新疆部分地區(qū)兒童復(fù)發(fā)性喉乳頭狀瘤HPV11病毒感染與復(fù)發(fā)

再努拉·艾未肉拉 吳 梅

新疆自治區(qū)人民醫(yī)院耳鼻喉一科,新疆烏魯木齊830001

兒童復(fù)發(fā)性呼吸道乳頭狀瘤病（juvenileonsetrecurrentrespiratorypapillomatosis，JRRP）是發(fā)生于兒童的一種常見(jiàn)喉真性腫瘤[1]。根據(jù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)報(bào)道已初步證實(shí)，HPV16和HPV18中所含有的E6蛋白可促使P53蛋白快速降解，使P53蛋白對(duì)腫瘤造成抑制。相較于HPV6感染，HPV11感染所引起的病變其復(fù)發(fā)率和侵襲性均更高更強(qiáng)，要想進(jìn)入緩解期非常困難，導(dǎo)致患者出現(xiàn)HPV11感染，這與氣管內(nèi)乳頭狀瘤病和喉部均有較為密切的聯(lián)系。為探討兒童喉乳頭狀病HPV11毒類(lèi)型與兒童復(fù)發(fā)性喉乳頭狀瘤病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，現(xiàn)總結(jié)分析2010年1月—2013年4月間該院耳鼻喉科所收治的42例兒童復(fù)發(fā)性呼吸道乳頭狀瘤患者的臨床資料，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該組資料所有患者均來(lái)至于，新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院耳鼻喉科所收治的42例兒童復(fù)發(fā)性呼吸道乳頭狀瘤，其中16例為漢族，26例為維吾爾族。女性患者共計(jì)27例，男性患者共計(jì)15例，其中14例為復(fù)發(fā)患者，復(fù)發(fā)標(biāo)準(zhǔn)為該院因JRRP就診且進(jìn)行了2次或以上手術(shù)，年齡1～13歲，5歲以下31例（73.8%）。

1.2 HPV6，11 的 PCR 檢測(cè)

所采用的HPV6以及HPV11均為GENERAYBIOTECH公司所合成。設(shè)計(jì):HPV6引物（擴(kuò)增 280bp）序列為 5′TAGTGGGCCTATGGCTCGTC3′和 5′TCCATTAGCCTCCACGGGTG3′，HPV11 引物 （擴(kuò)增 360bp） 序列為 5′GGAATACATGCGCCATGTGG3′和 5′CGAGCAGACGTCCGTCCTCG3′。 擴(kuò)增體系:在 50 μL 的體系中，模板 DNA5 μL，2×PCRMasterMix25 μL，引物各 1 μL，ddH2O18 μL。循環(huán)參數(shù)設(shè)置為94℃→5 min 94℃30s→56℃30 s→72℃60 s，共計(jì)循環(huán)數(shù)達(dá)到了30個(gè)，最后在72℃延長(zhǎng)10 min時(shí)間。電泳及觀察：將5 μL的反應(yīng)物放入2%的瓊脂糖凝膠中電泳的反應(yīng)，并觀察溴乙啶的染色情況，此外運(yùn)用紫外燈來(lái)查看。通過(guò)觀察發(fā)現(xiàn)，可以看到均呈現(xiàn)為特異性電泳帶，也就是說(shuō)結(jié)果為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，并將數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)起來(lái)形成數(shù)據(jù)庫(kù)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。以率（%）作為計(jì)數(shù)資料的表示，以χ2對(duì)組間進(jìn)行對(duì)比檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

對(duì)HPV6和HPV11進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)技術(shù)采用PCR技術(shù)，檢驗(yàn)結(jié)果為42例患兒中41例患兒HPV檢驗(yàn)結(jié)果均呈現(xiàn)為陽(yáng)性，占97.61%，其中26例為HPV11陽(yáng)性，另15例為HPV6陽(yáng)性，另有7例患兒兩則均為陽(yáng)性；14例發(fā)病患兒中，11例檢驗(yàn)結(jié)果為HPV11陽(yáng)性，見(jiàn)表1。通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，該組資料中27例為女性患兒，且HPV11感染率也明顯高于男性（女70.37%，男50%）。

該組JRRP15例患兒中，10例氣管切開(kāi)，占66.67%，但3例患兒術(shù)后病情復(fù)發(fā)，占20%。而26例HPV11陽(yáng)性患兒中，23例氣管切開(kāi)，占88.46%，11例術(shù)后病情復(fù)發(fā)，占42.30%。由此可知，HPV11感染以氣管切開(kāi)為主要法，但其復(fù)發(fā)率卻非常遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于HPV6。但HPV6與HPV11對(duì)小兒喉乳頭狀瘤的復(fù)發(fā)率的影響沒(méi)有差別。

表1 四格表基本數(shù)據(jù)

3 討論

一直以來(lái)各地對(duì)其病毒類(lèi)型及其他危險(xiǎn)因素做了很多研究，但是病毒類(lèi)型對(duì)于疾病嚴(yán)重程度和預(yù)后的影響結(jié)果各異。有些研究表明HPV6更具侵襲性，有些則是HPV11更具侵襲性。

