用DNA倍體定量分析和陰道鏡活檢進一步篩查宮頸液基細胞學異常病例 458 例的結果分析

趙中晟 畢學杰

宮頸癌的發病率逐年增加和越來越年輕化引起人們的重視，而宮頸液基細胞學檢查（TCT）對于宮頸癌和癌前病變（宮頸上皮內瘤變）的早期發現、早期治療提供有力幫助。本研究對 2011年5～12月期間宮頸液基細胞學檢查結果異常的ASCUS、LSIL、HSIL和SCC的病例共計 458 例進行DNA倍體分析和陰道鏡活檢病理進一步驗證，現將結果分析報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年5～12月間德宏州人民醫院和石家莊市婦產醫院病理科對門診、住院患者檢查液基細胞學共計 12460 例，共篩查出宮頸細胞異常者 458 例（3.67%），其中ASCUS 391 例（3.14%）、LSIL 45 例（0.36%）、HSIL 23 例（0.21%）和SCC 3 例（0.024%）。年齡 21～75 歲，平均 33.23 歲。

1.2 方法

1.2.1 液基細胞采用新柏氏液基細胞學檢查技術提供，婦科醫師取材，自動機器制片，巴氏染色，分別由 2 位高職診斷醫師共同確認，采用TBS分類，篩選結果異常為ASCUS、LSIL、HSIL和SCC患者共 458 例。

1.2.2 對 458 例液基細胞學異常病例采取液基制片后，進行FeulgenDNA染色，采用武漢蘭丁醫學高科技有限公司提供的DNA細胞自動檢測分析儀進行DNA倍體定量分析,所有Feulgen染色片。

用全自動細胞圖像分析系統(AICM)行掃描處理［1］。每例計數 8000 個細胞。DNA診斷結果為如下 4 種情況：（1）未見異倍體細胞及異倍體細胞峰（以細胞DNA為 2 C為主）。（2）少量異倍體細胞（以少數細胞DNA指數>2.5 為主，即出現少量 5 C細胞小于 1～5 個）。（3）可見異倍體細胞及異倍體細胞峰（以大量細胞DNA指數>2.5 為主，大于 5 C異常細胞數量在 5～15 個之間）。（4）大量異倍體細胞及異倍體細胞峰（以大量細胞DNA指數>2.5 為主，大于 5 C異常細胞數量大于 15 個）。凡是有DNA指數>2.5 以上細胞的玻片,都要通過細胞技術員在顯微鏡下逐一對DNA指數>2.5 細胞進行核實,以排除AcCell系統將垃圾和重疊的細胞核誤認為癌細胞或異常細胞。

1.2.3 對 458 例細胞學異常的病例均進行陰道鏡檢查，對可疑部位采取 4 點活檢，病理連續切片，高年資病理醫師閱片，結果為未見宮頸病變或宮頸鱗狀上皮細胞增生、CIN I、CIN II、CIN III和宮頸癌變。

1.3 統計學方法 計數資料間比較用χ2檢驗進行分析，P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 宮頸細胞異常和DNA倍體分析掃描結果的關系 對 458 例液基細胞學檢查異常的病例均進行DNA倍體定量掃描，共分類出未見異倍體細胞及異倍體細胞峰（以細胞DNA指數為 2 C為主）248 例（54.15%）、少量異倍體異常細胞 107 例（23.36%）（圖 1）、可見異倍體細胞 59 例（12.88%）（圖 2），現大量異倍體細胞及異倍體細胞峰（以大量細胞DNA指數>5 C為主）44 例（9.61%）（圖 3），見表1。

表1 細胞學異常的DNA倍體定量結果比較（例）

圖1 少量異倍體異常細胞直方圖和散點圖

圖2 可見異倍體異常細胞直方圖和散點圖

圖3 大量異倍體異常細胞直方圖和散點圖

2.2 宮頸細胞異常和活檢病理結果的關系 對 458 例細胞學異常病理選取可疑部位采取 4 點活檢，病理連續切片，高年資病理醫師閱片，結果為未見宮頸病變或宮頸鱗狀上皮細胞增生共計 243 例（50.87%）、CIN I共 76 例（16.59%）、CIN II共109例（23.80%）、CIN III共計 39 例（8.52%）和宮頸癌變 1 例（0.22%）。見表2。

