E—cadherin和α—catenin在宮頸鱗癌中的表達及臨床意義

摘要 目的：探討E—cadherin和α—catenin在宮頸病變組織中的表達及兩者之間的關系。方法：采用免疫組化SP法分別對15例正常宮頸組織、56例宮頸上皮內瘤變和56例宮頸鱗癌中E—cadherin和α—catenin表達情況。結果：E—cadherin和α—catenin在正常宮頸組織、CIN、SCC中的陽性表達率及表達強度逐漸降低，3組之間兩兩比較差異顯著（P<0.01）。它們表達在年齡、臨床分期各組之間比較無明顯差異（P>0.05），而在組織學分級、淋巴結轉移各組之間比較差異顯著（P<0.05），有統計學意義。α—catenin的陽性表達率隨著E—cadherin表達率的降低而降低，兩者呈正相關（rs=0.900，P<0.05）。結論：E—cadherin和α—catenin可能在宮頸癌的發生、發展、浸潤和轉移過程中起到重要作用，聯合檢測可以輔助作為宮頸癌前病變的早期診斷和監測預后的指標，同時也可以為臨床早期治療提供理論依據。

關鍵詞 宮頸鱗癌E—cadherinα—catenin

本研究通過（E—cadherin，E—cad）和α—catenin在宮頸癌中的表達，探討其與宮頸癌的發生、發展的關系及作為早期癌變生物學指標的可能性。

資料與方法

2007年1月～2012年1月婦產科門診或住院患者，經宮頸活檢、子宮頸錐切、子宮全切和廣泛性子宮切除術獲得并有完整隨訪資料的宮頸蠟塊組織標本117例作為研究對象，取同期對照組：正常宮頸組織15例（因子宮良性病變而行子宮全切術的宮頸組織標本）。所有標本均經過病理科醫師閱片證實并進行病理分級確診。宮頸浸潤癌按FIGO（2000年）分期標準進行分期。宮頸上皮內瘤變（CIN）患者56例，年齡24～60歲，平均37±2.1歲；正常宮頸組織15例，年齡28～58歲，平均40歲；宮頸癌患者56例，年齡25～60歲，平均42歲，各組年齡相比差異無統計學意義（P>0.05）。宮頸癌患者中，臨床分期Ⅰ、Ⅱ期和Ⅲ期分別為25、16和15例，病理分級高、中、低分化分別為18例、18例、20例，有淋巴結轉移者和無淋巴結轉移者分別為26例和30例，年齡<40歲者和≥40歲者分別為24例和32例。

主要試劑：鼠抗人E—cadherin、α—catenin單克隆抗體（即用型）、免疫組化SP試劑盒。

免疫組化染色觀察：采用免疫組織化學SP法分別對15例正常宮頸組織、56例CIN和56例宮頸癌蠟塊組織，連續切片，厚度4μm，經過2名病理科醫師閱片復片，采用PV—9002免疫組織化學染色S—P法檢測技術，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，分別檢測E—cadherin、α—catenin的表達。分別用己知陽性的切片做陽性對照，用PBS緩沖液分別代替一抗做陰性對照。

免疫組化結果判斷：光鏡下觀察，胞膜或胞漿內有連續線狀或斑點狀黃色至棕黃色顆粒沉積者為陽性染色細胞。表達強度參照Tseng等文獻進行染色評分，每張切片在400倍顯微鏡下選5～10個視野，每個視野100～200個細胞共計數1000個細胞，染色結果根據染色的強度和范圍評分，標準根據染色強度和分布范圍的半定量計分方法：即染色強度（A）分布范圍（B），判定標準如下：高倍鏡下胞膜或胞漿內染色情況（A）：①無著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分；②陽性分布范圍（B）：<5%為1分，5%～50%為2分，>50%為3分。兩項結果A和B相乘<2分為陰性（—），2～3分為弱陽性（+），4～5分為中度陽性（++），6～7分為強陽性（+++）。分析時將“（+）”以下視為低表達，“（++）”以上視為高表達。

統計學處理：采用SPSS13.0統計軟件包對數據進行統計學處理，用X2檢驗及Fisher’s精確概率法，相關性采用Spearman等級相關分析。P<0.05差異有統計學意義。

結果

E—cadherin、α—catenin在不同宮頸組織中的表達情況：正常宮頸上皮組織中E—cadherin、α—catenin均在基底層、棘層、顆粒層下部強陽性表達，細胞膜著色，可見棕黃色連續性線狀著色，胞漿內見棕黃色顆粒沉積，細胞相鄰處呈連續線性、同質或極性分布，并主要在基底層及大部分棘層細胞呈較強的胞膜或胞漿表達。CIN細胞著色較淡，于細胞膜極性分布（即極其靠近胞膜表面）。SCC細胞膜著色更淡或呈異質性著色，且明顯喪失極性，部分表達切片不表達。

E—cad、α—catenin在不同宮頸組織中的表達與宮頸鱗癌（SCC）臨床病理特征的關系：24例年齡<45歲和32例≥45歲患者的癌組織中，E—cadherin陽性表達率分別為25%、28.1%，兩者比較差異無顯著性（P>0.05）。25例Ⅰ期宮頸鱗癌中陽性表達率28%，16例II期宮頸鱗癌中陽性表達率31%，15例Ⅲ期宮頸鱗癌中陽性表達率20%，3組之間兩兩比較無顯著性差異（P>0.05）。在宮頸鱗癌中18例高分化、18例中分化、20例低分化患者中的陽性表達率分別為44.4%、33.3%、5%，隨著細胞分化程度的降低陽性表達率逐漸降低，即細胞分化越差，陽性表達率越低，表達強度逐漸減弱，高、中分化者之間比較無顯著性差異（P>0.05）；高分化和低分化、中分化和低分化者之間比較差異顯著（P<0.05）。30例無淋巴結轉移者陽性表達率40%，26例有淋巴結轉移者陽性表達率11.5%，前者明顯高于后者，差異顯著（X2=4.394，P<0.05），有統計學意義。同樣，24例年齡<45歲和32例≥45歲患者的癌組織中，α—catenin陽性表達率分別為33.3%、31.2%，兩者比較差異無顯著性（P>0.05）。25例I期宮頸鱗癌中陽性表達率32%，16例Ⅱ期宮頸鱗癌中陽性表達率37.5%，15例Ⅲ期宮頸鱗癌中陽性表達率13.3%，3組之間兩兩比較差異無顯著性（P>0.05）。