謝宏峰 遲玉成 許曼琳等
作者簡介:謝宏峰(1980-),女,碩士,助理研究員,研究方向為植物保護。
通訊作者:遲玉成(1969-),男,博士,副研究員,研究方向為植物保護。
摘要:采用生長速率法研究了蓖麻籽粗提物對花生網斑病菌的抑制作用。結果表明:不同濃度的蓖麻籽粗提物對花生網斑病菌均有不同程度的抑制作用,且隨著藥劑濃度的增加,抑制率增大;但隨著時間的推移,抑制效果逐漸減弱,24、48、96 h的EC50分別為2183、36727和43878 mg/L。
關鍵詞:蓖麻籽;粗提物;花生網斑病;抑制作用
中圖分類號:S435.652 文獻標識號:A 文章編號:1001-4942(2013)06-0081-03
花生網斑病是花生生產上的一種重要的葉部病害[1]。該病在花生整個生長期均可發生,以花生生長中后期發病最重,主要危害葉片,其次危害葉柄和莖部,一般減產10%~20%,嚴重的達30%以上[2]。目前,化學防治仍是植物病害最主要的防治措施,但化學藥劑存在毒性大、殘留高、成本高、污染環境等問題。植物源活性殺菌劑具有分解快、殘留低、污染少和毒性小等特點,因此利用植物源活性物質防治植物病害的研究逐漸受到重視并引起廣泛關注[3]。
蓖麻(Ricinus communus L) 屬大戟科蓖麻屬,為雙子葉一年生或多年生植物。蓖麻是具有特殊工業用途的油料植物,是集多種開發功能于一體的生物資源,也是一種重要的生物殺蟲、抗癌和生物抗污染源[4]。 從蓖麻中提取的蓖麻毒素具有較強的殺蟲、殺菌作用,是制造生物農藥的重要來源[5]。已有研究表明,蓖麻籽粗提物對黃瓜褐斑病、玉米小斑病病菌有明顯的抑制作用[6,7]。 本試驗以花生網斑病病菌為研究對象,研究了蓖麻籽粗提物對花生網斑病病菌的生物活性,以期為花生網斑病的生物防治提供依據。1 材料與方法
11 供試材料
蓖麻籽購自青島市李滄區農貿市場;網斑病病菌(Phoma arachidicola Marasas,Pauer & Boerema)由山東省花生研究所病害與微生物實驗室分離、保存。
12 試驗方法
121 蓖麻籽粗提物的制備 蓖麻籽粗提物采用索氏提取法抽提[8]。將蓖麻籽置于40~50℃烘箱中恒溫干燥,粉碎后過0180~0425 mm孔篩。取50 g粉末,包好,放入提取器中(不超過虹吸管),再加入5倍植物粉末量的95%乙醇,抽提24 h后取出抽濾,旋轉濃縮至1 g/ml (干物質量計),裝入棕色玻璃瓶中,置4℃冰箱中保存備用。
122 對網斑病菌的生物活性測定 無菌條件下,將PDA培養基與粗提液充分混勻,粗提液濃度分別為50、100、200、300、500 mg/L,制備直徑90 mm的固體平板培養基,以不添加粗提液的PDA培養基為對照。網斑病菌培養5天后,用滅菌的打孔器制備菌餅(直徑為5 mm),將菌餅接種到固體培養基中央,每皿一塊,菌絲面朝下放置,每處理重復3次。置于恒溫培養箱內,28℃黑暗條件下培養,分別在24、48、96 h采用十字交叉法測量菌落直徑,計算生長抑制率:
由表1可以看出,蓖麻籽粗提物在50~500 mg/L之間,花生網斑病菌均受到不同程度的抑制作用,且隨著藥劑濃度的增加,抑制率也增加。但隨著時間的推移,抑制效果逐漸減小,24、48、96 h的EC50分別為2183、36727、43878 mg/L。3 討論
隨著人們食品安全意識的不斷增強和對農產品農藥殘留問題的關切,利用非化學方法控制病蟲害受到植物保護工作者越來越多的重視,開發對有害生物高效、對非靶標生物安全、對環境友好的生物農藥己成為新的研究熱點[8]。 蓖麻種子、
葉片中含有多種殺菌生物活性物質。本試驗結果表明,蓖麻籽粗提物對花生網斑病菌在一定濃度范圍內具有不同程度的抑制作用,隨著時間的推移,抑制作用逐漸減小。其原因可能是由于非藥劑因素隨著時間的推移逐漸加強,從而消弱了藥劑的作用。另外,抑制細菌生長需要粗提物的濃度較高,可能是由于提取的純度不夠,導致用藥量過大。
蓖麻不同組織由于所含活性物質的成分和含量不同[5],其對病菌的作用效果存在明顯的差異。本試驗只研究了蓖麻籽粗提物的殺菌作用,要有效利用蓖麻的生物活性物質進行植物病害防治,還需要對蓖麻不同部位活性物質的抑菌效果進行研究,并且對抑菌活性物質進行進一步分離純化,真正的應用于生產還需做大量研究工作。參 考 文 獻:
[1] 樊堂群, 遲玉成, 謝宏峰,等 不同抗性花生感染網斑病菌的酶活性及丙二醛含量變化[J] 花生學報, 2009,38(4):31-34
[2] 徐秀娟,石延茂,徐明顯,等 花生網斑病的發生與防治研究[J] 山東農業科學, 2009,4:29-30
[3] 文艷華, 馮志新, 徐漢虹, 等 植物抽提物對幾種植物病原線蟲的殺線活性篩[J] 華中農業大學學報, 2001,20(3):235-238
[4] 黃家祥 蓖麻生產及綜合開發利用技術[M] 北京: 中國農業出版社, 2005
[5] 溫燕梅, 馮亞非, 鄭明珠 蓖麻不同部位殺蟲活性成分蓖麻堿的提取及含量[J] 農藥, 2008, 47 (8):584-585
[6] 吳雪平, 田雪亮, 項志鋒 蓖麻籽水提物對黃瓜褐斑病菌的生物活性研究[J] 西北農業學報, 2006,15 (6):215-216
[7] 吳雪平, 鄧天福, 項志鋒 蓖麻籽水提物對玉米小斑病菌的毒力測定[J] 古林農業科學, 2006,31(4):43-44, 52
[8] 周福才, 顧愛祥, 周桂生, 等 蓖麻葉片粗提物對黃瓜瓜絹螟的作用[J] 中國生態農業學報, 2012,20(5):629 -624