3.1 HPV病毒類(lèi)型與兒童復(fù)發(fā)性喉乳頭狀瘤嚴(yán)重程度之間的關(guān)系

該研究通過(guò)對(duì)新疆部分地區(qū)兒童復(fù)發(fā)性喉乳頭狀瘤患兒病理標(biāo)本的研究中發(fā)現(xiàn)其主要致病菌均為HPV6/11。新疆部分地區(qū)兒童復(fù)發(fā)性喉乳頭狀瘤患兒以HPV11感染者居多。維吾爾族患兒發(fā)病率較漢族高，維吾爾族患兒中HPV11感染者明顯高于HPV6，在漢族患兒中兩種病毒的感染區(qū)別不十分明顯。

氣管切開(kāi)的患兒當(dāng)中HPV11感染患兒高于單一HPV6感染的患兒。病毒類(lèi)型與疾病的嚴(yán)重程度之間有密切的關(guān)系。HPV11感染患兒復(fù)發(fā)率高，氣管切開(kāi)率高，HPV11感染與疾病的嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān)。該文中經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)分析表明HPV病毒類(lèi)型與JRRP復(fù)發(fā)率之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這與以往的一些論點(diǎn)不同。

喉乳頭狀瘤發(fā)病與人乳頭狀瘤病毒(humanpapillomavirus，HPV)6型和11型感染直接相關(guān)。近2年來(lái)，大量實(shí)驗(yàn)報(bào)道[2]對(duì)分析流行病學(xué)深入分析，證實(shí)了HPV是一種與人體上皮組織較為相似的共生體，當(dāng)人體的免疫力處于正常的狀態(tài)下，HPV也始終處于亞臨床狀態(tài)，不會(huì)對(duì)人體造成危害，但一旦人體免疫力下降，其活性也將隨之上升。

JRRP的復(fù)發(fā)率較高，該組復(fù)發(fā)的患兒當(dāng)中HPV11感染者居多，發(fā)病年齡小，初次診斷后1～2年內(nèi)手術(shù)次數(shù)多，每3～6個(gè)月出現(xiàn)1次復(fù)發(fā)，累計(jì)復(fù)發(fā)次數(shù)超過(guò)了30次，復(fù)發(fā)頻率將隨著病程的推移，年齡和治療次數(shù)的增加逐漸下降。不少患兒可能需要經(jīng)歷較長(zhǎng)時(shí)間的間歇復(fù)發(fā)期，還有不少患兒通過(guò)自身的調(diào)節(jié)逐漸緩解，但目前臨床對(duì)其機(jī)制并無(wú)統(tǒng)一看法。筆者認(rèn)為這與患兒的個(gè)體免疫力、內(nèi)分泌以及激素等方面是分不開(kāi)的。

在腫瘤鄰近的組織中HPV6/11的檢出率為60%可能是其復(fù)發(fā)的原因之一。該研究表明[3]，兒童復(fù)發(fā)性喉乳頭狀瘤病的嚴(yán)重程度與年齡密切相關(guān)，患者初次診斷年齡越小復(fù)發(fā)率越高，2～4歲之間發(fā)病率最高,復(fù)發(fā)率最高，在初次診斷后的1～2年內(nèi)手術(shù)次數(shù)最高，其后逐漸下降。發(fā)病年齡越小疾病嚴(yán)重程度越高。這可能與多種因素有關(guān)。3歲以下兒童氣道一般較小,較小的腫物生長(zhǎng)也能引起嚴(yán)重的氣道阻塞而需多次手術(shù)切除以保持呼吸道通暢，是其解剖原因。隨著年齡的增長(zhǎng)疾病呈現(xiàn)自限性，復(fù)發(fā)率明顯降低。在該組資料中，患兒主要表現(xiàn)為以下特征：①主要發(fā)病人群為低于5歲的兒童；其中29例為5歲以下兒童，占69.05%；13例為5歲以上兒童，占30.95%。②若患兒5歲前其病灶未消失，那么5歲后手術(shù)間隔期也將隨之延長(zhǎng)。為此，筆者認(rèn)為JRRP有一定的自限性，在治療的過(guò)程中，可結(jié)合該特點(diǎn)，針對(duì)性地進(jìn)行治療，使更多地患兒及其家屬能夠建立起治愈的信心，這也警惕醫(yī)生，在臨床治療過(guò)程中，切忌使用一次根治，以免對(duì)患兒的喉部造成過(guò)大的刺激。

[1] 唐朝賢，吳森勇，黃詩(shī)平.HPV6/HPV11型病毒在兒童復(fù)發(fā)性呼吸道乳頭狀瘤中的表達(dá)[J].中國(guó)癌癥防治雜志，2013(1)：58-60.

[2] 黃亞強(qiáng)，鐘惟德，畢學(xué)成，等.HER-2 mRNA值在前列腺癌中的表達(dá)和意義[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2010(3)：389-391.

[3] 楊新明,鐘科峰.熒光定量PCR在檢測(cè)兒童肺炎支原體感染中的應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010(2)：157-158.