四種中草藥對小鼠抗炎作用比較研究

摘要：為了研究蒲公英（Dandelion）、敗醬草（Patrinia）、魚腥草（Houttuynia）、車前草（Plantain）4種中草藥的抗炎效果，采用水煎法制成中藥原液，將小白鼠用二甲苯致炎，作動物病理模型進(jìn)行試驗(yàn)，用血液分析儀VS2000對白細(xì)胞進(jìn)行分析。結(jié)果表明，小鼠耳腫脹率，試驗(yàn)1組與試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05），其他各組間差異不顯著；在消炎效果方面，蒲公英較好，魚腥草和敗醬草次之，車前草較差；在白細(xì)胞總數(shù)方面，試驗(yàn)1組與試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05）；試驗(yàn)2組與試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05）；試驗(yàn)3組與試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05）；試驗(yàn)4組與試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05）。

關(guān)鍵詞： 蒲公英（Dandelion）；敗醬草（Patrinia）；魚腥草（Houttuynia）；車前草（Plantain）；抗炎作用；小白鼠

中圖分類號：S853.9 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）04-0892-03

Comparative Study of Anti-inflammatory Effects of Four Chinese Herbals in Mice

LI Shu-hong，WANG Jin-ren，CHENG Gang，WANG Xin-ping

（Department of Life Science， Hunan University of Arts and Science， Changde 415000， Hunan， China）

Abstract： The anti-inflammatory effects of Dandelion， Patrinia， Houttuynia， Plantain， were studied by using dymethylbenzene-induced inflammatory mice through the analysis of leukocyte by VS2000 analyzer. The Chinese medical liquids were decoction. The results showed that the ear swelling rate between the test group 1 and group 2， group 3， group 5， was significantly different（P<0.05）， while there was no significant difference in other groups. The anti-inflammatory effect of Dandelion was the best， and successively Houttuynia， Patrinia， and Plantain. There was significant difference in total white blood cell between each two groups expect of group 1 and group 4（P<0.05）.

Key words： Dandelion； Patrinia； Houttuynia； Plantain； anti-inflammatory effect； mice

蒲公英（Dandelion），別名黃花苗、婆婆丁、黃花地丁等，為菊科蒲公英屬 （Taraxacum）多年生草本植物的帶根全草，《中華人民共和國藥典》 （2005年）記載其具有清熱解毒、消腫散結(jié)、利尿通淋等功效[1]。敗醬草（Herba Patriniae）屬敗醬科（Valerianaceae）多年生草本植物，《中國藥典》（1995年版）規(guī)定敗醬草的原植物為黃花敗醬（Patriniae scabiosaefolia Fisch）或白花敗醬（Patriniae villosa）干燥全草。敗醬為較常用中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，其辛散苦泄，性寒清鮮，善療癰癥，兼有明目祛癖，解毒良補(bǔ)之效[2]。車前草（Plantagomajor L.）又名車前、車輪菜、豬耳草、錢串草等，為車前科植物大車前的干燥全草，多年生草本植物，生于田野、畦畔、山埔、路旁、屋旁荒地[3]。魚腥草（Houttuynia）為三白草科蕺菜屬植物蕺菜（Houttuynia cordata Thunb）的全草，因其莖葉搓碎后有魚腥味，故名魚腥草[4]。魚腥草，性味辛、寒，具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋的功效，有抗菌、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫、抗炎等作用[5]。

為進(jìn)一步了解敗醬草、魚腥草、車前草、蒲公英四種中草藥對動物的抗炎效果，本研究以小白鼠為試驗(yàn)動物，比較4種中草藥抗炎作用效果，為獸醫(yī)臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥物 蒲公英、白花敗醬草、魚腥草采自湖南文理學(xué)院生物園，車前草采自常德市屈原公園，將其洗凈，曬干備用。

