銀屑膠囊的薄層色譜定性鑒別

[摘要] 目的 建立銀屑膠囊的薄層鑒別方法。 方法 采用薄層色譜法對銀屑膠囊中的土茯苓、菝葜分別進行定性鑒別。 結果 在薄層色譜中能檢出土茯苓、菝葜藥材，薄層色譜斑點清晰，陰性對照溶液無干擾，且專屬性強，重現性好。 結論 所建立的薄層色譜方法可用于該制劑的質量控制。

[關鍵詞] 銀屑膠囊；質量控制；薄層色譜法

[中圖分類號] R286.0 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）01-111-02

銀屑膠囊是根據中醫理論研制的中藥復方制劑，處方由土茯苓、菝葜兩味藥材按一定比例組成，具有清熱解毒、祛濕除痹、活血化瘀、祛風止痛的功效，臨床用于治療銀屑病、濕疹等疾病。為控制該藥的內在質量，確保用藥安全有效，采用薄層色譜法（TLC）進行了定性鑒別，旨在為本品質量標準的制訂提供依據，現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

3 L PQ3120BENCH超聲處理器，日本島津薄層鋪板器，層析缸等。

1.2 試藥

硅膠G（薄層層析用），青島海洋化工廠，國家藥典委員會監制；所用試劑均為分析純。土茯苓對照藥材（批號121439-200401）、菝葜對照藥材（批號121466-200501），均由中國藥品生物制品檢定所提供。

2 方法與結果

2.1 試液的制備

2.1.1 供試品溶液制備 取本品約3 g，加水60 mL，超聲處理30 min，放冷，轉移至分液漏斗中，加鹽酸調pH至2，再加入乙酸乙酯震搖提取兩次，每次取用乙酸乙酯量均為20 mL，合并兩次的提取液，通過鋪有無水硫酸鈉的漏斗后將濾液蒸干，加入甲醇1 mL使殘渣溶解，溶解液作為供試品溶液。

2.1.2 陰性液的制備 （1）取缺菝葜的陰性樣品，按照供試品溶液制備的方法制成菝葜的陰性液，由于處方僅為土茯苓、菝葜兩味藥材按一定比例組成，因此該陰性液即為土茯苓的藥材溶液。（2）同（1）法，取缺土茯苓的陰性樣品，按照供試品溶液制備方法制成土茯苓的陰性液，該陰性液即為菝葜的藥材溶液。

2.1.3 對照藥材溶液的制備 （1）菝葜對照藥材溶液的制備：取菝葜對照藥材5 g，加水100 mL，加熱回流4 h，濾過，濾液濃縮至約10 mL，加乙醇15 mL，攪拌，靜置，濾過，濾液蒸干，按供試品溶液制備方法同法制成對照藥材溶液。（2）土茯苓對照藥材溶液的制備：取土茯苓對照藥材5 g，加水100 mL，加熱回流4 h，濾過，濾液濃縮至約10 mL，加乙醇15 mL，攪拌，靜置，濾過，濾液蒸干，按供試品溶液制備方法同法制成對照藥材溶液。

2.2 薄層鑒別

2.2.1 菝葜的鑒別 按照薄層色譜法[1]（《中國藥典》2010年版第一部附錄Ⅵ B）進行試驗，取硅膠G薄層板，分別吸取上述3種溶液（即供試品溶液、菝葜陰性液及菝葜對照藥材溶液）各15 μL，點于此板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（15︰2︰1）為展開劑進行展開，展開后取出晾干。結果：在色譜中，供試品與對照藥材色譜相應位置上，顯示出相同顏色的斑點，且Rf值適中，斑點的分離度、重現性均較好，陰性樣品在相應位置上無干擾，專屬性良好。見圖1。

2.2.2 土茯苓的鑒別 照薄層色譜法[1]（《中國藥典》2010年版第一部附錄Ⅵ B）進行試驗，取硅膠G薄層板，分別吸取上述3種溶液（即供試品溶液，土茯苓陰性液及土茯苓對照藥材溶液）各10 μL，點于此板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（15︰5︰1）為展開劑進行展開，展開后取出晾干。以三氯化鐵乙醇溶液為顯色劑噴板進行顯色。結果：在色譜中，供試品與對照藥材色譜相應位置上，顯示相同顏色的斑點，且Rf值適中，斑點的分離度及重現性均較好，陰性樣品在相應位置上無干擾，專屬性良好。見圖2。

3 討論

土茯苓和菝葜兩種藥物的乙酸乙酯提取物有顯著的抑菌抗炎作用，且抑菌范圍廣，抑菌活性強[2-3]。因此在試液的制備中采取乙酯乙酯萃取成分加以分析。

土茯苓藥材中含有琥珀酸[4]，而菝葜藥材中未描述有琥珀酸，以琥珀酸為標準品，甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5︰4︰1）為展開劑，展開后取出晾干，在105℃加熱半小時，放冷，噴以0.05%溴甲酚綠乙醇溶液進行鑒別[5]，結果在與對照品色譜相應位置上，未顯相同顏色的斑點，故未列入標準。

在土茯苓的薄層色譜鑒別中，曾參考《中藥活性成分分析手冊》中土茯苓的鑒別方法[6]，以三氯甲烷-乙酸乙酯（9︰1）為展開劑，展開后取出晾干，以10%磷鉬酸乙醇溶液為顯色劑進行噴板顯色，在105℃加熱至斑點顯色清晰。但結果不理想，專屬性不好。

在試驗中，曾以三氯甲烷-丙酮-冰醋酸（7︰2︰1）為展開劑進行研究，供試品色譜中，在與土茯苓陰性液色譜相應的位置上，顯示出相同黃色的斑點，菝葜陰性液（即土茯苓藥材溶液）在此處無斑點，故本方法具有專屬性，但Rf值太大，故還需調整展開劑。另將薄層板噴以三氯化鐵乙醇溶液進行顯色，供試品色譜中，在與菝葜陰性液色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，土茯苓陰性液（即菝葜藥材溶液）在此處無斑點，故本方法具有專屬性，但Rf值太小，故還需調整展開劑。

采用薄層色譜法，分別以菝葜、土茯苓為對照藥材進行定性鑒別，試驗結果表明，本方法簡便、準確、專屬性強。由于兩種藥材中的檢測成分有極性差異，因此采用不同的展開系統進行鑒別，并同時采用對照藥材加以鑒別。實驗證明，采用薄層色譜鑒別處方中的土茯苓、菝葜的特征色譜斑點，重現性好，專屬性強，陰性對照液無干擾，可以作為該制劑的定性質量控制標準。

[參考文獻]

[1] 國家藥典委員會.中國藥典一部[M].北京：化學工業出版社，2010：附錄34.

[2] 陳紅梅，秀蘭，吳占全，等.土茯苓的化學與藥理研究進展[J].中國民族醫藥雜志，2008，11（11）：71-73.

[3] 晏綠金，文莉，于國平，等.菝葜活性部位抗炎機理研究[J].中藥材，2008，31（8）：1235-1236.

[4] 李強.土茯苓現代研究概述[J].中國藥業，2008，17（14）：76-77.

[5] 中華人民共和國衛生部.中華人民共和國衛生部部頒藥品標準《腦心清片》[S].WS3-B-3974-98，Z20-294.

[6] 常新全，丁麗霞.中藥活性成分分析[M].北京：學苑出版社，2002：105-106.

（收稿日期：2012-09-28）