Fas/FasL系統在 RSA患者蛻膜與絨毛組織的表達及臨床意義

何育英 蔡巧青

Fas/FasL系統在 RSA患者蛻膜與絨毛組織的表達及臨床意義

何育英 蔡巧青

目的 探討反復自然流產患者蛻膜與絨毛組織Fas/fasL的表達和研究其臨床意義。方法

采用免疫組化法檢測33例反復自然流產患者絨毛組織Fas/FasL的表達水平，并以30例健康早孕組為對照。結果反復自然流產患者蛻膜與絨毛組織FasL低于對照組，數據經統計學比較具有顯著差異(P＜0.05)，蛻膜組織Fas數據經統計學比較具有(P＞0.05)，而絨毛組織卻無顯著差異。結論反復自然流產患者蛻膜與絨毛組織的Fas/FasL失衡可能是反復自然流產的原因之一，需加以重視。

反復自然流產;蛻膜;絨毛組織;Fas/FasL

反復自然流產(RSA)是婦產科常見病，約40%～60%不明原因。近年來多數研究表明，正常妊娠中母體對胚胎的免疫反應以Th2體液免疫為主，而Th1細胞免疫過強極有可能導致流產。細胞凋亡已被公認為是引起免疫耐受的一個重要機理，其中致凋亡基因Fas和其配體FasL在細胞凋亡中起關鍵作用。妊娠期Th1/Th2型細胞因子失衡與Fas/FasL介導的細胞凋亡關系密切。本文主要研究本文研究RSA患者蛻膜和絨毛組織Fas、FasL表達水平，探討Fas/FasL系統在RSA發病機制及對臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 從2010年10月至2011年10月在深圳市鹽田區計生中心經過婦檢，B超，尿HCG都正常無不孕，無死胎或流產史，要求人流的婦女30例為正常早孕組。年齡25～36歲，平均(29.5±2.6)歲，孕周7～10周，平均(9.1± 1.3)周，孕次2～4次，平均(2.5±1.2)次。同期經我中心排除因遺傳，感染及血型不合，抗精子抗體陽性等因素，確診為RSA的婦女33例為研究組。年齡26～37歲，平均(30.1± 3.1)歲，孕周9-11周，平均(10.2±1.7)周，孕次3～7次，平均(5.1±2.2)次。以上年齡，孕周，孕次比較，P＞0.05，無顯著性差異

1.2 設備及試劑 采用艾美捷科技有限公司的鼠抗人 Fas單克隆抗體，鼠抗人FasL單克隆抗體S-P超敏法試劑盒，按照試劑盒說明書進行操作。

1.3 標本收集和處理 ①兩組于術后留取標本妊娠組織，置于10%中性甲醛溶液中固定8～24 h，低溫石蠟包埋，制成蠟塊，置-20℃冰箱干燥保存，待切片及免疫組化染色。②結果判讀黃色顆粒為陽性標準，每張切片隨機取5個高倍視野，陽性細胞比例＜10%，陰性。10%～25%，陽性(+)。25%～50%，陽性(++)。＞50%，陽性(+++)。③采用SPSS 13.0統計學處理軟件包進行數據分析，計量資料采用均值±標準差(±s)表示，P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 對照組和研究組在滋養層細胞組織中的表達

2.2 對照組與研究組Fas、FasL在蛻膜和絨毛的表達比較，見表3。

表1 Fas在正常早孕、反復流產患者滋養層細胞組織中的表達

表2 FasL在正常早孕、反復流產患者滋養層細胞組織的表達(例)

表3 對照組與研究組蛻膜組織比較(例)

表4 對照組與研究組絨毛組織組織比較(例)