1.1.2 試驗(yàn)動物 試驗(yàn)動物為昆明系小白鼠，雌雄各半，體重（20±4）g。

1.1.3 儀器 血液分析儀VS2000（北京中檢維康技術(shù)有限公司）、高速萬能粉碎機(jī)（天津市泰斯特儀器有限公司）、電子萬用爐（天津市泰斯特儀器有限公司）、電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 藥物制備 4種試驗(yàn)藥物的劑型均為水煎劑。將曬干的4種中草藥用高速萬能粉碎機(jī)粉碎成粉末后，用電子天平準(zhǔn)確稱取蒲公英、敗醬草、魚腥草、車前草粉末50.0 g，加蒸餾水500 mL，浸泡30 min，加熱至沸后文火60 min，濾渣。再加200 mL蒸餾水，加熱煮沸后文火30 min，濾渣，將兩次藥液混合，3 000 r/min離心20 min，加熱濃縮至50 mL，即每毫升含1 g生藥的濃度。做好標(biāo)記，高壓滅菌15 min，置于4 ℃冰箱中備用。

1.2.2 中藥制劑對小鼠耳廓腫脹及白細(xì)胞的影響 選用生長發(fā)育健康小鼠60只，隨機(jī)分為試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組并對每一組小白鼠進(jìn)行標(biāo)記，每組12只，分籠飼養(yǎng)；其中試驗(yàn)1組為對照組即生理鹽水，試驗(yàn)2組中藥為敗醬草，試驗(yàn)3組中藥為魚腥草，試驗(yàn)4組中藥為車前草，試驗(yàn)5組中藥為蒲公英。分別腹腔注射生理鹽水或試驗(yàn)藥物，第一天按1.5 g/kg給藥，以后每天按0.5 g/kg給藥，第五天給藥30 min后，于每只小鼠左耳兩面滴加0.05 mL二甲苯致炎，右耳作對照，致炎20 min后固定小鼠，每組6只剪下兩耳，在兩耳相同部位用7 mm打孔器打下圓耳片，于天平精確稱量。計(jì)算小鼠耳腫脹率。

鼠耳腫脹率=（左耳重量-右耳重量）/右耳重量×100%

每組另6只摘取眼球采取血樣，用血液分析儀VS2000檢測白細(xì)胞數(shù)量。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件One-way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種中草藥對小鼠耳腫脹率及血液白細(xì)胞總數(shù)的影響

用稱重法觀察4種中草藥對小鼠耳腫脹率影響，用血液分析儀VS2000對血液白細(xì)胞總數(shù)進(jìn)行測定，結(jié)果見表1。由表1可知，在小鼠耳腫脹率方面，試驗(yàn)1組與試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05）。白細(xì)胞總數(shù)各組間方差統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果，試驗(yàn)1組與試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05），試驗(yàn)2組與試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05），試驗(yàn)3組與試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05），試驗(yàn)4組與試驗(yàn)5組存在顯著差異（P<0.05）。

2.2 4種中草藥對小鼠耳腫脹消腫消炎作用結(jié)果

由圖1可知，在四種中草藥中，試驗(yàn)5組即對小鼠的消炎作用較好，試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組對小鼠的消炎作用次之，試驗(yàn)4組的作用較弱，與試驗(yàn)1組相比4個(gè)中草藥組對小鼠耳腫脹都有不同程度地消腫消炎作用。

2.3 4種中草藥對小鼠血液白細(xì)胞總數(shù)作用結(jié)果

由圖2可知，試驗(yàn)5組對血液白細(xì)胞總數(shù)增加作用明顯，試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組對小鼠血液白細(xì)胞總數(shù)增加作用次之，試驗(yàn)4組對血液白細(xì)胞總數(shù)增加作用不明顯。各中草藥組與試驗(yàn)1組相比對小鼠血液白細(xì)胞總數(shù)均有不同度的增加作用。

