鹿角壯骨膠囊對股骨頭壞死患者血清BGP，BMP2，TGFβ1，VEGF及骨密度的影響

【摘要】目的觀察鹿角壯骨膠囊對股骨頭壞死患者血清骨鈣素（BGP）、骨形態發生蛋白2（BMP2）、轉化生長因子β1（TGFβ1）、血管內皮細胞生長因子（VEGF）及骨密度的影響。方法117例（133髖）股骨頭壞死患者，隨機分為治療組60例（68髖），口服院內制劑鹿角壯骨膠囊治療，對照組57例（65髖），采用口服仙靈骨葆膠囊。兩組服藥方法為每日3次，每次3粒，每日總劑量450 mg，均以3個月為1個療程，共治療2個療程。兩組分別于治療前后采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測患者血清中BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF含量水平及采用雙能X線骨密度儀檢測股骨的骨密度。結果治療組治療2個療程后血清BGP、BMP2、VEGF含量水平及股骨頸、股骨粗隆、Ward’s三角骨密度高于對照組（P<0.01）；而治療組血清TGFβ1水平低于對照組（P<0.01）。結論鹿角壯骨膠囊對股骨頭壞死的治療作用可能與促進骨鈣素、骨形態發生蛋白2、血管內皮細胞生長因子合成及降低轉化生長因子β1的表達水平、改善骨密度有關。

【關鍵詞】鹿角壯骨膠囊；股骨頭壞死；中藥療法；骨鈣素

近年來研究表明，股骨頭壞死的骨組織的修復與骨鈣素（bone glaprotein，BGP）[1]、骨形態發生蛋白2（bone morphogenetic proteins2，BMP2）[2～3]、轉化生長因子β1（transforminggrowth factorbeta1，TGFβ1）[4]及血管內皮細胞生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）關系密切[5]。鹿角壯骨膠囊是我院骨傷科臨床應用多年治療股骨頭壞死的院內制劑，具有通經活絡、補益肝腎、強筋壯骨的功效。本研究采用鹿角壯骨膠囊對股骨頭壞死患者進行治療干預，檢測血清BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF含量及骨密度的水平，探討鹿角壯骨膠囊治療股骨頭壞死的機制。資料與方法1.一般資料病例選擇2008年2月～2012年2月在貴州省黔南州中醫醫院骨傷科就診的確診為股骨頭壞死的患者117例，按隨機原則將患者分為兩組，治療組60例（68髖），其中男49例，女11例；年齡28～60歲，平均年齡（46.28±3.27）歲；病程54～216 d，平均病程（69.21±3.59）d；發病原因：激素性股骨頭壞死13例，酒精性11例，激素+酒精31例，創傷性3例，特發性2例。按ARCO分期：Ⅰ期10髖，Ⅱ期19髖，Ⅲ期11髖，Ⅳ期28髖。正位分型：A為2髖，B為16髖，C1為27髖，C2為23髖。蛙位分型：A為2髖，B為18髖，C1為25髖，C2為23髖。對照組57例（65髖），其中男48例，女9例；年齡29～58歲，平均年齡（45.27±3.53）歲；病程46～201 d，平均病程（68.44±3.27）d；發病原因：激素性股骨頭壞死10例，酒精性9例，激素+酒精35例，創傷性2例，特發性1例。按ARCO分期：Ⅰ期9髖，Ⅱ期20髖，Ⅲ期7髖，Ⅳ期29髖。正位分型：A為2髖，B為13髖，C1為30髖，C2為20髖。蛙位分型：A為2髖，B為15髖，C1為27髖，C2為21髖。兩組患者性別、年齡、病程、發病原因、ARCO分期、正位分型、蛙位分型等一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.治療方法①治療組：口服鹿角壯骨膠囊（由鹿角霜、黃芪、枸杞、熟地、骨碎補、鍛自然銅、白術、川芎等藥物組成，0.5 g/粒，由黔南州中醫醫院制劑室提供，院內制劑），4粒/次，3次/d。②對照組： 口服仙靈骨葆膠囊（由淫羊藿、續斷、補骨脂、地黃、丹參、知母組成，0.5 g/粒，貴州同濟堂制藥股份有限公司，批準文號：國藥準字Z20025337，批號080414099，090211067，100415689，110814027，120915013）4 粒/次，3次/d。兩組均以3個月為1個療程，共治療2個療程。③功能鍛煉[6]：兩組均采用朱氏坐位鍛煉法，配合臀肌收縮，髖伸、屈、外旋、內旋、外展、內收等動作進行功能鍛煉，功能鍛煉以自動為主，被動為輔，運動量要由小到大，由少到多，循序漸進，動作要協調，逐步增加。以鍛煉后休息1小時不感到疲勞疼痛為度。以改善血運和防止關節活動障礙，同時配合皮牽引治療[7]。