2.3 小結

2.3.1 就對照組而言，研究組滋養層細胞組織Fas表達無顯著差異(P＞0.05)，而FasL表達下降，差異有統計學意義(P＜0.05)。

2.3.2 就對照組而言，研究組蛻膜組織中Fas表達增強，差異顯著(P＜0.05)，FasL表達下降，差異顯著(P＜0.05)。

2.3.3 就對照組而言，研究組絨毛組織中Fas表達無顯著差異(P＞0.05)，而FasL表達下降。

3 討論

Fas，為Ⅰ類膜蛋白分子，FasL為Ⅱ類膜蛋白分子，也稱Apo-1或CD95，屬于腫瘤壞死因子/神經生長因子受體家族之一。細胞凋亡的過程主要由Fas/FasL介導Fas與FasL之間的相互作用［1］。Reinhard等［2］證實，妊娠期 Th1/Th2型細胞因子失衡與Fas/FasL介導的細胞凋亡關系密切。妊娠期由于胎兒大量異體抗原進入母體機體，促使大量T淋巴細胞被激活，發生克隆擴增并發生免疫反應作用［3］，Th1型淋巴細胞表達大量Fas，機體FasL與其結合后凋亡，最終導致表達Fas的 Th1細胞大量凋亡，數目減少，具有胚胎毒性作用的Th1細胞功能下降，利于妊娠成功。研究發現，RSA患者與正常妊娠者在滋養層細胞組織，蛻膜組織組絨毛組織中，Fas/ FasL系統表達異常［4］，這與Minchevanilsson等［5］和趙亮［6］的結論一致。機體主要通過Fas/FasL信號誘導母體淋巴細胞的凋亡，使胎兒能夠免疫逃避母體的溶細胞毒性，從而保證妊娠的順利進行。而流產患者滋養細胞FasL表達下降，Fas表達增強。一方面由于FasL的表達下降，被異體抗原刺激而大量激活的Th1細胞不能通過Fas/FasL介導的AICD機制失活，從而使過度活化的Th1型T淋巴細胞高度表達Fas，導致Fas表達增強，另一方面，由于Fas/FasL介導的AICD機制失活，大量被激活的T淋巴細胞產生Th1型細胞因子，最終導致流產［7］。Fas/FasL系統表達異常使妊娠期Th1/Th2型細胞因子失衡、母-胎免疫排斥［8］，可能在反復流產免疫病因中起重要作用［9］。廖丹等［10］報道，RSA患者可通過免疫治療后，促進機體向Th2淋巴細胞轉化，或范舒舒［11］等主動免疫治療可通過改變淋巴細胞Fas/FasL的表達水平，改善細胞免疫狀態取得療效。調節優勢應答的類型，達到早預防，早治療，達到妊娠成功的目標。

［1］ Green DR，Droin N，Pinkoski M.Activation-induced cell death in T cells．Immunol Rev，2003，193∶70-81．

［2］ Reinhard G，Noll A，Schlebusch H，et al.Shifts in the TH1/ TH2balance duringhuman pregnancycorre late with apoptoticchanges.Biochem Biophys Res Commun，1998，245:933-938．

［3］ 趙亮，陳曉，郭振紅，Fas/FasL信號在免疫系統中的作用。．國際免疫學雜志，2011，34(01):49-52．

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［5］ Minchevanilsson L，Nagaeva O，Sundquist KG，et al.Gammadelta T cells of human early pregnancydecidua:evidence for cytotoxicpotency.Int immunol，2000，12(5):585-596．

［6］ 趙亮，陳曉．Fas/FasL信號在免疫系統中的作用．國際免疫學雜志，2011，34(01):19-52．

［7］ 何雙，顧向應．Fas/FasL系統介導的細胞凋亡與卵泡閉鎖及稽留流產的關系.中國計劃生育和婦產科，2011，19(09):65-67．

［8］ 徐素粉，王艷玲．Fas/FasL與自身免疫性疾病．醫學綜述，2011，17(07):969-971．

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［10］ 廖丹，等．淋巴細胞免疫治療反復早期自然流產53例．臨床醫學，2009，29(1):75-76．

［11］ 范舒舒，許紅雁，江歡，馬占忠.復發性自然流產患者主動免疫治療前后外周血淋巴細胞Fas/FasL表達水平的研究．中國優生優育，2011，19(9):65-67．

The expression of the Fas/Fas Ligand(FasL)of the deciduas and the villus trophoblasts in RSA and study their clinical significance．

HE Yu-ying，CAI，Qiao-qing.Population and Famaily Planning Center of TanTian，Shenzhen 518000，China

Objective To discuss the expression of the Fas/Fas Ligand(FasL)of the deciduas and the villus trophoblasts in patient with RSA and study their clinical significance.MethodsThe level of Fas/FasL of the deciduas and the villus trophoblasts in 33 patient with RSA were measured by immunohistochenical.30 normal pregnant women made up the reference.Resultsthe level of FasL of the deciduas and the villus trophoblast in patient with RSA was significantly lower than the health group，the level of Fas of decidus was significantly different while the villus trophoblasts is no.ConclusionThe balance of Fas/FasL of the villus trophoblast is one of the important reason to the recurrent spontaneous abortion.We should pay more attention to it．

Recurrent spontaneous abortion;Deciduas;the villus trophoblasts;Fas/FasL．

518000深圳市鹽田區鹽田街道計生中心(何育英);深圳市北京大學深圳醫院婦產科(蔡巧青)