急性有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞的變化

羅姝 曹小平 邱里

急性有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞的變化

羅姝 曹小平 邱里

目的 探討急性有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞的變化及意義, 為急性有機磷農藥中毒患者的搶救提供參考。方法 回顧性總結分析本院在2009年1月～2013年1月期間收治的80例急性有機磷農藥中毒患者的臨床病例資料, 根據患者入院時中毒程度分為輕度中毒、中度中毒和重度中毒三組, 檢測患者外周血樹突狀細胞水平, 同時以30名健康志愿者作為對照, 分析有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞的變化。結果 與健康對照組相比, 三組不同程度中毒患者第1天外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞均有顯著升高, 差異具有統計學意義(P＜0.05)；中毒后第3天, 輕度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平恢復正常, 而中度中毒患者上述指標逐漸下降, 重度中毒患者上述指標顯著高于正常水平；中毒后第5天, 中度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平接近正常水平, 重度中毒患者上述指標仍顯著高于正常水平。中毒后第7天, 重度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平均有所下降, 但仍高于正常對照組。結論 急性有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞的變化能較客觀地反映不同中毒程度患者的病理變化過程, 檢測患者外周血樹突狀細胞的變化對病情判斷以及臨床治療具有一定的指導意義。

急性有機磷農藥中毒；外周血樹突狀細胞；變化

有機磷農藥中毒是基層醫院中常見的中毒之一, 中毒機理主要是有機磷農藥與人體膽堿酯酶結合并形成磷酰膽堿脂酶, 影響正常人體膽堿酯酶的功能, 造成乙酰膽堿不能正常分解, 從而使乙酰膽堿在機體神經突觸大量積累, 造成膽堿能神經功能失調。首先使膽堿能神經持續興奮, 然后興奮轉為抑制, 進而產生一系列中毒癥狀, 導致患者出現昏迷, 嚴重者造成呼吸衰竭而死亡［1］。在基層醫院有機磷農藥中毒是常見急癥, 特別是農忙季節(春、秋), 中毒者口服占多數,一般病情兇險, 變化迅速, 中毒之后如果不能及時救治, 極容易導致患者死亡。在意外中毒時, 多種環境污染物和藥物能改變細胞免疫功能。急性有機磷農藥中毒可引起機體多種生理、生化指標的改變, 亦可引起體液免疫功能、細胞免疫功能的改變［2］。本研究回顧性總結分析四川省南充市川北醫學院附屬醫院在2009年1月～2013年1月期間收治的80例急性有機磷農藥中毒患者的臨床病例資料, 根據患者入院時中毒程度分為輕度中毒、中度中毒和重度中毒三組, 檢測患者外周血樹突狀細胞水平, 同時以30名健康志愿者作為對照, 分析有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞的變化。現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院在2009年1月～2013年1月期間收治的80例急性有機磷農藥中毒患者, 其中女49例, 男31例,年齡15～66歲, 患者平均年齡為38.4歲?；颊咧薪浵牢罩卸菊?2例, 皮膚接觸中毒者12例, 經呼吸道吸收中毒者6例。中毒后最長15 h才來本院就診, 最短30 min即來本院就診, 大多數患者在中毒后40 min～2.5 h內來本院就診。患者中經消化道吸收中毒者表現為瞳孔針尖狀縮小、大汗淋漓以及肌纖維顫動和腺體分泌增多等典型的有機磷農藥中毒癥狀。所有患者入院以后, 按照患者的血清膽堿酯酶活力測定結果以及癥狀表現判定為重度中毒者12例, 判定為中度中毒者32例, 輕度中毒者36例。根據患者入院時中毒程度分為輕度中毒、中度中毒和重度中毒三組, 其中輕度中毒36例、中度中毒32例、重度中毒12例, 檢測上述三組患者外周血樹突狀細胞水平, 同時以30名健康志愿者作為對照, 分析有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞的變化。

1.2 檢測方法 采用流式細胞術檢測外周血樹突狀細胞水平, 采用CELLQuest軟件分析細胞數目及比例。三組急性有機磷農藥中毒患者和健康志愿者均于入院第1、3、5、7 d清晨空腹抽取靜脈血, 采用3 ml 乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血,外周血單個核細胞分離后, 采用流式細胞術檢測外周血樹突狀細胞水平, 所有受試者在標本采集前均取得研究對象的知情同意。采用Ficoll梯度密度離心法分離外周血單個核細胞,采用磷酸鹽緩沖液對EDTA抗凝血進行等體積稀釋, 然后將稀釋后的待測血液樣品按1:1的比例加到淋巴細胞分離液上, 2000 rpm/min離心20 min, 待測血液樣品離心后分為四層, 由上到下依次為血漿、外周血單個核細胞層、淋巴細胞分離液和紅細胞；將外周血單個核細胞層小心吸出, 放入離心管中,然后加入5倍體積的磷酸鹽緩沖液混合, 1500 rpm/min離心10 min, 獲得外周血單個核細胞樣品, 隨后制備成外周血單個核細胞懸浮液進行測定［3］。

