不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合對橘小實蠅的捕殺效果

劉建民　董美華　杜迎剛等

摘要：于陽桃園和番石榴園，田間測定了不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合對橘小實蠅的誘捕和誘殺效果。結(jié)果表明：在誘捕和誘殺試驗中，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對橘小實蠅的捕殺數(shù)量呈逐漸增加趨勢，以25 g/L蛋白、0.09 mol/L硼砂組合最高。通過誘捕和誘殺試驗確定啤酒廢酵母酶解蛋白的最佳田間使用濃度為20～25 g/L，硼砂的添加量為0.06～0.12 mol/L。

關(guān)鍵詞：啤酒廢酵母；硼砂；蛋白誘劑；增效作用；橘小實蠅

中圖分類號：Q965.9：Q969.456.8 文獻(xiàn)標(biāo)識號：A 文章編號：1001-4942（2013）08-0110-03

橘小實蠅（Bactrocera dorsalis Hendel），屬雙翅目（Diptera）實蠅科（Tetriphitidae），是柑橘、陽桃、芒果、番石榴等250余種果樹的毀滅性害蟲_[1～3]，蛋白誘殺是一項非常有效的防治措施。杜迎剛等用啤酒廢酵母酶解制備出了在pH 8.5條件下對橘小實蠅具有很好引誘活性的蛋白誘劑_[4，5]。本文對不同濃度啤酒廢酵母酶解蛋白與硼砂組合后對橘小實蠅的田間誘捕和誘殺情況進(jìn)行了研究，旨在為此蛋白的田間使用濃度范圍及增效物質(zhì)的研究提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗材料

1.1.1主要試劑木瓜蛋白酶（BR）：98萬單位（北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠）；硼砂（AR）：安徽蕭縣化學(xué)試劑廠；蛋白誘劑：參照杜迎剛（2007）_[4]方法自制；殺蟲介質(zhì)：48%的Spinosad（多殺霉素）懸浮劑（美國陶氏益農(nóng)公司）。

1.1.2儀器設(shè)備酸度計：PHS-3B（上海虹益儀器儀表有限公司）；電子天平：BS 124S（德國Sartorius）；移液器：德產(chǎn)Tripette；誘捕器：江蘇常州禾豐生化研究所生產(chǎn)的橘小實蠅專用誘捕器。

1.2試驗方法

1.2.1誘捕試驗于福州武警福建總隊食品生產(chǎn)基地及漳州熱作所分別選擇陽桃和番石榴園作為試驗點。取新制備的啤酒廢酵母酶解蛋白母液，稀釋成不同濃度后加入不同濃度的硼砂溶液制成蛋白誘劑組合（具體組合見表1），以不加硼砂的20 g/L_[1]啤酒廢酵母酶解液為對照。每種誘劑組合重復(fù)12次，兩地陽桃園、番石榴園各3次。每個誘捕器加一種供試溶液200 ml，掛于田間樹上高1.5 m陰涼處。隔天統(tǒng)計引誘的雌雄實蠅數(shù)量并補(bǔ)水至200 ml，連續(xù)觀察記錄2周。

1.2.2誘殺試驗棋盤式取樣，選擇周圍環(huán)境和長勢基本一致的株距20 m以上的番石榴28株，分7組。在樹體離地面1.5 m處于葉背面噴硼砂與酶解蛋白誘劑組合50 ml（內(nèi)加Spinosad 80 mg/L_[1，6]；組合選擇是在1.2.1試驗的基礎(chǔ)上，具體見表2），以不加硼砂的20 g/L蛋白誘劑為對照。每組4株分別噴4個方位，噴灑樹體面積約1.5 m2，每株地面鋪白色布，早晚各觀察清理死蟲1次，記錄1周內(nèi)引誘的雌雄橘小實蠅數(shù)量。

1.2.3數(shù)據(jù)分析方法數(shù)據(jù)處理用DPS v3.01統(tǒng)計分析軟件，采用單因子方差分析對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，方差檢驗用Duncans新復(fù)極差法進(jìn)行。

