銀杏葉提取物對小鼠腦缺氧保護作用的實驗研究

趙新超 馬飛 樸蓮荀

【摘要】 目的：探討與研究銀杏葉提取物對小鼠腦缺氧保護作用機制。方法：采用常壓密閉缺氧造成小鼠腦缺氧模型。記錄小鼠缺氧存活時間；測量小鼠血清中丙二醛（MDA）及一氧化氮（NO）含量。結果：銀杏葉提取物能顯著延長小鼠常壓缺氧存活時間；與正常對照組比較，生理鹽水組的MDA、NO水平明顯升高（P<0.01，P<0.001）；與生理鹽水組比較，銀杏葉提取物（50ml/kg）組的MDA、NO水平明顯下降（P<0.01）。結論：銀杏葉提取物對小鼠腦缺氧具有很好的保護作用，其作用機制可能與抑制脂質過氧化及NO合成有關。

【關鍵詞】 銀杏葉提取物；腦缺氧；作用機制

【中圖分類號】R285.1 【文獻標志碼】A 【文章編號】1007—8517（2013）18—0021—02

缺氧對機體是一種劣性刺激，可以影響機體各種代謝，特別是機體的氧化供能，最終導致機體的心、腦等主要器官由于能量供應不足而死亡。銀杏葉提取物含有豐富的黃酮類和萜內酯等活性成分，具有擴張血管、改善血管機能、促進血液循環和代謝、保護機體組織和抗氧化等作用。通過采用常壓密閉缺氧造成小鼠腦缺氧模型，研究銀杏葉提取物對腦缺氧保護作用機制，為其臨床應用提供理論依據。

1 材料

1.1 動物清潔級昆明（KM）種小鼠，雌雄兼用，體重（20±2）g，由延邊大學實驗動物中心提供（許可證號SCXK吉2011-007）。

1.2 藥品及試劑銀杏葉提取物由延邊大學醫藥研究中心提供批號：20110702。丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）測定試劑盒（南京建成生物工程研究所批號分別為：20120401；20120327）。其余試劑均為分析純。

1.3 儀器設備Baekman高速冷凍離心機（德國）；SUN-RISE酶標儀（上海金鴛醫療器械有限公司）。

2 方法

2.1 常壓耐缺氧實驗小鼠24只，隨機分為3組：生理鹽水組、銀杏提取物大、小劑量組，每組8只，連續灌胃14天，每日1次。每組于末次給藥后1h，將小鼠置于放入10g鈉石灰的125ml廣口瓶中密閉，造成小鼠腦缺氧模型，觀察各組小鼠存活時間。

2.2 生化指標的測定另取32只小鼠隨機分為4組，空白對照組，生理鹽水組，銀杏提取物大（100mg/kg）、小（50mg/kg）劑量組，每組8只。除了空白組外，灌胃給藥或同體積生理鹽水，連續灌胃14天，每天1次。于末次給藥后1h后，小鼠置于盛有10g鈉石灰的125ml廣口瓶中，密閉缺氧10min后，取出小鼠立即取血處死，分離血清備用。按試劑盒說明書方法測定血清中的MDA、NO水平。

2.3 統計學處理 以SPSS17.0軟件系統進行數據統計分析，所有實驗數據用表示，采用t檢驗進行兩組間差異比較。P<0.05為差異有統計學意義。

3 結果

3.1 對小鼠常壓密閉缺氧存活時間的影響 由表1可知，不同劑量的銀杏葉提取物均能顯著延長小鼠在密閉缺氧條件下的存活時間，與生理鹽水組比較具有顯著性差異（P<0.05；P<0.01）。 3.2 對小鼠腦組織中MDA、NO水平的影響由表2可知，與正常空白對照組相比，生理鹽水組MDA、NO的水平顯

著增加（P<0.01）。不同劑量的銀杏葉提取物與生理鹽水組相比，均能抑制密閉缺氧小鼠血清中MDA、NO水平，

差異有統計學意義（JP<0.05）。

4 討論

常壓耐缺氧實驗為抗整體小鼠缺氧實驗，是篩選治療心腦組織因缺血缺氧引起功能障礙的常用方法之一。常壓密閉缺氧最終導致小鼠心臟和腦缺氧而死亡實驗結果顯示：銀杏葉提取物能顯著提高小鼠的常壓耐缺氧存活時間，說明銀杏葉提取物對腦缺氧有很好的改善作用。

自由基作用于脂質發生過氧化反應，MDA是過氧化脂質代謝產物，生物體內MDA含量越高，表明氧自由基損傷越重，對臟器、組織細胞的毒性越大。實驗結果顯示，小鼠常壓密閉缺氧條件下血清中MDA含量與正常空白對照組比較差異顯著，說明小鼠常壓密閉缺氧條件下體內脂質過氧化物的形成明顯增加。而給予銀杏葉提取物后能夠明顯降低血清中MDA水平，表明銀杏葉可顯著降低機體中脂質過氧化反應。

另外，NO作為一種神經遞質在缺氧缺血性腦損傷中日益受到重視。NO既是體內一種不可缺少的信息分子，又具有細胞毒作用，可以通過毒性作用、自由基損傷而加重腦缺氧缺血性腦損傷。實驗結果顯示，小鼠常壓密閉缺氧條件下小鼠血清中NO含量顯著高于空白對照組，說明小鼠常壓密閉缺氧條件下體內NO合成明顯增加，而銀杏葉提取物后能夠明顯降低血清中NO水平，說明銀杏葉能有效的抑制小鼠體內NO合成。減輕對臟器、組織細胞的毒性，從而發揮對腦缺氧的保護作用。