3.Harris評分分別于治療前、治療第1療程、治療第2療程采用Harris評分方法對患者疼痛、功能、畸形及活動范圍進行評分，總分為100分[8]。

4.指標檢測①BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF檢測：兩組均在治療前、治療第1療程、治療第2療程取肘靜脈血5 ml，離心后取血清保存在-80℃冰箱內待測。采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF的水平。操作按試劑盒（美國RD公司提供）說明進行。②骨密度檢測：分別于治療前、治療第1療程、治療第2療程采用Hologic QDR40000（S/N 55198） 雙能X線骨密度儀，檢測患者髖部骨密度（股骨頸、股骨粗隆、Ward's三角），單側患者檢測單側，雙側患者檢測雙側，結果由儀器配套打印機自動打印輸出。

5.統計學方法數據處理采用SPSS 16.0軟件進行，數據均采用（-±s）表示，組間比較先進行正態分布和方差齊性檢驗，方差不齊者采用秩和檢驗，符合條件者采用t檢驗（兩組間），P<0.05為差異有統計學意義。結果 1.兩組治療前后Harris評分比較治療前，兩組Harris評分比較差異無統計學意義（P>0.05）。治療2個療程后，兩組Harris評分均明顯升高，與治療前比較差異均有統計學意義（P<0.01），且治療組Harris評分優于對照組（P<0.01）。見表1。

2.兩組治療前后BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF含量水平比較治療前，兩組血清BGP、BMP2、TGFβ1及VEGF含量水平比較差異無統計學意義（P>0.05）。治療2個療程后，兩組血清BGP、BMP2及VEGF含量水平明顯升高，與治療前及治療1個療程比較，差異均有統計學意義（P<0.01），且治療組優于對照組（P<0.01）；而血清TGFβ1水平，治療1個療程后兩組較治療前升高，差異均有統計學意義（P<0.01），治療第2個療程后，兩組TGFβ1水平較治療第1個療程下降（P<0.01），但治療組下降更加明顯（P<001）。見表2。

3.兩組治療前后股骨頭骨密度比較治療前，兩組股骨頸、股骨粗隆及Ward’s三角骨密度比較差異無統計學意義（P>0.05）。治療2個療程后，兩組股骨頸、股骨粗隆及Ward’s三角骨密度均明顯升高，與治療前比較，差異均有統計學意義（P<0.01），且治療組股骨頸、股骨粗隆及Ward’s三角骨密度改善優于對照組（P<0.01）。見表3。表2兩組治療前后BGP、BMP2、TGFβ1、VEGF含量水平比較（-±s）時點治療組（n=60） BGP（ng/ml）BMP2（pg/ml）TGFβ1（μg/L）VEGF（pg/ml）對照組（n=57） BGP（ng/ml）BMP2討論股骨頭壞死是骨科常見的疑難病癥之一，常常由飲酒、激素、創傷等引起，至今發病機理尚未明了。盡管該病在診斷上取得很大進展，但在治療上進展依然緩慢，特別是藥物治療仍是世界性難題。中醫認為股骨頭壞死屬“骨痹”、“骨蝕”范疇。病后瘀血凝滯，而腎精虧虛，精不生髓，髓不養骨，導致骨失濡養，引起骨細胞和骨髓細胞死亡及隨后的修復，繼而導致股骨頭結構改變，股骨頭塌陷，關節功能障礙的疾病?！端貑枴らL刺篇》曰：“病在骨，骨重不可舉，骨髓酸痛，寒凝名曰骨痹?！庇秩纭端貑枴け云吩唬骸拔迮K皆有合病久而不去，內舍于其所合也，故骨痹不已，復感于邪，內舍于腎?！惫时静兖鲅宰瑁瑑葥p肝腎。治宜活血化瘀通痹，兼以補肝腎強筋骨。鹿角壯骨膠囊是我院胡建山主任醫師結合多年的臨床實踐篩選出來的治療股骨頭缺血性壞死的有效中藥制劑。方中鹿角霜、骨碎補、自然銅具有補腎強筋骨，促進骨折愈合功能；枸杞、地黃補肝腎、滋陰養血，增強補腎筋骨之功；黃芪、白術補氣生血，增強機體痛后康復的能力；川芎引氣活血，使補而不留瘀之弊。諸藥合用，具有補肝腎、益氣血、強筋健骨之功。標本兼治，筋骨并重達到瘀去、新生、骨修復的目的。

