雅培i2000全自動化學發光免疫分析儀性能評價方法研究

[摘要] 目的 對雅培i2000全自動化學發光免疫分析儀的性能進行了評價。方法 參考《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》醫藥行業標準和國家質量監督檢驗檢疫總局頒布的有關醫療器械檢定校準計量技術規范，闡述了準確度、重復性、線性范圍、交叉污染等指標的評價方法和選取理由。結果 準確度：197 pmol/L胰島素標準品測定結果誤差為6 pmol/L，20 pmol/L胰島素標準品測定結果誤差為2 pmol/L；重復性：對20 pmol/L的胰島素標準品重復測定6次，6次測定的相對標準偏差為2%；穩定性：開機4 h后和8 h后的相對偏差分別為3%和4%；線性范圍：20～197 pmol/L的胰島素范圍內，其線性相關系數可達到0.997；交叉污染：從低到高交叉污染率為1%，從高到低交叉污染率為0.2%。結論 提出的方法可用于日常全自動免疫分析儀性能的評價和校準，有助于檢測結果的準確和可比。

[關鍵詞] 全自動免疫分析儀；評價；校準；準確度；重復性；線性范圍；交叉污染

[中圖分類號] TP23 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）07-75-03

全自動化學發光免疫分析儀是一種利用化學發光原理結合免疫技術對樣本中痕量物質進行定性和定量分析的儀器，它結合了化學發光和免疫兩方面的優勢，從而具有靈敏度高、準確度高、特異性好、背景干擾小的優點，近幾年在臨床檢驗和食品安全等領域得到了廣泛的應用[1-2]。儀器的準確可靠是獲得良好數據的前提和基礎，為了保證全自動化學發光免疫分析儀的準確，國家制定了《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》行業標準，但是該標準主要用于儀器的注冊檢驗，用于日常的計量校準則較為嚴格和繁瑣。本研究在該標準及相關文獻的基礎上[3- 4]，參考國家頒布的《半自動生化分析儀》等醫療器械檢定規程中類似指標的計量方法

以及相關文獻的基礎上[5-7]，對雅培i2000全自動化學發光免疫分析儀的準確度、重復性、線性范圍、交叉污染等進行了評價。此方法可用于日常全自動免疫分析儀性能的評價和校準，有助于檢測結果的準確和可比。

1 儀器與試劑

全自動化學發光免疫分析儀（美國雅培i2000）；試劑為胰島素測定試劑盒及定標液（美國雅培）；質控品來自美國雅培公司；采用系列胰島素標準溶液作為樣本（中國計量科學研究院）。

2 實驗方法

首先采用廠家提供的檢測試劑盒和胰島素定標液對雅培i2000儀器進行定標，定標通過后測定質控，當質控符合要求后進行以下實驗。

雅培i2000全自動化學發光

免疫分析儀性能評價方法研究

郭 楠 房亞哲 楊 琦 李寶萍 楊曦明▲

北京中醫藥大學東直門醫院檢驗科，北京 100700

[摘要] 目的 對雅培i2000全自動化學發光免疫分析儀的性能進行了評價。方法 參考《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》醫藥行業標準和國家質量監督檢驗檢疫總局頒布的有關醫療器械檢定校準計量技術規范，闡述了準確度、重復性、線性范圍、交叉污染等指標的評價方法和選取理由。結果 準確度：197 pmol/L胰島素標準品測定結果誤差為6 pmol/L，20 pmol/L胰島素標準品測定結果誤差為2 pmol/L；重復性：對20 pmol/L的胰島素標準品重復測定6次，6次測定的相對標準偏差為2%；穩定性：開機4 h后和8 h后的相對偏差分別為3%和4%；線性范圍：20～197 pmol/L的胰島素范圍內，其線性相關系數可達到0.997；交叉污染：從低到高交叉污染率為1%，從高到低交叉污染率為0.2%。結論 提出的方法可用于日常全自動免疫分析儀性能的評價和校準，有助于檢測結果的準確和可比。

[關鍵詞] 全自動免疫分析儀；評價；校準；準確度；重復性；線性范圍；交叉污染

[中圖分類號] TP23 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2013）07-75-03

Study on the performance evaluation of ARCHITECT i2000 automatic chemiluminescence immunoassay analyzer

GUO Nan FANG Yazhe YANG Qi LI Baoping YANG Ximing

Department of Clinical Laboratory，Dongzhimen Hospital Affiliated to Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100700，China

[Abstract] Objective To evaluate the performance of ARCHITECT i2000 automatic chemiluminescence immunoassay analyzer. Methods With refer to the YY/T 1155-2009 automatic chemiluminescence immunoassay analyzer and related regulations published by the State Administration of Quality Supervision， Inspection and Quarantine， the protocols for accuracy， reproducibility， linear range， cross-contamination and so on were described in detail. Results Accuracy： the bias was 6pmol/L for 197pmol/L insulin sample and 2 pmol/L for 20 pmol/Linsulin sanple. Reproducibility： the standard deviation was 2% for 6 times analyses of 20 pmol/Linsulin sample. Stability： the relative bias was 3% and 4%， respectively， after 4 and 8 hours from power on. Linear range： the linear coefficient factor was 0.997 from 20 to 197pmol/L of insulin. cross-contamination： 1% from low level to high level and 0.2% from high level to low level. Conclusion The proposed protocols can be used for routine performance evaluation of automatic chemiluminescence immunoassay analyzer and can benefit the accuracy and comparability of clinical diagnostic results.