3 討論

3.1 4種中草藥消炎消腫作用分析

從試驗(yàn)可以看出，敗醬草、蒲公英、車前草、魚腥草對動物病理模型都具有一定的消炎作用。其中，蒲公英消炎效果最強(qiáng)，顯著降低小鼠耳腫脹程度，敗醬草和魚腥草對小鼠的消炎作用次之，與生理鹽水組比較差異顯著（P<0.05）；車前草的作用較弱與生理鹽水組相比差異不顯著（P>0.05）。消炎效果依次為：蒲公英>魚腥草>敗醬草>車前草。從該試驗(yàn)的結(jié)果和文獻(xiàn)記載來看，蒲公英抗炎作用最強(qiáng)，蒲公英可用來治療畜病，尤其是治療家畜乳房炎效果較好[6]。

3.2 4種中草藥對血液白細(xì)胞影響分析

4種中草藥均能增加小鼠血液中白細(xì)胞總數(shù)，其中蒲公英作用最明顯，并與其他各組間存在顯著差異（P<0.05）；敗醬草作用較明顯，并與其他各組間存在顯著差異（P<0.05）；魚腥草作用次之，并與蒲公英組和車前草組存在顯著差異（P<0.05）；車前草作用較差，與蒲公英組存在顯著差異（P<0.05）。白細(xì)胞具有吞噬異物并產(chǎn)生抗體的作用，正常動物體內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)和分類白細(xì)胞的百分比是相對穩(wěn)定的，機(jī)體發(fā)生炎癥或其他疾病時(shí)都可引起白細(xì)胞總數(shù)及各種白細(xì)胞的百分比發(fā)生變化，白細(xì)胞總數(shù)在一定范圍內(nèi)增加對機(jī)體抗炎作用增強(qiáng)有促進(jìn)作用[7]。

3.3 影響4種中草藥作用原因分析

敗醬草、蒲公英、車前草、魚腥草的成分復(fù)雜，不同的提取方法都會影響其活性成分、純度及濃度，從而影響其抗炎效果。該試驗(yàn)采用水煎法提取藥物活性成分，易受藥物炮制時(shí)間、煎制火候、煎制時(shí)間及次數(shù)、高壓滅菌環(huán)境等因素影響，其結(jié)果可能會造成敗醬草、蒲公英、車前草、魚腥草活性成分析出不全和有效成分流失，對試驗(yàn)結(jié)果有一定的影響，所以研究中草藥的炮制方法、科學(xué)的提取工藝，將為中草藥制劑的研制開發(fā)及臨床應(yīng)用起重要作用。另外在試驗(yàn)的過程中發(fā)現(xiàn)敗醬草和魚腥草2個(gè)試驗(yàn)組有個(gè)別小白鼠出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。蒲公英和車前草組未見異常，說明敗醬草和魚腥草對小白鼠可能具有一定的毒副作用，也可能是由其他環(huán)境因素或自身因素所致，其原因有待于進(jìn)一步試驗(yàn)研究 。

中草藥為天然綠色植物，毒副作用小，無殘留污染，符合國際獸醫(yī)學(xué)發(fā)展趨勢[8]。該試驗(yàn)選敗醬草、蒲公英、車前草、魚腥草4種中草藥，用小白鼠為炎癥試驗(yàn)?zāi)Ｐ停C實(shí)了以上四種中草藥的抗炎作用，可為獸醫(yī)臨床治療炎癥性疾病提供一些理論依據(jù)，但其抗炎作用的原理、毒副作用及各中草藥藥物抗炎成分的藥理活性等還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1] 陳福星，陳文英，郝艷霜.蒲公英多糖對小鼠免疫器官的影響[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，29（4）：10-12.

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[3] 國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1999.

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[8] 高桂生，郝玉蘭，李正本，等.中草藥免疫增效劑對雞白細(xì)胞吞噬能力的影響[J].中國畜牧獸醫(yī)，2007，34（7）：148-149.