桂西地區少數民族瘧疾感染人群紅細胞CD35分子表達研究

【摘要】目的探討紅細胞免疫相關表面分子CD35與瘧疾感染的相關性。方法選擇桂西地區少數民族人群曾經感染或者正在感染瘧疾的587例患者（瘧疾易感組）和560例健康成年人（非易感組）作為觀察對象，運用流式細胞術檢測紅細胞表面分子CD35的表達水平，以探討瘧疾感染與紅細胞免疫功能的關系。結果瘧疾易感組紅細胞CD35平均熒光強度為（60.81±29.73），明顯低于非易感組的（67.93±25.05），組間比較有統計學意義（t=43935，P=0.000）。結論桂西地區少數民族瘧疾易感人群中，紅細胞表面分子CD35與瘧疾感染有著較為密切的聯系，為瘧疾感染的診斷和治療提供了新思路，其具體作用機制有待進一步研究。

【關鍵詞】瘧疾；紅細胞免疫；CD35

文章編號：1003-1383（2013）03-0321-03中圖分類號：R34 文獻標識碼：A

瘧疾是瘧原蟲寄生于人體所引起的傳染病，廣泛分布于熱帶、亞熱帶及溫帶邊緣地區，在多數熱帶地區仍然是一種多見的公共健康問題，而桂西地處亞熱帶，也是瘧疾的高發地區，其流行對該地區各民族分布產生了深遠影響。近年來許多研究表明，瘧疾的感染與紅細胞的黏附功能有關[1]，許多病理特征都與瘧原蟲感染和紅細胞相互作用有關。而紅細胞膜表面存在著大量的黏附相關分子，它們可能是紅細胞發揮抗瘧免疫功能的重要分子基礎[2]。因此，該課題成為醫學界研究的熱點之一，筆者曾經對相關課題作了初步研究[3～5]，本研究主要運用流式細胞術測定紅細胞表面分子CD35表達水平，旨在探討瘧疾的感染與紅細胞免疫功能的相關性，現報道如下。對象與方法1.實驗對象以桂西地區經歷過瘧疾流行的人群為研究對象，按瘧疾易感者和非易感者分為兩個組，其中瘧疾易感組587例，主要為曾經感染或者正在感染瘧疾的患者，均為居住在桂西地區的少數民族人群。男345例，女242例，年齡20～75（43.2±15.3）歲。另選擇560例健康成年人（非易感組）作

※基金項目：廣西自然科學基金課題（桂科自0728247）；國家自然科學基金課題（81160212）。

作者簡介：陳文成（1975-），男，廣西寧明縣人，碩士，暨南大學在讀博士，從事臨床微生物學及免疫學檢驗工作。E為對照，男357例，女203例，年齡20～72（44.8±13.8）歲，健康對照組為同一生活環境內、隨機抽樣的成年人，均未感染過瘧疾。兩組的年齡、性別、居住環境比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.主要試劑所有試劑均從BD公司購買：CD35熒光抗體、同型對照IgG1抗體、校準微球。軟件為BD FACSDivaTM，用BD FACSCantoTMⅡ流式細胞儀檢測。

4.統計學方法所得數據用SPSS 13.0軟件包進行分析，計量資料以（-±s）表示，兩獨立樣本的比較用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。 結果 瘧疾易感組紅細胞CD35平均熒光強度為（6081±2973），明顯低于非易感組的（6793±2505），組間比較有統計學意義（t=43935，P=0000）。說明紅細胞表面分子CD35與瘧疾感染有著較為密切的聯系。封四圖1為瘧疾易感者紅細胞CD35平均熒光強度檢測圖。討論瘧疾是種群進化進程中自然界對人類基因進行選擇的重要因素之一，人類的基因組中，有的基因賦予了人類抵抗瘧疾的能力，使他們能夠在瘧疾流行區中得以存活下來，這些基因在特定人群中也得以濃集，從而影響了人類的健康，也導致了某一群體中的這些基因特殊的平衡多態性[3]。桂西地區是壯族居住最密集的地區，也是地中海貧血等遺傳性紅細胞缺陷及瘧疾的高發區[6]，瘧疾危害在20世紀中期得到了有效控制，但在80年代該地區仍有三次大的流行，瘧疾又開始死灰復燃，并有愈演愈烈之勢[7]。

瘧疾感染和紅細胞免疫有密切聯系，近年來國外有研究顯示[8，9]，瘧疾的感染與紅細胞黏附功能有關。紅細胞膜表面的一些受體是瘧原蟲侵入紅細胞過程所必需的，已有研究表明紅細胞補體受體Ⅰ（CR1）介導的免疫黏附功能、異常血紅蛋白等紅細胞疾病均與抵抗瘧原蟲感染免疫有關[10]。多年前，CR1又被認為是瘧疾患者紅細胞形成玫瑰花結的主要受體，惡性瘧疾具有在試管中使未感染紅細胞黏附感染細胞形成細胞團的能力，在非洲的眾多研究中都發現，許多嚴重的瘧疾患者都有這種細胞成團的現象[11]。因此，研究者對CR1基因多態性越來越感興趣，不斷探索CR1在嚴重瘧疾致病中的作用。近年來的研究結果進一步支持CR1與嚴重瘧疾的致病性有關，首先，Cockburn等發現，在巴布亞新幾內亞，導致CR1低表達的基因型在瘧疾高發區極常見，且與嚴重瘧疾的保護相關聯[9]。但在其它人群的研究中都給出矛盾的報道，如在泰國成人中，低表達CR1與嚴重瘧疾保護有關；在岡比亞人群的研究中，低表達CR1對嚴重瘧疾無保護作用[8]。這些不同的觀察結果可能是因為CR1表達隨年齡變化，不同瘧疾高發區的流行型不同以及CR1與其他基因相互作用結果不同而異。因此，各地區有必要對CR1與瘧疾的致病和保護作用作進一步深入的研究。

我們的研究結果顯示：瘧疾易感者和非易感者紅細胞CD35平均熒光強度比較有統計學意義（P<0.01），瘧疾易感者紅細胞CD35分子的平均熒光強度明顯低于非易感者，該地區瘧疾易感者CR1低表達可能與瘧疾的保護相關聯。CR1是一個分子約為200KD的單鏈糖蛋白，是紅細胞執行免疫功能的主要分子基礎，其主要功能是通過CR1促進免疫復合物由循環中完全清除。無論是紅細胞上CR1 的表達降低，還是紅細胞黏附功能下降，均會引起機體免疫功能低下，而本研究結果顯示瘧疾易感者紅細胞CD35分子的平均熒光強度明顯低于健康對照者，提示紅細胞免疫功能下降，有利于瘧原蟲侵入，這為瘧疾感染的診斷和治療提供了新思路。

目前，雖然有關紅細胞的其他多種免疫功能并未得到普遍認可[11]，但已有相當數量的研究，尤其是近年來紅細胞黏附作用在抗瘧疾免疫方面的作用越來越受到人們關注[12]。而紅細胞膜表面存在著大量的免疫相關分子，如CD35、CD44、CD47、CD55、CD58、CD59等，它們中有些可能是紅細胞發揮抗瘧免疫功能的重要分子基礎，CD35是參與紅細胞免疫-±s）