越婢加術(shù)湯的急性毒性實(shí)驗(yàn)

劉文艷 韓 健 梁麗梅 戴力明 周酈楠 (遼寧衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 0000)

急性腎小球腎炎(簡(jiǎn)稱腎炎)是由于某些菌株感染導(dǎo)致的機(jī)體免疫反應(yīng)性炎癥，臨床以起病急、水腫、血尿、蛋白尿和高血壓為主要表現(xiàn)，其如果由急性轉(zhuǎn)為慢性，治療難度會(huì)大大增加，一旦轉(zhuǎn)為尿毒癥，幾乎無(wú)治愈的可能，因此，急性期的有效治療至關(guān)重要。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)主要是對(duì)癥治療，同時(shí)防治并發(fā)癥，療效不甚滿意。腎炎并非祖國(guó)醫(yī)學(xué)病名，但以臨床癥狀來(lái)看早在《內(nèi)經(jīng)》中即有記載，似屬“風(fēng)水、皮水”范疇〔1〕。越婢加術(shù)湯證治皮水，表現(xiàn)一身盡腫，發(fā)熱惡風(fēng)，小便不利，與腎炎臨床表現(xiàn)相吻合，故中醫(yī)以越婢加術(shù)湯治療腎炎收到滿意的療效。為了對(duì)本方的安全性做出客觀、科學(xué)的評(píng)價(jià)，使本方更好地服務(wù)于臨床，我們做了越婢加術(shù)湯對(duì)小鼠的急性毒性實(shí)驗(yàn)研究。

1 材料與方法

1.1 藥物 越婢加術(shù)湯(由麻黃、石膏、生姜、甘草、白術(shù)、大棗組成，沈陽(yáng)藥科大學(xué)提供)制備成散劑(平均粒徑15.01μm)，實(shí)驗(yàn)前用電子天平(FA2004，上海精密科學(xué)儀器有限公司)稱取，蒸餾水配制成溶液。

1.2 動(dòng)物 SPF級(jí)健康小鼠20只(18～22 g，雌雄各半，由遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司提供)，合格證號(hào)為:SCXK(遼)2010-0001。實(shí)驗(yàn)前后小鼠均室溫，正常飼料(由遼寧長(zhǎng)生生物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)同動(dòng)物合格證號(hào))和自來(lái)水飼養(yǎng)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)5 d后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。

1.3 預(yù)實(shí)驗(yàn)方法 正式實(shí)驗(yàn)之前，先做預(yù)試驗(yàn)，取小鼠10只，雌雄各半，以1.6 g/ml(可供灌胃的最大濃度)、0.8 ml/20 g體重(小鼠灌胃可承受的最大容量一次灌胃)。實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，不禁水，按空腹體重計(jì)算給藥量，給藥后連續(xù)觀察7 d。

1.4 觀察指標(biāo)〔2〕每日上下午各觀察一次，記錄小鼠的皮毛光澤度、活動(dòng)、呼吸、進(jìn)食情況、二便及口鼻有無(wú)異常分泌物;記錄7 d內(nèi)小鼠死亡數(shù)，死亡的小鼠即刻尸解，肉眼觀察上述內(nèi)臟有無(wú)異常變化，若有肉眼可觀察到的異常則進(jìn)行病理檢查。若7 d內(nèi)未見(jiàn)死亡小鼠，則7 d后逐一稱量并記錄各小鼠體重，然后處死全部存活小鼠，解剖并尸檢小鼠心、肝、脾、肺、腎、胃、腸等主要臟器組織的變化。如果7 d內(nèi)有死亡小鼠，則觀察時(shí)間延長(zhǎng)至10 d，觀察指標(biāo)同上。

1.5 正式實(shí)驗(yàn)(最大給藥量試驗(yàn)) 小鼠20只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組和給藥組，每組10只，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，不禁水，空腹稱小鼠體重后按0.8 ml/20 g體重容量，給藥組一日內(nèi)一次性灌胃1.6 g/ml越婢加術(shù)湯散劑，正常對(duì)照組灌胃等量蒸餾水1次，其余實(shí)驗(yàn)方法同給藥組。連續(xù)觀察7 d。觀察指標(biāo)同預(yù)試驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 給藥后7 d內(nèi)小鼠生存良好，無(wú)異常活動(dòng)、皮毛光潔亮澤，飲食情況及二便均無(wú)變化，口鼻無(wú)異常分泌物，未見(jiàn)死亡小鼠，處死、解剖并尸檢全部小鼠，無(wú)肉眼可觀察到的內(nèi)臟異常變化。

2.2 正式實(shí)驗(yàn)結(jié)果 給藥后7 d內(nèi)小鼠生存良好，無(wú)異常活動(dòng)、皮毛有光澤，與實(shí)驗(yàn)前比較飲食情況及二便均無(wú)變化，口鼻無(wú)異常分泌物，未出現(xiàn)死亡情況，7 d后處死全部小鼠，解剖并尸檢各小鼠上述主要內(nèi)臟，無(wú)肉眼可觀察到的內(nèi)臟異常變化。在可供灌胃最大劑量、最大容積條件下也未發(fā)生急性毒性反應(yīng)，故未測(cè)出LD50，每日最大給藥量為640 g/kg。小鼠體重變化見(jiàn)表1。給藥組與空白對(duì)照組間給藥前和給藥后7 d內(nèi)體重也無(wú)明顯差異(P＞0.05)。

表1 越婢加術(shù)湯急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果(x ± s，n=10)

3 討論

越婢加術(shù)湯臨床給藥劑量為成人(60 kg體重)一日劑量為64 g，小鼠灌胃最大給藥量為640 g·kg-1·d-1，按此量計(jì)算相當(dāng)于臨床成人一日等效劑量的600倍，一般認(rèn)為，按體重計(jì)算，小鼠1 d內(nèi)最大給藥量相當(dāng)于成人臨床日用量的100倍以上則較為安全〔3〕，本實(shí)驗(yàn)過(guò)程動(dòng)物不出現(xiàn)死亡，測(cè)不出LD50，表明越婢加術(shù)湯口服用藥短期內(nèi)無(wú)毒、安全。

1 張華勛.越婢加術(shù)湯治療急性腎炎的臨床體會(huì)〔J〕.錦江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2000;10(1):187-8.

2 謝秀瓊.中藥新制劑開(kāi)發(fā)與應(yīng)用〔M〕.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2000:527-42.

3 張國(guó)恩，楊德華，錢玉中，等.痹康飲合劑急性毒性實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中成藥，2005;27(3):339-40.