乙型肝炎病毒DNA定量與血清學標志物檢測的相關分析及臨床意義

王笑石

（沙洋縣人民醫院檢驗科，湖北 荊門 448200）

乙型肝炎病毒DNA定量與血清學標志物檢測的相關分析及臨床意義

王笑石

（沙洋縣人民醫院檢驗科，湖北 荊門 448200）

目的 分析HBV-DNA定量與血清學標志物定量檢測之間的相關性及臨床意義。方法 采用ELISA檢測386例HBV感染者的HBV血清學標志物，同時采用PCR-熒光探針法定量檢測HBV-DNA拷貝值。比較大三陽組（HBsAg、HBeAg和HBcAb陽性）與小三陽組（HBsAg、HBeAb和HBcAb陽性）的HBV-DNA定量平均對數值；并分析血清學標志物與HBV-DNA定量的相關性。比較慢性肝炎、重型肝炎和肝硬變者HBV-DNA定量平均對數值的差異。結果 大三陽組與小三陽組的HBV-DNA定量平均對數值分別為（7.82±1.02）vs（3.52±0.76）IU/mL（P=0.024）；HBsAg、HbeAg與HBV-DNA定量呈正相關，而HbeAb、HBcAb與HBV-DNA定量無相關。慢性肝炎、重型肝炎和肝硬變者HBV-DNA定量平均對數值為分別為（9.23±1.73）、（9.45±1.26）、（8.93±1.38）IU/mL（P＜0.001）。結論 HBV血清學標志物結合DNA定量檢測對于評價傳染性有意義，但對分析臨床類型無意義。

乙型肝炎病毒；熒光定量PCR；酶聯免疫吸附試驗

乙型肝炎病毒（HBV）的血清標志物能反映機體對HBV的免疫反應狀態，但是較難以反映HBV在體內的復制水平、傳染性以及治療效果[1]。而目前公認乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）是HBV復制情況及傳染性最可靠和最直接的指標，并且對于療效、耐藥性及復發狀況進行動態監測[2]。但目前對于HBV-DNA定量與血清學標志物定量檢測之間的相關性，以及二者檢測對于HBV感染的臨床類型分類研究尚不充分，因此本研究回顧分析HBV感染者的HBV-DNA定量、血清標志物與臨床類型之間的關系進行了比較分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象及分組

選取2008年1月至2011年9月我院就診的HBV感染患者386例，作為研究對象進行回顧性研究，其中男203例，女183例，平均年齡（32.2±8.6）歲。診斷標準依據符合2000年全國病毒性肝炎和肝病學術會議修訂的《病毒性肝炎防治方案》。臨床類型：慢性肝炎患者198例、重型肝炎患者72例、肝硬變患者116例。所有患者在本研究2月前，均無應用抗病毒、激素或免疫抑制劑史。

按照HBV血清學標志物，分為兩組：大三陽組，即HBsAg、HBeAg和HBcAb陽性；小三陽組，即HBsAg、HBeAb和HBcAb陽性。

1.2 HBV血清學標志物的檢測

按照試劑盒（購自英科新創科技有限公司）操作說明書進行檢測乙肝5項，其中HBsAg、HBeAg、HBeAb和HbcAb的結果。

1.3 血清HBV-DNA定量檢測

采用PCR-熒光探針法定量檢測血清HBV-DNA，嚴格按試劑操作說明書操作。設立空白、陰性、臨界陽性和強陽性對照，以檢測試劑和操作過程中的污染情況以及檢測的靈敏度，同時檢測低值和中值室內質控物進行質量控制。所有標本均在同一條件下同一批檢驗，其陽性截止值為≥2×106copy/L。

1.4 統計學處理

應用SPSS 15.0統計軟件進行統計檢驗，計量資料數值以（）表示，兩組數據比較采取組間t檢驗，多組數據比較采取ANONVA檢驗，組間比較應用SNK檢驗。相關性采用直線回歸分析，以P＜0.05為存在統計學差異。

