ELISA、RPR、Trust三種方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的觀察

譚 珊 陳應(yīng)紅

貴州省黔西南州中醫(yī)院檢驗(yàn)科，貴州 黔西南州 562400

ELISA、RPR、Trust三種方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的觀察

譚 珊 陳應(yīng)紅

貴州省黔西南州中醫(yī)院檢驗(yàn)科，貴州 黔西南州 562400

目的：觀察探討ELISA、RPR、Trust三種方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的效果。方法：分析1711例梅毒檢測(cè)標(biāo)本資料，其中陽(yáng)性標(biāo)本例數(shù)30例，陽(yáng)性率為1.8%。結(jié)果：ELISA兩種方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體陽(yáng)性率明顯高于RPR、TRUST兩種方法檢測(cè)的陽(yáng)性率，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：ELISA對(duì)疑似梅毒患者有確證作用，但是其最終確診應(yīng)結(jié)合臨床綜合判斷，TRUST試驗(yàn)則可作為梅毒患者療效觀察及復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)試驗(yàn)進(jìn)行臨床應(yīng)用。

ELISA；RPR；Trust；梅毒螺旋體抗體

梅毒是臨床常見(jiàn)的性傳播疾病，其由蒼白密螺旋體感染引起，傳染性較強(qiáng)，因螺旋體對(duì)于人體的皮膚和黏膜的親和性較強(qiáng)，會(huì)繼發(fā)性引起機(jī)體各個(gè)組織和臟器損傷［1］。因近年來(lái)梅毒發(fā)生率明顯增高，對(duì)于梅毒臨床診斷方法逐漸增多，探討不同檢測(cè)梅毒的分析也廣泛開(kāi)展。筆者對(duì)我院收取的1711例檢測(cè)梅毒標(biāo)本資料進(jìn)行分析匯總?cè)缦隆?/p>

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2012年1月至2012年12月收取的1711例檢測(cè)梅毒標(biāo)本資料進(jìn)行分析，其中男性911例，女性800例，年齡3天～85歲，平均年齡（38.4±10.1）歲，陽(yáng)性標(biāo)本例數(shù)30例，陽(yáng)性率為1.8%。1711例檢測(cè)梅毒標(biāo)本分別通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡試驗(yàn)（RPR）、甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)（TRUST）進(jìn)行檢測(cè)。

1.2 試劑與方法

1.2.1 TRUST試劑 上海榮盛；ELISA試劑：上海科華；TP試劑：艾博生物。

1.2.2 ELISA 在每一個(gè)孔內(nèi)加入50μL待測(cè)樣本和50μL酶標(biāo)試劑，將其輕輕的振蕩混勻，進(jìn)行封板，37℃水浴30min，洗板5遍后，進(jìn)行扣干，每個(gè)孔內(nèi)加入顯色劑A和B，各50μL，混合均勻，進(jìn)行封板37℃，15min加入50μL終止液，在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值，空白孔調(diào)零后讀取待測(cè)樣品的吸光度值，大于或等于臨界值為陽(yáng)性。

RPR：參照試劑盒上的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

TRUST：加入50μL待測(cè)樣本放在紙卡的圓圈之內(nèi)，通過(guò)專(zhuān)用針頭將TRUST試劑滴入到圓圈內(nèi)，通過(guò)100轉(zhuǎn)／分鐘，離心8min之后通過(guò)顯微鏡觀察其凝集情況，如果凝集則為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察ELISA、RPR、Trust三種方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17.0建立數(shù)據(jù)庫(kù)，通過(guò)卡方檢驗(yàn)進(jìn)行分析計(jì)數(shù)資料，P＜0.05表示研究結(jié)果的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

ELISA、RPR、Trust三種方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的結(jié)果（如表1）。

表1 ELISA、RPR、Trust三種方法檢測(cè)梅毒螺旋體抗體的結(jié)果

3 討論

近年來(lái)我國(guó)的梅毒報(bào)告病例明顯增多，呈現(xiàn)快速增多的趨勢(shì)，梅毒流行趨勢(shì)逐漸嚴(yán)重，有效診斷和控制顯得尤為重要［2］。目前我院常用的梅毒檢測(cè)方法主要有三種。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是應(yīng)用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附原理進(jìn)行的血清學(xué)檢測(cè)方法，其在微孔板上預(yù)包被TP基因重組的抗原，向其加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的TP基因重組抗原，對(duì)血清中的抗TP－IgM和抗TP－IgG抗體進(jìn)行檢測(cè)，利用酶的放大性效應(yīng)，對(duì)檢測(cè)的靈敏度有所提高。同時(shí)抗原是采用了純化的基因重組抗原，這樣可以提高檢測(cè)的特異性［3］。RPR屬于非密螺旋體抗原試驗(yàn)，其主要是以牛心肌心脂質(zhì)作為檢測(cè)的抗原，對(duì)于患者血清中的抗脂質(zhì)抗體進(jìn)行測(cè)定，其所檢測(cè)的抗體主要是針對(duì)梅毒感染后宿主細(xì)胞釋放的類(lèi)脂質(zhì)和螺旋體表面的脂質(zhì)，當(dāng)梅毒螺旋體感染人體之后，對(duì)機(jī)體組織破壞進(jìn)而產(chǎn)生抗原性心磷脂，但對(duì)于其他的對(duì)機(jī)體破壞過(guò)程中也可能產(chǎn)生相應(yīng)的螺旋體表面脂質(zhì)，進(jìn)而引起RPR出現(xiàn)假陽(yáng)性。尤其是妊娠產(chǎn)婦、SLT、風(fēng)疹、水痘、乙肝都可以產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)是利用牛心磷脂作為抗原，對(duì)產(chǎn)生的非特異性抗類(lèi)脂質(zhì)類(lèi)物質(zhì)的非特異性進(jìn)行檢測(cè)，當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后，血清中會(huì)產(chǎn)生一定量的抗類(lèi)脂質(zhì)非特異性IgG抗體，其可以和類(lèi)脂質(zhì)抗原共同作用形成凝集顆粒。其操作方法較簡(jiǎn)單，靈敏度特異性較低，價(jià)格便宜，檢測(cè)時(shí)間較短，不需要特殊儀器可以進(jìn)行抗體滴度，其不適宜對(duì)早期梅毒和晚期梅毒進(jìn)行診斷，適合用于治療過(guò)程中的梅毒患者，其滴度的變化可以反映患者臨床治療效果，還可以判定梅毒的復(fù)發(fā)和再感染，其在一些傳染性疾病和膠原病患者中也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。綜上所述，ELISA對(duì)疑似梅毒患者有確證作用，但是其最終確診應(yīng)結(jié)合臨床綜合判斷，TRUST試驗(yàn)則可作為梅毒患者療效觀察及復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)試驗(yàn)進(jìn)行臨床應(yīng)用。

［1］鄭玉平，張杰，嚴(yán)佳斌.梅毒螺旋體抗體篩查及其臨床意義［J］.臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，11（23）：1878－1879.

［2］馬榮，李曉蘭，趙成艷.RPR、ELISA、TP—HA三種方法檢測(cè)梅毒抗體的臨床應(yīng)用評(píng)估［J］.放射免疫學(xué)雜志，2011，24（4）：454－455.

［3］繆亞梅，王文鼎.常用梅毒抗體檢測(cè)方法的比較［J］.海南醫(yī)學(xué)，2013，24（8）：1168－1170.

R446.11

A

1007－8517（2013）21－0052－01

2013.09.16）