據文獻報道，BGP是由成骨細胞產生和分泌的一種非膠原蛋白，主要功能是維持骨的正常礦化速率、抑制異常的羥磷灰石結晶的形成，促進非結晶鈣磷酸鹽向羥磷灰石轉化，提高骨強度[1]。BGP大多沉積于骨基質，1/3進入血液循環。血清中骨鈣素濃度可特異性地反映成骨細胞的活性，是骨形成功能的良好標志，血清骨鈣素檢測可反映股骨頭壞死后伴成骨細胞的功能狀況[9]。BMP是TGFβ家族中的一個亞家族，BMP2是BMP家族中一員，可誘導未分化的間充質細胞向軟骨細胞和成骨細胞分化，并使其表達血管內皮生長因子，在骨組織中創造一個有利于血管化的環境[10]。骨組織的再生中，血管再生是關鍵環節，血管內皮生長因子是機體內促進血管生長最重要的生長因子，血管內皮生長因子主要通過促進局部血管增生和成骨細胞分化而參與了BMP的誘導成骨活動[11]，促進骨的再生和修復。

本文結果顯示：治療2個療程后治療組血清BGP、BMP2、VEGF含量水平高于對照組（P<001）。鹿角壯骨膠囊治療股骨頭壞死的療效與BGP、BMP2、VEGF的表達正相關，提示BGP、BMP2、VEGF因子含量升高，可提高骨組織修復能力。本文結果還顯示：治療組血清TGFβ1水平隨著療程增加而降低，與文獻報道相符[12]。結果表明：鹿角壯骨膠囊能有效改善股骨頭微循環障礙，其機制可能為促進骨鈣素、骨形態發生蛋白2、血管內皮細胞生長因子表達及降低轉化生長因子β1的表達水平，增強股骨頭局部骨密度，促進壞死股骨頭的修復。

參考文獻

[1]鄭曉輝，方秀斌.骨鈣素的基礎與應用研究進展[J].解剖科學進展，1999，5（4）：327329.

[2]Sder S， Hakimiyan A， Rueger DC，et al. Antisense inhibition of osteogenic protein 1 disturbs human articular cartilage integrity[J].Arthritis Rheum，2005，52（2）：468478.

[3]Chubinskaya S，Hurtig M，Rueger DC.OP1/BMP2 in cartilage repair[J]. Int Orthop，2007， 31（6）：773781.

[4]齊振熙，康靖東，李樹強. 活血化瘀中藥對激素性股骨頭缺血壞死模鼠TGFβ1表達的實驗研究[J].中國骨傷，2009，22（8）：596598.

[5]郝廷，劉萬林，蘇秀蘭.血管內皮生長因子與激素性股骨頭壞死關系的研究進展[J].臨床醫學工程，2009，16（1）：8587.

[6]朱盛修. 股骨頭缺血性壞死診療學[M].長沙：湖南科學技術出版社，1999：320323.

[7]扈文海. 股骨頭壞死[M].北京：軍事醫學科學出版社，2007：256.

[8]Harris WH. Hybrid total hip replacement：rational and intermediate clinical result[J].Clin. Orthop，1996，333（18）：155164.

[9]何偉，徐傳毅，李雄，等. 創傷性股骨頭壞死血清骨鈣素改變及意義[J].骨與關節損傷雜志，2001，16（3）：230231.

[10]Kakudo N，Kusumotok，Wang YB，et al.Immunolocalization of vascular endothelial growth factor on intramuscular ectopic osteoinduction by bone morphogenetic protein2[J].Life Sci， 2006，79（19）：18471855.

[11]Peng H，UsasA，OlshanskiA，et al.VEGF improves， whereas sFitl inhibits BMP2induced bone formation and bone healing through modulation of angiogenesis[J].Bone Miner Res， 2005，20（11）：20172027.

[12]劉濤，冉德州.活血化瘀、補腎益氣中藥對大鼠骨折愈合中TGFβ1的影響[J].成都體育學院院報，2002，28（1）：9296.

（收稿日期：2013-03-25修回日期：2013-06-10）

（編輯：潘明志英文審校：梁宇）