2 結 果

2.1 傳染性不同的血清HBV-DNA定量分析

大三陽組與小三陽組的HBV-DNA定量平均對數值分別為（7.82± 1.02）vs（3.52±0.76）IU/mL（P=0.024）。

2.2 血清HBV-DNA定量與血清學標志物相關性

HBsAg、HbeAg與HBV-DNA定量呈正相關，r值分別為0.002、0.007；而HbeAb、HBcAb與HBV-DNA定量無相關，r值分別為0.085、0.033（表1）。

表1 血清HBV-DNA定量與血清學標志物相關性

2.3 臨床類型與血清HBV-DNA定量比較

慢性肝炎、重型肝炎和肝硬變者HBV-DNA定量平均對數值為分別為（9.23±1.73）、（9.45±1.26）、（8.93±1.38）IU/mL（P＜0.001）（表2）。

表2 臨床類型與血清HBV-DNA定量比較

3 討 論

臨床上確診HBV感染有賴于病原學診斷，主要的檢測方法是應用免疫血清學方法檢測HBV血清學標志物以及應用分子生物學方法檢測HBV-DNA。HBV血清學標志物主要反映的是人體對乙肝病毒的免疫狀態，而HBV-DNA是病毒復制活動最直接，也是最可靠的實驗標志物，也是HBV感染最為直接的證據[3]。既往認為HBsAg、HBeAg和HBcAb陽性，即“大三陽”患者，傳染性最大，而HBsAg、HBeAg和HBcAb陽性，即“小三陽”患者，HBeAg轉陰且產生HBeAb，表明HBV病毒的復制水平減少，拷貝數減少，因此傳染性減弱，病變趨于靜止狀態。從本研究結果來看，“大三陽”患者的血清HBV-DNA定量明顯較“小三陽”患者高，這證實了臨床的觀點。但是也有臨床證據顯示，由于HBV存在pre-c基因變異，進而出現雖然HBeAg陰性且HBeAb陽性，但是病毒復制仍然活躍的情況，因此臨床上不能僅根據免疫血清學的結果來對“小三陽”患者的病毒復制水平以及傳染性進行判斷，而應該結合血清HBV-DNA定量分析來綜合評價，最佳方法是進行動態監測。

本研究分析血清HBV-DNA定量與血清學標志物相關性，顯示HBsAg和HBeAg值與血清HBV-DNA定量呈正相關，而HbeAb、HBcAb與HBV-DNA定量無顯著相關性[4]。因此，測定血清中HBsAg和HbeAg水平可以間接反映血清HBV-DNA的量，這對于基層醫療機構快捷判斷抗病毒藥物治療療效和預后判斷均有很好的臨床意義。在分析不同臨床類型與血清HBV-DNA定量的相關性中，本研究顯示慢性肝炎、重型肝炎以及肝硬變的血清HBV-DNA定量并無明顯差異，這一點與國內的報道有不一致[5]。因此需要進行大規模、多中心臨床研究來判斷。

[1] 陳小晶,王奕忠,鄭映玉,等.乙肝病毒載量與血清標志物定量的相關性[J].廣東醫學,2009,30(2):239-241.

[2] 楊婷,謝亞榮,王波.乙肝病毒攜帶產婦血清和乳汁中HBV-DNA定量檢測及其臨床意義[J].實用醫技雜志,2008,15(24):3213-3214.

[3] 蔡惠興,吳英,梁鵬.乙肝血清標志物與HBV-DNA定量檢測結果分析[J].國際醫藥衛生導報,2010,16(2):218-219.

[4] 溫旺榮,蘇芳,昊勇,等.乳汁處理方法對檢測HBV-DNA結果的影響[J].臨床檢驗雜志,2007,25(1):31-33.

[5] 周平,張木森,蔡慶,等.定量聚合酶鏈反應檢測HBV感染者血清HBV-DNA的臨床意義[J].空軍總醫院學報,1997,13(4):193-195.

R512.6+2

B

1671-8194（2013）27-0176-02