頭穴透刺對運動性疲勞大鼠下丘腦色氨酸羥化酶、單胺氧化酶A的影響

張 淼，李虹霖，徐 飛

（1．黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院，黑龍江哈爾濱150001；2．黑龍江省醫院康復科，黑龍江哈爾濱150036）

頭穴透刺對運動性疲勞大鼠下丘腦色氨酸羥化酶、單胺氧化酶A的影響

張 淼1，李虹霖1，徐 飛2

（1．黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院，黑龍江哈爾濱150001；2．黑龍江省醫院康復科，黑龍江哈爾濱150036）

目的：探討頭穴透刺對運動性疲勞大鼠下丘腦色氨酸羥化酶（TPH）、單胺氧化酶A（MAO－A）表達的影響。方法：取8周齡健康Wistar大鼠48只，雌雄各半，除12只作空白對照組外，其他大鼠造疲勞力竭模型，隨機分為模型組、頭穴透刺組和傳統針刺組，每組12只。共進行游泳大鼠模型訓練4周后，觀察各組大鼠力竭游泳后力竭時間；采用Western blot方法比較各組大鼠下丘腦組織TPH、MAO－A表達。結果：與模型組相比，針刺治療組小鼠的力竭運動時間顯著延長（P＜0.05）。傳統針刺組和頭穴透刺組均能顯著降低TPHmRNA的表達，增強MAO－AmRNA的表達，與模型組比較，差異具有統計學意義（P＜0.01）；頭穴透刺組在降低TPHmRNA表達，增強MAO－AmRNA表達方面優于傳統針刺組，組間比較差異具有統計學意義（P＜0.05）。結論：頭穴透刺能降低大鼠下丘腦組織中的TPHmRNA表達，增強MAO－AmRNA表達。

運動性疲勞；頭穴；透刺；TPH；MAO－A；大鼠

運動性疲勞是機體各種復雜內在變化的一種綜合外在表現，是機體在長時間的運動后，其生理現象在運動過程中表現為機體運動能力下降，使其運動能力不能持續在特定的運動水平和/或預定的運動強度。對運動性疲勞防治的研究是運動醫學關注的熱點和焦點。大量研究［1－2］顯示，中醫藥對運動性疲勞有良好的防治前景。本組研究采用針刺預處理方法，觀察頭穴透刺對運動性疲勞的防治作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 取8周齡健康Wistar大鼠48只，雌雄各半，體質量（200±10）g。由黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供，大鼠質量合格證書編號：SCXK（黑）2008004。

1.2 試劑和儀器 試劑主要有TPH抗體和MAO抗體，均購自于millipore公司，熒光定量Realtime PCR試劑盒、逆轉錄試劑盒，均購自于takara公司產品。主要儀器有電子天平（賽多科斯，萬分之一）、水浴鍋、游泳箱（55cm×55cm×40cm）、秒表。

1.3 實驗方法

1.3.1 動物分組 將48只大鼠隨機分為4組，每組2只，分別為空白對照組、模型組、頭穴透刺組和傳統針刺組。

1.3.2 造模方法 模型組和治療組方法參見文獻［3－4］建立疲勞力竭模型，空白對照組適應性訓練1周，正常飼養。

1.3.3 治療方法 頭穴透刺組和傳統針刺組大鼠每天在針刺預處理1h后進行造模。每只大鼠針刺前束縛固定，參照中國針灸學會實驗針灸研究會制定的《動物針灸穴位圖譜》選穴。頭穴透刺組：針刺雙側百會透太陽、雙側足三里、腎俞、關元，留針15min，出針1h后進行造模。傳統針刺組：針刺雙側足三里、腎俞、關元，留針15min，出針1h后進行造模。空白對照組：正常飼養不給予任何處置。模型組：正常造模，造模前后均不給予任何治療。共進行4周的游泳大鼠模型訓練，每周游6d。第1周每天游30min，每周遞增30min。

1.4 觀察指標

1.4.1 一般狀況 觀察造模后各組大鼠的精神狀態、體毛、體質量、大小便及活動情況等。

1.4.2 力竭游泳實驗 第4周末進行力竭性游泳，記錄游泳時間，力竭標準以大鼠游泳的協調動作消失，水淹沒鼻尖，身體下沉，至再次浮出水面的時間超過10s，并連續3次者。

1.4.3 標本采集及及熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應用1％戊巴比妥鈉（40mg/kg）腹腔注射麻醉，麻醉滿意后固定于鼠板上，用含4％多聚甲醛緩沖液灌注固定取下丘腦。參照文獻［5］提取RNA。逆轉錄參照試劑盒說明書進行操作。熒光定量聚合酶鏈反應參照試劑盒說明書進行操作。

2 結果

2.1 一般情況 造模后，各模型組大鼠的飼料、飲水量均有所減少，體毛干枯，體質量緩慢增長，活動減少，眼裂變小，瞇眼明顯，精神萎靡，反應遲鈍。

2.2 各組力竭時間結果比較 見表1。

表1 各組力竭時間結果比較（±s，n＝12）s

表1 各組力竭時間結果比較（±s，n＝12）s

注：與模型組比較，＃＃P＜0.01；與傳統針刺組比較，△P＜0.05。

組 別力竭時間組 別力竭時間空白組 422．06±30．21 傳統針刺組348．84±25．17＃＃頭穴透刺組381．52±27．65＃＃△模型組 304．20±24．59

2.3 各組下丘腦組織中TPH、MAO－AmRNA表達的影響 見表2。

表2 各組下丘腦組織中TPH、MAO－AmRNA表達的影響（±s，n＝12）

表2 各組下丘腦組織中TPH、MAO－AmRNA表達的影響（±s，n＝12）

注：與模型組比較，＃＃P＜0.01；與傳統針刺組比較，△P＜0.05。

actin空白組 0．838 0±0．133 1 0．574 8±0．002 9頭穴透刺組0．733 8±0．093 9＃＃△0．678 9±0．021 8＃?！鱾鹘y針刺組0．838 6±0．163 4＃＃0．357 6±0．008 6＃＃模型組 0．957 9±0．018 5 0．133 8±0．006 1組 別TPH/β－actin MAO－A/β－

3 結論

運動性疲勞尚屬中醫學“虛證”范疇。［6－7］針刺具有疏通經絡，激發正氣，改善血液循環，抗脂質過氧化，清除自由基，調節免疫功能，糾正代謝紊亂，糾正運動性神經—內分泌—免疫調節紊亂等作用。本研究發現，頭穴透刺能降低大鼠下丘腦組織重的TPH mRNA表達，增強MAO－A mRNA表達，其抗運動性疲勞機制可能與此有關。

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R246

A

1007－4813（2013）02－0194－02

2012－11－19）

黑龍江省教育廳科學技術研究項目資助課題（編號：12511506）。

張 淼（1973－），女，在站博士后，副教授，副主任醫師，碩士研究生導師。研究方向：針刺防治老年性疾病。