表2 細胞學異常和活檢病理結果比較（例）

2.3 DNA倍體分析和活檢病理的關系

通過兩種方法比較，DNA倍體分析的異常檢出率和活檢病理異常檢出率基本一致，統計學上無顯著性差異，P>0.05。見表3。

表3 DNA倍體分析和活檢病理的比較（例）

3 討論

DNA異倍體的出現是染色體異常的表現，同時也是細胞癌變的特征指標。ASCUS和LSIL病變中如出現DNA異倍體細胞，提示提示病變有進一步發展的趨勢或者高危HPV感染的可能性。

本研究通過DNA倍體定量分析對細胞學異常的病例 458 例篩出倍體異常 210 例（占 45.85%）和活檢異常結果 215 （46.94%）對比無顯著差別（P>0.05）。證明用細胞學DNA倍體定量分析可以替代有創的陰道鏡觀察 2～4 點活檢方法，其結果可以和活檢媲美。

眾所周知，TCT對常規人群HSIL、LSIL的檢出率分別提高了 59.7%和 60%，TCT的假陽性率和假陰性率比傳統涂片都顯著降低。盡管如此，細胞學結果仍不能作為診斷及治療的依據，只有正確理解此項報告，進行正確、及時、必要的陰道鏡檢查，取得準確的組織結果才能使患者得到正確的診治。ASCCP（美國陰道鏡與宮頸病理協會）于 2001年針對宮頸細胞學結果異常與經組織學證實的宮頸上皮內瘤變制定了一整套循證醫學指南[2]。臨床醫師接到患者細胞學ASC及以上異常報告后往往采取宮頸活檢方式進一步確診，而活檢結果表明細胞學檢查經常出現假陰性和假陽性。活檢是有創檢查，但通常僅取 2～4 點位，如果活檢未取到病變部位，就可能造成假陰性。區別于正常和反應性改變，又無法明確診斷的病例給出限定，但只有通過完善、正規的管理和篩選才能得到正確的診斷，最大程度減少漏診或過度診斷、治療。

2001版TBS建議:ASCUS伴炎癥反應先治療炎癥,炎癥消退后重復涂片;ASC-US伴明顯萎縮改變的先做增生試驗,然后涂片鑒別是萎縮產生的反應性改變還是SIL;對ASC-US傾向良性反應改變的需涂片隨訪,2 次涂片時間不應少于 3 個月(一般 3～6 個月重復涂片,短期內重復涂片會造成假陰性,連續 3 次涂片陰性才算正常。對ASC-US傾向SIL者要陰道鏡觀察和檢查。國內目前常用處理原則:（1）3～6 個月復查細胞學;（2）高危型HPV-DNA檢測;（3）即刻陰道鏡檢查。大量研究結果顯示，ASC-US可能是反應性變化，也可能隱藏著宮頸病變[3]。

張薇等[4]報道，若以病理學診斷為金標準,計算常規細胞學和DNA倍體分析診斷CIN II或CIN II以上級別的敏感性。若以ASCUS和LSIL診斷作為活檢發現CIN II或CIN II以上級別的敏感性為 92.9%和 35.7%。而若以發現 1 個以上、3 個以上和 10 個以上非整倍體細胞作為活檢而發現CIN II或CIN II以上級別的敏感性分別為 100%、92.9%和 21.4%。

本研究對DNA倍體異常的病例進行比對，發現少量異倍體異常細胞 107 例（23.36%）、可見倍體異常占 59 例（12.88%），現大量異倍體細胞及異倍體細胞峰（以大量細胞DNA指數>5 C為主）44 例（9.61%），而活檢結果CIN I共 76 例（16.59%）、CIN II共 109 例（23.80%）、CIN III共計 39 例（8.52%）和宮頸癌變 1 例（0.22%）。結果表明，CIN I級和部分CIN II級基本掃描結果為少量DNA倍體異常和可見倍體異常;部分CIN II、CIN III級和SCC的掃描結果為大量DNA倍體異常。

[1]Doudkine A，MacAulay C，Poulin N，et al.Neclear texture measurements in image cytometry［J］.Pathological，1995，87(3):286-289.

[2]許淑霞，馬宏，吳荔香，等.328 例宮頸非典型鱗狀細胞病理及臨床意義分析[J].現代預防醫學，2010，37（23）：4582-4583.

[3]李曼，姚軍，鐘萍，等.ASC-US患者HPV-DNA分型檢測的臨床意義[J].中國婦幼保健,2011，26（1）：1691-1694.

[4]張薇,劉玉華,易細容,等.DNA定量分析用于宮頸癌及癌前病變的早期篩查探討[J].中國腫瘤,2007，16（7）：508-511.