1.3 統計學方法 計量資料采用百分率(%)或者均數±標準差表示。采用SPSS17.0統計分析軟件對研究數據進行統計分析, 計數資料之間的比較采用卡方檢驗進行分析, 計量資料之間的比較使用t檢驗進行分析, 統計結果以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

三組患者和健康對照者外周血髓樣樹突狀細胞 (mDC, CD11c+CD123-)和細胞樣樹突狀細胞 (pDC, CD11c-CD123+)變化情況如表1所示。由表1可知, 與健康對照組相比, 三組不同程度中毒患者第1天外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞均有顯著升高, 差異具有統計學意義(P＜0.05)；中毒后第3天, 輕度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平恢復正常, 而中度中毒患者上述指標逐漸下降, 重度中毒患者上述指標顯著高于正常水平；中毒后第5天, 中度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平接近正常水平, 重度中毒患者上述指標仍顯著高于正常水平。中毒后第7天, 重度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平均有所下降, 但仍高于正常對照組。

表1 三組患者和健康對照者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞變化情況

表1 三組患者和健康對照者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞變化情況

組別例數檢測時間細胞樣樹突狀細胞(×107/L)髓樣樹突狀細胞(×107/L)健康對照組301.01±0.544.01±1.54輕度中毒組3612.02±0.908.02±2.90 3 1.24±0.454.24±1.45 5 1.09±0.114.09±1.11 7 1.04±0.134.04±1.13中度中毒組3214.30±1.7012.30±3.70 3 1.87±1.248.87±2.24 5 1.40±0.965.40±1.96 7 1.06±0.744.06±1.74重度中毒組1215.50±1.1015.50±3.10 3 5.90±1.8914.90±3.89 5 4.50±1.1012.50±3.10 7 3.90±1.898.90±1.89

3 討論

有機磷農藥是有機磷脂類化合物, 經消化道、呼吸道以及皮膚黏膜吸收進入人體后會導致機體中毒。在基層醫院有機磷農藥中毒是一種常見的病情危重且病死率高的嚴重疾病, 中毒機理主要是有機磷農藥與人體膽堿酯酶結合并形成磷酰膽堿脂酶, 導致人體膽堿酯酶不能正常分解乙酰膽堿,從而使乙酰膽堿在機體神經突觸大量積累, 造成膽堿能神經功能失調。首先使膽堿能神經持續興奮, 然后興奮轉為抑制,進而產生一系列中毒癥狀。中毒之后如果不能及時救治, 極容易導致患者死亡［4］。在意外中毒時, 多種環境污染物和藥物能改變細胞免疫功能。急性有機磷農藥中毒可引起機體多種生理、生化指標的改變, 亦可引起體液免疫功能、細胞免疫功能的改變。急性有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞也會發生相應的變化, 本次研究結果顯示, 與健康對照組相比, 三組不同程度中毒患者第1天外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞均有顯著升高, 差異具有統計學意義(P＜0.05)；中毒后第3天, 輕度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平恢復正常, 而中度中毒患者上述指標逐漸下降, 重度中毒患者上述指標顯著高于正常水平；中毒后第5天, 中度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平接近正常水平, 重度中毒患者上述指標仍顯著高于正常水平。中毒后第7天, 重度中毒患者外周血髓樣樹突狀細胞和細胞樣樹突狀細胞水平均有所下降, 但仍高于正常對照組。中毒初期, 患者血液樹突狀細胞升高, 升高程度與患者中毒程度有關, 中毒越重, 升高越顯著；中毒第3 d樹突狀細胞明顯降低, 且中毒越重, 恢復越緩慢；第5 d,中度中毒患者才恢復正常, 而重度中毒患者雖然樹突狀細胞呈不斷下降的趨勢, 但直到第7 d, 樹突狀細胞仍高于正常值,重度中毒患者出現上述表現可能與持續應激有關［5］。急性有機磷農藥中毒患者外周血樹突狀細胞的變化能較客觀地反映不同中毒程度患者的病理變化過程, 檢測對患者外周血樹突狀細胞的變化對病情判斷以及臨床治療具有一定的指導意義。

［1］ 李偉強, 阮海林.急性有機磷農藥中毒的腫瘤壞死因子, 白細胞介素-6, C 反應蛋白的臨床研究現狀與展望.中國醫藥指南, 2012, 10(11): 99-100.

［2］ 潘曦明, 詹義星, 陳潔, 等.急性有機磷中毒患者白細胞, 血糖,血淀粉酶的變化及臨床意義.臨床薈萃, 2010, 25(9): 800-801.［3］ 葉紀錄.白細胞中各群細胞在有機磷農藥中毒預后評估中的意義.中華急診醫學雜志, 2012, 21(2): 207-209.

［4］ 余秀顏, 劉平, 郭喜顏.有機磷中毒病人治療過程中多項血清因子變化規律及護理研究.全科護理, 2011, 9(17): 1507-1508.

［5］ 張在其, 梁仁, 黃韜, 等.全血, 血漿, 紅細胞膽堿酯酶活性在急性有機磷農藥中毒病程中的變化及意義.中華急診醫學雜志, 2001, 10(4): 232-234.

637000 四川省南充市川北醫學院附屬醫院急診科