[Key words] Automatic chemiluminescence immunoassay analyzer；Evaluation；Calibration；Accuracy；Reproducibility；Linear range；Cross-contamination

全自動化學發光免疫分析儀是一種利用化學發光原理結合免疫技術對樣本中痕量物質進行定性和定量分析的儀器，它結合了化學發光和免疫兩方面的優勢，從而具有靈敏度高、準確度高、特異性好、背景干擾小的優點，近幾年在臨床檢驗和食品安全等領域得到了廣泛的應用[1-2]。儀器的準確可靠是獲得良好數據的前提和基礎，為了保證全自動化學發光免疫分析儀的準確，國家制定了《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》行業標準，但是該標準主要用于儀器的注冊檢驗，用于日常的計量校準則較為嚴格和繁瑣。本研究在該標準及相關文獻的基礎上[3- 4]，參考國家頒布的《半自動生化分析儀》等醫療器械檢定規程中類似指標的計量方法

以及相關文獻的基礎上[5-7]，對雅培i2000全自動化學發光免疫分析儀的準確度、重復性、線性范圍、交叉污染等進行了評價。此方法可用于日常全自動免疫分析儀性能的評價和校準，有助于檢測結果的準確和可比。

1 儀器與試劑

全自動化學發光免疫分析儀（美國雅培i2000）；試劑為胰島素測定試劑盒及定標液（美國雅培）；質控品來自美國雅培公司；采用系列胰島素標準溶液作為樣本（中國計量科學研究院）。

2 實驗方法

首先采用廠家提供的檢測試劑盒和胰島素定標液對雅培i2000儀器進行定標，定標通過后測定質控，當質控符合要求后進行以下實驗。

2.1 準確度評價

分別采用雅培i2000對標準值為197 pmol/L和20 pmol/L的胰島素標準溶液進行測定，每個水平的標準品分別測定3次取其平均值作為測定結果。根據下面的公式計算測量誤差，作為準確度的評價指標。

Δx=x-x0

其中，x為三次測量平均；x0為相應濃度水平的標準值。

2.2 重復性評價

采用雅培i2000對標準值為20 pmol/L的胰島素標準溶液進行測定，重復測定6次，計算測定結果平均值的相對標準偏差作為重復性指標的評價。

2.3 穩定性評價

采用雅培i2000對標準值為20 pmol/L的胰島素標準溶液進行測定，重復測定3次取平均值；4 h和8 h以后重復此過程，分別計算相對起始時刻的相對偏差作為穩定性的評價。

其中，x為4或8 h后測定結果的平均；x0為起始時刻測定結果的平均值。

2.4 線性范圍評價

采用雅培i2000對標準值分別為20、59、97、137、177、197 pmol/L的胰島素標準溶液進行測定，每個濃度水平的平行測定3次取平均值作為測量結果，對濃度水平和測定結果進行線性擬合并計算線性相關系數r2作為線性范圍的評價。

2.5 交叉污染率評價

采用雅培i2000對標準值為20 pmol/L的胰島素標準溶液連續測定4次，然后對197 mol/L的胰島素標準溶液連續測定4次。按照上述方法依次循環對20 pmol/L和197 pmol/L的測定，測得4組低濃度值與3組高濃度值，然后按照下面公式將每相鄰兩組數值進行計算，得到3個低濃度到高濃度的交叉污染率和3個從高濃度到低濃度的交叉污染率，以各自的最大值報告評價結果。

