李桂明 林樹乾 趙增成等


作者簡介:李桂明(1980-),男,助理研究員,碩士,研究方向為新獸藥研發。
通訊作者:宋敏訓(1963-),男,研究員,博士,主要研究方向為禽病診斷與新獸藥研發。
摘要:自行研制的環糊精包合碘具有有效碘含量高、質量穩定和刺激性小等優點。參考《消毒技術規范2002版》的方法,分別以木質桌面、自然水體和雞舍為消毒對象,驗證其臨床消毒效果。結果表明,環糊精包合碘1∶ 800倍(W/V)樣品稀釋液,對木質桌面消毒作用10 min,對物體表面自然菌的平均殺滅對數值為243;1∶ 10 000倍(W/V)投入自然水體,10 min大腸桿菌殺滅率為100%,10~30 min自然菌殺滅率為9965%~100%;1∶ 500倍(W/V)樣品稀釋液,60 min對雞舍地面、墻壁自然菌殺滅率為9273%和9358%。
關鍵詞:環糊精包合碘;消毒;自然菌
中圖分類號:S857.12+3 文獻標識號:A 文章編號:1001-4942(2013)06-0099-03
在畜禽養殖過程中,碘制劑以其消毒效果好、毒副作用低、刺激性小、無殘留[1,2]以及無生態毒性等優點而被廣泛應用。其中,季銨鹽碘和聚維酮碘目前已在臨床中廣泛使用[3]。但有機絡合碘制品有效碘釋放率較低、環境消毒成本高,制約了在獸醫臨床中的推廣應用[4]。“環糊精包合碘”是碘單質被β-環糊精包合形成的超分子結構,其有效碘(I)含量高、穩定性好、水溶性強。本試驗參考《消毒技術規范2002》進行物體表面消毒、水體消毒和雞舍消毒試驗,驗證其消毒效果,為開發新型消毒劑提供有效依據,降低畜禽傳染病對養殖業的危害,保障食品安全。1 材料與方法11 試劑與儀器
111 物體表面消毒 消毒劑:環糊精包合碘(有效碘169%)稀釋成1∶ 800倍,山東省農業科學院家禽研究所提供。
中和劑:含05%硫代硫酸鈉+02%卵磷脂+3%吐溫-80的磷酸鹽緩沖液。
培養基:胰蛋白胨大豆瓊脂培養基。
稀釋液:02%吐溫-80磷酸鹽緩沖液(PBS)。
無菌棉拭子:一次性醫用棉簽滅菌后備用。
規格板:50 mm × 50 mm無菌不銹鋼規格板。
受試對象:山東省實驗動物中心微生物準備室木質桌面。
112 水體消毒 消毒劑:環糊精包合碘(有效碘169%),稀釋成1∶ 10 000倍,山東省農業科學院家禽研究所提供;以聚維酮碘為對照消毒劑。
中和劑:含05%硫代硫酸鈉+02%卵磷脂+3%吐溫-80的磷酸鹽緩沖液。
自然菌采用營養瓊脂培養基,大腸桿菌采用麥康凱培養基。
受試對象:濟南郊區自然水樣。
113 雞舍消毒 消毒劑:環糊精包合碘(有效碘169%)稀釋成1∶ 500倍,山東省農業科學院家禽研究所提供。
試驗動物與條件:200只50日齡育成雞,雞舍長×寬×高=3 m × 57 m × 28 m。
培養基:營養瓊脂培養基。
無菌棉拭子:一次性醫用棉簽滅菌后備用。
培養皿:統一采用內徑90 mm培養皿。
12 試驗方法
121 物體表面消毒 參考《消毒技術規范》(2002年版) 2129,將規格板放于木質桌面,30個區塊作為陽性對照區,樣本不擦拭消毒液進行采樣;30個區塊為試驗區,將配好的消毒液對木質桌面噴灑至濕潤,消毒作用10 min。用棉拭子涂抹法進行采樣,統計自然菌落數,計算殺滅對數值。另設陰性對照,即將同批次中和劑、稀釋液各取10 ml培養基,檢測中和劑和稀釋液中是否有自然菌。
殺滅對數值=消毒前菌數對數值-消毒后菌數對數值
122 水體消毒 取9份水樣,每份水樣1 L,其中4份分別加入01 g的環糊精包合碘,另外4份加入01 g聚維酮碘,1份不加消毒劑,攪拌均勻,記錄時間。根據加入消毒劑時間,第1份水樣加入環糊精包合碘10 min后加入中和劑,迅速取樣,進行原液、1∶ 10、1∶ 100三個濃度進行計數;第2份20 min后加入中和劑,同樣方法進行細菌計數,依次類推。聚維酮碘采取相同辦法。每個濃度重復2次,計算平均值。不加消毒劑及加入消毒劑后不同時間點進行自然菌和大腸桿菌培養計數。
123 雞舍消毒 地面消毒先由外向內噴霧1次,噴藥量為250 ml/m2,待室內消毒完畢后,再由內向外重復噴霧1次。墻壁消毒噴灑量為100 ml/m2。 于消毒前、消毒30 min、60 min進行采樣。空氣5個點(墻角12 m處4個點加室中心1個點)、地面3個點(東、中、西)、墻面4個點(12 m處4個墻角)。空氣采樣參考GB/T 17093-1997采用自然沉降法;墻面和地面采樣方法如下:將無菌棉拭子在含 10 ml 稀釋液(09%生理鹽水)試管中浸濕,于管壁上擠干,對采樣區(選定5 cm×5 cm范圍)涂抹采樣,橫豎往返各 8次。采樣后,以無菌操作方式將棉拭采樣端剪入原稀釋液試管內,電動混勻器振蕩20 s或在手掌振打200次,做適當稀釋后備用。采樣后實驗室進行自然菌計數,計算單位體積(或面積)的自然菌數。