2結(jié)果與分析

2.1誘捕試驗從表1可以看出，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對橘小實蠅的誘捕數(shù)量逐漸增加，以25 g/L蛋白/0.09 mol/L硼砂組合最高，對雌蟲、雄蟲和雌雄總數(shù)的誘捕數(shù)量分別為3854.0、3805.7、7659.7只，對雌蟲的誘捕數(shù)量，與20 g/L蛋白/0.03、0.06、0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.03、0.06、0.12mol/L硼砂組合之間差異不顯著，極顯著高于20 g/L蛋白不加硼砂對照和10、15 g/L蛋白硼砂各組合；對雄蟲和雌雄總數(shù)，與20 g/L蛋白/0.06、0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.03、0.06、0.09 mol/L硼砂組合之間差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.03 mol/L硼砂組合差異顯著，與10、15 g/L蛋白硼砂各組合及對照之間差異極顯著。

2.2誘殺試驗從表2可以看出，隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加，酶解蛋白硼砂組合對橘小實蠅的誘殺數(shù)量逐漸增加，以25 g/L蛋白/0.12 mol/L硼砂組合最高，對雌蟲、雄蟲和雌雄總數(shù)的誘殺數(shù)量分別為401.8000、387.4000、789.2000只，對雌蟲，與20 g/L蛋白/0.09、0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.06、0.09 mol/L硼砂組合差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.06 mol/L硼砂組合間差異顯著，與對照間差異極顯著；對雄蟲和雌雄總數(shù)，與20 g/L蛋白/0.12 mol/L硼砂組合和25 g/L蛋白/0.09、0.12 mol/L硼砂組合之間差異不顯著，與20 g/L蛋白/0.09 mol/L硼砂組合之間差異顯著，與20 g/L蛋白0.06 mol/L硼砂組合及對照之間差異極顯著。

3結(jié)論與討論

杜迎剛等_[4，5]研究表明，啤酒廢酵母酶解蛋白在濃度為20 g/L時引誘活性最強(qiáng)，所以本研究以不加硼砂的20 g/L啤酒廢酵母酶解蛋白液為對照，比較不同濃度的酶解蛋白液加硼砂后對橘小實蠅的誘捕和誘殺效果。從表1可以看出，因為硼砂的加入使得15 g/L甚至更低濃度蛋白對橘小實蠅的誘捕效果與20 g/L的相當(dāng)，這與單獨施用蛋白誘劑相比節(jié)省了蛋白資源，但15 g/L劑量組與25 g/L劑量組間存在極顯著差異，這說明要達(dá)到更好的田間誘捕效果，蛋白濃度最好高于15 g/L。試驗過程中，所有組合均是對雌性的引誘數(shù)量高于雄性，但無顯著差異，雌雄引誘數(shù)量的差異與田間橘小實蠅的生態(tài)狀態(tài)也有很大關(guān)系_[1，10]。在橘小實蠅誘捕試驗中，25 g/L蛋白劑量組第1周引誘效果稍差，這與劑量太高導(dǎo)致?lián)]發(fā)性物質(zhì)濃度較高不利于橘小實蠅感應(yīng)有關(guān)，此結(jié)果與杜迎剛_[4，5]研究結(jié)果一致，第2周開始引誘數(shù)量增加；與此相反，10 g/L蛋白劑量組第1周引誘效果較好，第2周開始較差；15 、20 g/L劑量組在試驗周期內(nèi)引誘效果較平穩(wěn)。誘殺試驗中，各組合都是隨著蛋白濃度和硼砂濃度的增加誘殺效果增強(qiáng)，這與誘殺是在相對開放的環(huán)境中及福州雨季有關(guān)，這也是本試驗只觀察1周的原因。通過本研究，進(jìn)一步精確了啤酒廢酵母酶解蛋白的最佳田間使用濃度范圍（20～25 g/L）和硼砂的添加量（0.06～0.12 mol/L），為該蛋白誘劑產(chǎn)品的開發(fā)及施用提供了理論依據(jù)。

啤酒廢酵母酶解蛋白誘劑富含氨基酸、多肽、糖類等_[7～9]，是夏季高溫下極易腐敗的物質(zhì)，此外引誘的實蠅蟲體因分離不及時也會很快腐爛，這些勢必影響到蛋白誘劑的引誘效果。硼砂對啤酒廢酵母酶解蛋白的增效作用可能與硼砂對引起蛋白酶解物及蟲體腐敗變質(zhì)的微生物的殺滅抑制作用有關(guān)，具體機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

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