生長相關癌基因α與趨化素樣因子超家族2在胃癌組織的表達

阮正英 陳 豪 羅 斌 浙江省臺州市中西醫結合醫院 臺州317523

范廣民 浙江省臺州市中心醫院 應香嵐 浙江省臺州市腫瘤醫院

生長相關癌基因α與趨化素樣因子超家族2在胃癌組織的表達

阮正英 陳 豪 羅 斌 浙江省臺州市中西醫結合醫院 臺州317523

范廣民 浙江省臺州市中心醫院 應香嵐 浙江省臺州市腫瘤醫院

胃癌 趨化因子 生長相關癌基因α 趨化素樣因子超家族2

研究表明，趨化因子及其受體可能在腫瘤生長、浸潤和轉移等生物學行為中起著重要的作用[1-2]。趨化因子生長相關癌基因（growth-related oncogene，GRO）和趨化素樣因子超家族（chemokine-like factor superfamily member，CKLFSF）可能參與了腫瘤的生物學行為[3]，但與胃癌的關系目前尚不清楚。本研究通過檢測胃癌組織GROα和CKLFSF2表達，探討其與胃癌的發病機制的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年3月—2012年8月在臺州市中西醫結合醫院、臺州市腫瘤醫院和臺州市中心醫院住院、術后經病理確診胃癌患者63例，男40例，女23例，年齡48～89歲，平均（67.6±7.1）歲；其中低分化腺癌18例，乳頭狀腺癌13例，黏液腺癌和腺鱗癌各8例，管狀腺癌5例，未分化癌4例，鱗癌3例，印戒細胞癌和類癌各2例。取胃癌組織為觀察組，癌旁正常胃黏膜組織為正常對照組。

1.2 試劑和方法 兔抗人免疫組化試劑GROα多克隆抗體購自美國Biomedical Technologies公司，抗人CKLFSF2多克隆抗體購自上海天鴻生物科技有限公司，二抗山羊抗兔免疫組化試劑盒和DAB染色試劑均購自福州邁新生物技術開發有限公司。免疫組化技術測定GROα和CKLFSF2表達，具體步驟參考文獻[4]方法。GROα和CKLFSF2的抗體稀釋濃度分別為1∶100和1∶25。

1.3 結果判定 胞漿呈現棕黃色表達判定為陽性細胞，結構清晰，著色明顯高于背景。每高倍視野陽性細胞數＜5%為陰性，≥5%為陽性；～25%為（+），～50%為（++），～100%為（+++）。

1.4 統計學方法 應用SPSS16.0軟件進行統計分析，率的比較采用χ2檢驗，GROα與CKLFSF2蛋白表達的相關性采用spearman等級相關分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 胃癌組織和正常胃黏膜組織GROα表達 GROα蛋白主要表達于胃癌組織和正常胃黏膜組織的細胞漿內，呈棕黃色。胃癌組GROα陽性率顯著高于對照組（P＜0.01），見表1。伴有腹腔淋巴結轉移的胃癌組GROα陽性率顯著高于不伴有轉移者（P＜0.05)；其陽性率與性別、年齡、腫塊大小、分化程度和臨床分期無明顯關系（P均＞0.05），見表2，圖1～2（封二）。

2.2 胃癌組織和正常胃黏膜組織CKLFSF2蛋白表達 CKLFSF2蛋白主要表達于胃癌組織和正常胃組織的細胞漿內，呈棕黃色。胃癌組CKLFSF2陽性率顯著低于對照組（P＜0.05），見表1。其陽性率與性別、年齡、腫塊大小、分化程度、臨床分期和淋巴結轉移的生物學特性無明顯關系（P均＞0.05），見表2，圖3～4（封二）。

