酶標儀在加樣儀中比對、性能確認的運用

[摘要] 目的 建立全自動加樣儀儀器的比對、性能確認的可靠、簡易方法。 方法 利用酶標儀比色方法對全自動加樣儀進行儀器的比對、性能確認，以期對全自動加樣儀狀態進行定期或時時監控，以避免加樣過程的漏加而引起非試劑因素的漏檢。 結果 不同的全自動加樣儀不同加樣量的吸光度均值經過調液體曲線校正后，加樣儀1與加樣儀2加樣結果較為接近。 結論 避免酶聯檢測中因儀器因素所引發的漏檢，提高設備運行效率，減少非預期的風險。

[關鍵詞] 全自動加樣儀；加樣；性能確認；比對；酶標儀

[中圖分類號] R457 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2013）01-83-02

2012發布的《血站基本操作技術規程》4.3.1新的或者經過大修的檢測設備在正式投入正常使用之前應經過確認。新設備的確認應包括安裝確認、運行確認和性能確認。經過大修的設備根據需要進行適當的確認，必要時應進行計量檢定或校準。4.3.3如果使用多臺設備測一個項目，應對設備之間的性能和差異進行比較。

1 材料與方法

1.1 設備與試劑

HAMILTON STAR-8CH 全自動加樣儀2臺（定義為加樣儀1和加樣儀2）、AUTOBIO PHOMO 酶標儀、其林貝爾QB-9002微板快速振蕩器、吉爾森加樣槍10-100（已較準）；長春博德抗A抗B血型定型試劑（20101216-2）。

1.2 方法與步驟

（1）于空白（未包被、無封閉）的酶標微孔中用加樣槍手工準確分配100 UL的0.9%生理鹽水于各孔，共12塊板（96孔）。（2）分別用不同的全自動加樣儀（加樣儀1和加樣儀2）采用一次吸樣多次分配的方式，分別分配50、10、100、20 UL的長春博德抗A抗B血型定型試劑的抗B血清（使用前要混勻）于（1）中所備的空白酶標微孔中，每種體積各96孔（一塊板），其中10、20 UL采用液面接觸滴注的方式。于震蕩器中中速震蕩5 min后酶標儀單波長450讀數。（3）加樣儀2加樣曲線重新編輯，按照（2）的方法分配50、10、100、20 UL于各板中。

1.3 統計學處理

采用SPSS13.0版統計學軟件，相關計量資料采取U檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

表1可見加樣儀1的加樣結果與加樣儀2相差較大，可微調整液體曲線中的校正量。調整后可見經過調液體曲線校正后，加樣儀1與加樣儀2加樣結果較為接近。見表2。

3 討論

如何做好全自動設備的確認，提高設備運行效率，減少非預期的風險，是實驗室人員共同面對的問題[1]。在設備確認工作中，運行確認和性能確認是整個確認工作的核心，專業性強，由于設備類別和原理等不同，同時缺乏統一模式，需按照國家和行業相關標準，并結合設備說明書以及血站的使用需求，對設備性能和運行進行全面測試[2]。全自動加樣儀的性能確認、比對大多數做法是與酶聯后處理結合在一起為一個檢測系統來評估[3-4]。這樣對標本和試劑的選擇標準要相當高：需選擇臨介值附近的標本；需選擇敏感及重復性好的試劑，而且酶聯后處理要穩定性很好，這樣才能敏感反應出全自動加樣儀的狀態。但酶聯反應的影響因素相當多，因此這樣較難真正反應出全自動加樣儀的狀態。另汪德海等[4-5]報道：全自動加樣儀的性能確認與比對采用與其校準一樣的模式，即稱重法。但此法需特殊儀器及專業人員操作，一般較難常規化，且加樣僅能單個通道單次加樣，這樣很耗時且加樣模式與平常工作模式（一般為一次吸樣多次分配）相差較大，也未能真正反應全自動加樣儀日常的加樣狀態。本研究方法采用長春博德抗A抗B血型定型試劑的抗B血清為標本，其本身為穩定的有色物質且其黏度系數與血漿較為接近，加樣模式與日常工作一致，在短時間內可獲得大量的可靠數據，可進行儀器間比對或與手工加樣進行比對而達到全自動加樣儀的性能確認、儀器日常運行狀態的監控目的。如表2所示，加樣儀儀器2CV要比加樣儀器1大些，可依據溫濤等[5-6]報道方法適當調整液體曲線，以期達到最佳的CV值。

酶聯檢測中因儀器因素所引發的漏檢，除了全自動加樣儀的漏加樣外，酶聯后處理儀器的試劑的漏加也是因素之一。本研究作者在每批次的酶聯檢測中的前面與最后的位置都由加樣儀分別自動添加一室內質控樣本，在一定程度上可對后處理儀器的試劑的加入情況間接進行監控。當然，對于酶聯后處理儀器的試劑滴注后的及時直接監控是下一步的研究重點，也是防止漏檢另一關健要點。

[參考文獻]

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[2] 張瑤嬋，張泳，郭康社，等.設備確認存在的問題及分析[J].中國輸血雜志，2010，23（11）：109-110.

[3] 楊勇毅，石玉惠，馬愛萍，等.全自動加樣機的維護與室內質控[J].中國輸血雜志，2005，18（5）：406.

[4] 汪德海，高楠，王瑞，等.一種全自動樣處理系統在血站實驗室的確認[J].中國輸血雜志，2011，24（2）：161-163.

[5] 溫濤，方建華，劉玉鎮.全自動加樣器液體編輯參數的優化[J].檢驗醫學，2006，21（3）：275.

[6] 王君，邢培清，方建華，等.STAR-FAME全自動血液篩查儀器在檢驗中的應用研究[J].河南醫學研究，2010，19（1）：12-18.

（收稿日期：2012-11-09）