其，為從低濃度到高濃度的交叉污染率；

為從高濃度到低濃度的交叉污染率

L1，L2，L3，L4為每組低濃度的測量值

H1，H2，H3，H4為每組高濃度的測量值。

3 結果

依據上述實驗方法對雅培i2000全自動化學發光免疫分析儀準確度、重復性、穩定性、線性范圍和交叉污染指標進行評定，結果如下。

準確度：197 pmol/L胰島素標準品測定結果誤差為6 pmol/L，20 pmol/L胰島素標準品測定結果誤差為2 pmol/L；

重復性：對20 pmol/L的胰島素標準品重復測定6次，6次測定的相對標準偏差為2%。

穩定性：開機4 h后和8 h后的相對偏差分別為3%和4%。

線性范圍：20～197 pmol/L的胰島素范圍內，其線性相關系數可達到0.997。

交叉污染：從低到高交叉污染率為1%，從高到低交叉污染率為0.2%。

4 討論

4.1 準確度評價

測量儀器的準確度是指測量儀器給出接近于真值的響應能力。《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》中沒有對全自動化學發光免疫分析儀的準確度進行評價，可能主要是因為測量過程中采用相對測定方法，通過標準品定標實現未知樣品的測定，測定結果的準確度在很大程度上取決于試劑盒定標液的準確與否。但是在實際使用過程中也希望了解儀器的準確度，通過對已知濃度標準品的測定可以間接反應出儀器的準確度，測定結果與標準值之間的誤差可以作為準確度的表征。測試項目原則上應當選取結構簡單、有可用于免疫測定標準物質或標準品的分析對象。在本項研究中，我們采用的是中國計量科學研究院提供的胰島素標準品，對高值和低值標準品分別測定并計算誤差作為準確度的評價指標，其中高值胰島素標準品測定結果誤差為6 pmol/L，低值胰島素標準品測定結果誤差為2 pmol/L。

4.2 重復性評價

測量儀器的重復性是指測量儀器在相同的測量條件下為相同的被測物的重復應用提供非常近似示值的能力。《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》的行業標準規定重復性評價至少應當對同一份樣品重復測定20次，這是一個較為嚴格的要求，在日常校準評價中重復測定20次帶來的時間、試劑消耗太高。在國家頒布的檢定規程、校準規范等計量技術規范中，重復性實驗往往不超過10次。實驗中，采用雅培i2000對20 pmol/L的胰島素標準品重復測定6次，6次測定的相對標準偏差為2%，可作為重復性評價的結果。

4.3 穩定性評價

測量儀器的穩定性是指測量儀器保持其計量特性隨時間恒定的能力，實驗設計上參照了《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》中穩定性評價方法。開機4 h后和8 h后的相對偏差分別為3%和4%，都達到了標準的要求。

4.4 線性范圍評價

一般檢測結果的正常范圍跨度超不過一個數量級，因此評價中我們重點對一個數量級跨度的線性進行了評價，從而保證正常和異常狀態能夠準確區分。臨床上正常人空腹基礎血漿胰島素水平為35～145 pmol/L，因此實驗中我們對20、59、97、137、177、197 pmol/L的胰島素標準品進行測定，其線性相關系數可達到0.997，證明儀器在一個數量級信號跨度范圍內線性良好。

4.5 交叉污染評價

交叉污染率，即攜帶污染率主要反映了加樣系統在吸取高低值不同的樣品時由于吸附等引起的樣品沾污導致測定結果偏離真值的情況。為了真實的反映出交叉污染率，必須使用同一根加樣針吸取樣品，所以在配置有多組加樣針的系統中應當禁止使用其他加樣針，一只一只分別做測試。在交

叉污染率評價方法選擇上，參考比較了《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》醫藥行業標準和《JJG 464-2011 半自動生化分析儀》檢定規程中交叉污染率的評定方法。《JJG 464-2011 半自動生化分析儀》的評價方法與《YY/T 1155-2009全自動發光免疫分析儀》中的評價方法相比簡單易行，能夠滿足日常情況下儀器評價校準的用途，所以實驗過程中對雅培i2000交叉污染率的評價按照《JJG 464-2011 半自動生化分析儀》中的評價方法進行。經實驗，雅培i2000從低到高交叉污染率為1%，從高到低交叉污染率為0.2%。

本文闡述了全自動化學發光免疫分析儀準確度、重復性、線性范圍、交叉污染等指標的評價方法和選取理由，提出的方法可用于日常全自動免疫分析儀性能的評價和校準，有助于檢測結果的準確和可比。

[參考文獻]

[1] 王紅旗，金晶，成軍，等.美國Abbott Axsym免疫分析儀性能初步評價[J].現代檢驗醫學雜志，2003，24（2）：20-21.

[2] 馬紅霞，楊藺.MODULAR ANALYTICS E170全自動免疫分析儀精密度驗證情況分析[J].國際檢驗醫學雜志，2012，33（4）：476-478.

[3] 何碧芬，于敬哲.化學發光免疫分析儀校準方法初探[J].計量與測試技術，2006，33（10）：29-31.

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[5] 肖翔，張偉龍，潘理想，等.UniCel DXI800全自動磁性微粒子化學發光免疫分析系統性能評價[J].檢驗醫學與臨床，2013，10（2）：140-141.

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[7] 劉紋，鄭炘，劉曉敏.ARCHITECT-i2000SR全自動化學發光免疫分析儀檢測梅毒螺旋體特異性抗體的性能評價[J].中國保健營養，2012，22（10）：539.

（收稿日期：2013-03-19）