2.3 胃癌組織GROα與CKLFSF2表達的相關性胃癌組 GROα與 CKLFSF2表達均為陽性者占30.16%，其中CKLFSF2表達陰性組GROα的陽性率78.79%，CKLFSF2表達陽性組 GROα的陽性率63.33%，GROα表達陰性組 CKLFSF2的陽性率61.11%，GROα表達陽性組 CKLFSF2的陽性率33.33%。spearman等級相關分析顯示，兩者表達強度呈負相關（r=-0.480，P＜0.01），見表3。

表1 兩組胃黏膜組織GROα和CKLFSF2表達比較 例

表2 胃癌組GROα和CKLFSF2陽性率與臨床病理特點的關系 例

表3 胃癌組GROα和CKLFSF2的等級相關性

3 討論

胃癌與幽門螺桿菌感染有關，趨化因子在此可能起到一定的作用，有證據顯示，胃癌患者血清中白細胞介素6與幽門螺桿菌感染相關[5]。趨化因子是一種小分子量的促炎癥因子，涉及到炎癥細胞的浸潤、血管發生、血細胞生成、腫瘤及自身免疫性疾病。在腫瘤的生物學行為中，趨化因子及其受體表現出雙向調節作用，涉及到腫瘤的發生、發展和轉移。不同的趨化因子所起的作用不同，有的趨化因子促進腫瘤細胞的生長[6-7]，有的卻起著相反的作用[8]。

GROα屬于CXC趨化因子超家族成員，具有廣泛的促炎作用，還可能是一些慢性自身免疫性疾病新的治療靶點[9]。隨著研究的深入，越來越多的證據顯示其與惡性腫瘤存在一定的相關性，可能促進腫瘤的發生、發展、侵襲和轉移[10-11]。本研究發現，胃癌組織GROα蛋白陽性率明顯高于腫瘤周圍未受影響的正常黏膜組織，與胃癌淋巴結轉移相關，而與性別、年齡、腫塊大小、臨床分期和分化程度的生物學特性無相關性。提示GROα在胃癌組織表達增強，對腫瘤的生長可能有促進作用，還可能與腫瘤的轉移有關。

CKLFSF作為一種新型的細胞因子，位于人16號染色體上，其表達譜較廣。該家族包括CKLF和CKLFSF1-8共9個基因，在免疫、生殖、造血、腫瘤的發生等發揮重要作用[10-11]。目前研究主要集中在CKLF-1的生物學特性方面，認為它能通過下調Bax和Caspase-3及上調Bcl-2的途徑誘導血管平滑肌細胞增殖及抑制凋亡[10]，促進癌組織的生長。相反，CKLFSF則可能起著抑制腫瘤生長的作用。食管、賁門癌黏膜組織CMTM4和CMTM8蛋白陽性表達率均低于癌旁正常黏膜組織[11]。以上說明CKLFSF可能是潛在的抑癌因子，但CKLFSF2在胃癌的發生和發展中所起作用如何，則鮮見報道。本研究發現，胃癌組CKLFSF2陽性率明顯低于癌旁正常黏膜組織，提示其可能具有抑癌作用。研究還發現，CKLFSF2與患者的性別、年齡、腫塊大小、臨床分期、分化程度、淋巴結轉移的生物學特性無相關性。

綜上所述，胃癌組織GROα表達增加，可能對胃癌組織的生長有促進作用，還與腫瘤細胞轉移有關；而CKLFSF2表達下降，可能有抑制胃癌組織生長作用。本研究顯示，趨化因子影響腫瘤的生長及遠處轉移等生物學特性，檢測胃癌組織趨化因子GROα和CKLFSF2有助于判斷患者病情和預后。隨著研究的深入，以趨化因子及其受體為靶點可能有望成為一種新的治療方法。但其機制仍然不清，是否與組織學分型和幽門螺桿菌感染有關等，尚有待于進一步研究。

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［4］羅斌，王世夫，應香嵐，等.趨化因子在結腸癌發病中的作

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2013-04-11

浙江省溫嶺市科技局基金資助項目（No.2011-1-82）

通迅作者：羅斌，E-mail:luobinzg@163.com