中免疫炎癥細胞與細胞因子的作用機制研究

摘要 目的：對RA患者免疫炎癥細胞及細胞因子間的作用機制進行分析和研究。方法：對臨床上50例RA患者血液樣本與25例對照組的血液樣本進行對比。結果：RA患者中的骨橋蛋白（OPN）的表達水平顯著高于對照組，表達指數水平高達8.2，是對照組的8倍。對RA患者的關節液進行檢測發現IL—12、IL—18、IL—10等細胞因子的水平顯著高于對照組。結論：在RA患者中的發病機制是OPN以細胞因子或調控因子的方式參與到RA的發病過程中，對OPN細胞及其受體因子的研究可為RA患者新藥的開發及治療提供新的途徑。

關鍵詞 類風濕關節炎細胞因子作用機制

doi：10.3969/j.issn.1007—614x.2012.28.007

類風濕關節炎（RA）是一種自身免疫反應的疾病，目前臨床對RA患者并沒有特效的療法，主要以激素治療和對癥治療為主，而對于RA患者發病機制的研究一直是國際上研究的熱點[1]。2010年1月～2012年1月收治RA患者50例，對其免疫細胞及細胞細胞因子的作用機制進行分析與研究，現報告如下。

資料與方法

選取50例確診為RA的患者作為研究對象，年齡38～55歲，其中男35例，女15例，病程3～8年，患者診斷按美國風濕疾病委員會制定的標準。選取25例非RA患者作為對照組，對照組男15例，女10例，年齡35～58歲。兩組在臨床資料上不存在差異性（P>0.05）。

方法：OPN水平的檢測：采用已包被了抗體的孔板，孔板洗凈后，在孔板上滴加OPN標準樣品，并將樣品置于37℃的恒溫箱中1小時，恒溫結束后將樣品洗滌7次，完畢后在每孔中加入0.1ml的標記抗體，并置于4℃冰箱中進行恒溫半小時。時間到點后，于每孔中加入0.1ml的顯色液，并于每孔中加入0.1ml的終止液，并于波長450nm的酶示儀上進行讀數[2]。

細胞因子的檢測：IL—12、IL—18、IL—10采用ELISA酶聯免疫反應檢測。

結果

RA患者中的OPN值顯著高于對照組的患者，ELISA酶聯結果顯示，RA患者中的OPN水平遠遠高于對照組（P<0.05），見圖1。

圖1 RA患者OPN值與對照組的比較

IL—12、IL—18、IL—10的水平RA組高于對照組（P<0.05），且IL—12、IL—18、IL—10的水平含量隨OPN值的增高而上升。見表1。

表1兩組IL—12、IL—18、IL—10的水平比較（pg/ml）

組別IL—12IL—18IL—10RA組250550118對照組1025022

討論

RA病理特征為關節滑膜出現慢性的炎癥，主要表現為在關節滑液積聚了大量的炎癥細胞及細胞因子，從而使得T淋巴細胞、巨噬細胞被激活，從而引起骨膜組織增生，形成新的血管。新增的骨膜組織具有能破壞酶細胞的介導，損害關節部位。國內外不少的資料顯示，RA屬于異質性疾病[3]。

RA作為自身免疫異常的疾病，其自身的抗原機理還不是十分明確。因此本研究通過ELISA酶聯法對患者的關節液中的OPN及細胞因子水平進行分析，發現在RA患者中的OPN及細胞因子的水平明顯高于非RA的患者。OPN在關節液中的水平含量達到15.2μg/ml，而IL—10、IL—12、IL—18含量也顯著地提高。由于OPN受體十分復雜，家族里的結構相似的分子有多種，OPN分子中含有多個功能域，表現為RGD與整合素結合，通過這些功能結構，OPN可以與縱多的受體結合，當它與細胞表面分子結構結合時可以促進細胞遷移、黏附以及轉導細胞信號。相關文獻報道，在小鼠體內OPN對巨噬細胞表達具有抑制作用，其發生的機制主要是與受體CD44相關。在CD4基因被剔除的小鼠中發現IL—12的表達仍然受OPN的影響。CD44基因可阻斷OPN對IL—10的抑制作用，在不含有CD44基因的小鼠中發現，IL—10的水平顯著升高[4]。

影響OPN對細胞影響的因素有多種，本實驗的結果只是初步證明OPN對受體的表達主要存在骨膜組織上，而CD44基因主要是骨膜組織中表達。但關于OPN與受體如何結合發揮作用，還需要進一步進行研究。

參考文獻

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