2 結果與分析
21 物體表面消毒效果
由表1可知,所試環糊精包合碘1∶ 800倍(W/V)樣品稀釋液,對木質桌面噴灑至濕潤,消毒作用10 min,其物體表面自然菌的殺滅對數值
綜合分析數據,殺滅對數值基本在平均值附近,考慮菌落計數的實際操作誤差,認為本次試驗可以證明環糊精包合碘對物體表面消毒有效。22 水體消毒效果
由表2可知, 10 min環糊精包合碘和聚維酮碘對自然菌殺滅率為9965%和9947%,20 min均為9982%,30 min殺滅率則為100%;環糊精包合碘和聚維酮碘均能在10 min內殺滅水體大腸桿菌。環糊精包含碘在效用上與市面流行的產品——聚維酮碘消毒效果相當,但環糊精包合碘為水溶性、成本低,所以推定新型殺毒劑環糊精包合碘水體消毒效果良好。
23 雞舍消毒效果
由表3可知,30 min地面和墻面自然菌殺滅率為7971%和7775%,60 min殺滅率分別為9273%和9358%。可以看出,30 min時地面自然菌殺滅率較墻面高,可能是由于液體存留地面起到較長時間的消毒效果;60 min時地面自然菌殺滅率反而較低,可能是由于隨著時間的推移,地面更易受菌落沉降的影響。同時發現,該新型消毒劑對空氣也有一定的殺菌作用,30 min和60 min自然菌殺滅率分別為1767%和1164%,但是殺滅效果不理想。
3 結論與討論
桌面消毒試驗用于鑒定消毒劑對一般物體表面自然菌的殺滅作用,以驗證消毒劑的使用劑量。本試驗所試環糊精包合碘1∶ 800倍(W/V)樣品稀釋液,對木質桌面噴灑至濕潤,消毒作用10 min,對物體表面自然菌的平均殺滅對數值為243,>10,符合2002年版《消毒技術規范》的要求。熊鴻燕等(1999)[5]采用交聯淀粉碘(有效碘含量6393 mg/g)為消毒劑對自來水進行消毒試驗, 結果認為5 g/L(有效碘含量為每升水3197 mg)作用5~10 min可殺滅自然菌的9973% ~ 9994%。本試驗有效碘含量為每升水169 mg,10 min殺滅率達到9965%,取得了較好的殺菌效果。在雞舍中使用環糊精包合碘對墻面和地面進行消毒,60 min自然菌殺滅率達到92%以上。同時發現,本消毒劑對空氣自然菌具有一定的殺滅作用,但殺滅作用有限;60 min空氣中細菌總數反而多于30 min,推測隨著時間的延長糞便中的細菌繼續擴散至空氣中,在下一步試驗中需要增加空氣噴霧消毒以達到消毒效果。參 考 文 獻:
[1] Durani P,Leaper DPovidone-iodine: use in hand disinfection, skin preparation and antiseptic irrigation[J]Int Wound J, 2008,5(3): 376-87
[2] Mbithi J N, Springthorpe V S, Satta S A rChemical disinfection of hepatitis a virus on environmental surfaces[J]Appl Envir Microbiol, 1990,56: 3601-3604
[3] Elisabeth P, Miranda S, Michaela E, et al Effects of alcohols, povidone-iodine and hydrogen peroxide on biofilms of Staphylococcus epidermidis[J] J Antimicrob Chemother,2007,60: 417-420
[4] Maenthaisong R, Chaiyakunapruk N, Thamlikitkul V Cost- effectiveness analysis of chlorhexidine gluconate compared with povidone-iodine solution for catheter-site care in Siriraj Hospital, Thailand[J] J Med Assoc Thai, Nov, 2006, 89 Suppl 5: S94-101
[5] 熊鴻燕, 張 凌, 劉育京, 等交聯淀粉碘的制備及對水中細菌殺滅效果的研究[J]中國消毒學雜志,1999,16(1):1-6