腦出血患者血清血小板源性生長因子的動態變化及其臨床意義

陳 亮 張向東 馬登飛 (安陽市人民醫院神經內科，河南 安陽 455000)

腦血管病中腦出血約占20% ～30%，腦出血起病急驟、病情兇險、死亡率非常高，對腦出血的早期診斷和盡早治療將會對患者的預后帶來很大的改變〔1，2〕。血小板源性生長因子(PDGF)在中樞神經系統受到損傷時，合成和分泌會相應增加〔3，4〕，因此，本研究觀察急性腦出血患者血清PDGF的動態變化，旨在為腦出血的早期診斷和病情以及預后判斷提供相關生物學指標。

1 材料與方法

1.1 臨床病例資料 2009年5月至2011年12月我院神經內科住院腦出血患者84例，入組者發病＜24 h，臨床診斷參照腦血管病全國第四屆學術會議所修訂的標準:《各類腦血管病診斷要點》〔5〕，同時經頭顱CT與MRI影像學檢查確診。其中男49例，女35例，年齡44～75〔平均(63.6±11.7)〕歲。腦出血患者在入院48 h內、第4、8天應用Fugl-Meyer評測法(FMA)對其進行神經功能缺損程度評分。排除標準:嚴重心臟、肝臟、腎臟等疾病，糖尿病以及甲狀腺疾病，自身免疫性疾病、急慢性感染、血液病等。另選取我院體檢中心的健康體檢者26例為對照組，其中男15例，女11例，年齡40～72歲〔平均(59.3±12.5)〕歲，兩組受試者年齡、性別和體重等具有可比性(P＞0.05)。

1.2 影像學檢查 腦出血患者在入院第2天進行頭顱影像學復查，并估算血腫大小，血腫體積=0.5×血腫最大長徑×與長徑相垂直的直徑×血腫層面數，參照Leira等〔6〕的方法將血腫分為少量(體積＜20 ml)、中量(體積20～40 ml)、大量出血(體積＞40 ml)組。

1.3 PDGF的測定 受試者在發病 ＜48 h、第4、8、12天采集清晨空腹外周不抗凝靜脈血5 ml，3 000 r/min離心15 min分離血清，-70℃低溫保存待測。酶聯免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)測定外周血PDGF的表達水平，PDGF ELISA檢測試劑盒購自北京尚柏生物工程公司，采用美國RB公司生產的試劑，嚴格按試劑盒說明操作，Model 550酶標儀(Bio-Rad，USA)450 nm處測定測定OD值，以OD值為縱坐標，以標準品濃度為橫坐標，繪制標準曲線，然后對照標準曲線根據血清樣品的OD值計算PDGF的濃度。

2 結果

2.1 腦出血患者血清PDGF表達水平隨發病時間的動態變化腦出血患者＜48 h、第4、8、12天的血清PDGF含量均明顯高于正常對照組(P＜0.01)，腦出血患者直到第8天血清PDGF水平仍未見差異性變化(P＞0.05)，12 d血清PDGF水平開始較前顯著減少，與＜48 h、第4、8天相比具有顯著性差異(P＜0.05)。見表1。

表1 腦出血患者發病不同時間血清PDGF表達的動態變化(μg/L，±s)

表1 腦出血患者發病不同時間血清PDGF表達的動態變化(μg/L，±s)

與對照組比較:1)P＜0.01;與發病＜48 h相比:2)P＜0.01;與發病第4天相比:3)P＜0.01;與發病第8天相比:4)P＜0.05

組別 n ＜48 h 第4天 第8天 第12天對照組26342.6±35.3 - - -腦出血組84 534.6±61.41)525.3±54.11)492.5±46.21)412.5±37.81)2)3)

2.2 腦出血患者血清PDGF蛋白含量與神經功能缺損的關系腦出血患者FAM評分在第8天開始升高，但其與＜48 h、第4天比較無顯著性差異，第12天顯著升高，與＜48 h、第4、8天比較存在統計學意義(P＜0.05)，說明患者病情出現好轉時其相應的血清PDGF表達水平出現了減低，見表2。FAM評分與PDGF表達水平之間呈負相關(r=-0.62，P＜0.05)。

表2 腦出血患者血清PDGF水平動態變化與FMA評分之間的相關性(±s，n=84)

表2 腦出血患者血清PDGF水平動態變化與FMA評分之間的相關性(±s，n=84)

與發病＜48 h相比:1)P＜0.01;與發病第4天相比:2)P＜0.01;與發病第8天相比:3)P＜0.05

病程 PDGF(μg/L) FMA評分＜48 h 534.6±61.4 5.6±2.4第4天 525.3±54.1 5.8±2.7第8天 492.5±46.2 6.7±3.4第12天 412.5±37.81)2)3) 16.6±6.51)2)3)

2.3 不同出血體積腦出血患者血清PDGF表達水平的動態變化 腦出血＜48 h，不同出血體積PDGF表達水平均高于對照組(P＜0.01)，并且不同出血體積之間也存在顯著性差異，隨血腫體積的增大其水平也相應地升高(P＜0.05)，少量出血組PDGF水平第8天開始減低，第12天時恢復到正常水平(P＜0.05);中量出血組PDGF水平第8天也開始減低，但第12天仍然高于正常水平(P＜0.05);大量出血組PDGF水平在第12天才開始減低，高于正常水平(P＜0.05)。同一時間點不同分組PDGF表達水平之間也存在顯著性差異(P＜0.05)。見表3。

表3 不同體積血腫患者血清PDGF表達水平動態變化的比較(±s，μg/L)

表3 不同體積血腫患者血清PDGF表達水平動態變化的比較(±s，μg/L)

與對照組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;與發病＜48 h相比:3)P＜0.05，4)P＜0.01;與發病第4天相比:5)P＜0.05，6)P＜0.01;與發病第8天相比:7)P＜0.05

組別 n ＜48 h 第4天 第8天 第12天對照組26 342.6±35.3 - - -少量出血組 23 434.2±44.72) 427.3±41.42) 384.9±38.51)3)5) 352.3±32.64)6)7)中量出血組 32 514.6±63.72) 506.4±55.22) 466.5±50.62)3)5) 401.7±47.41)2)3)5)大量出血組 29 623.7±68.62) 602.0±61.72) 596.4±57.22) 511.7±43.82)3)5)7)

3 討論

腦出血因其發病急、致死率、致殘率高，即使入院病人也有30% ～40%的死亡率，并且50% ～70%的存活者遺留癱瘓、失語等嚴重殘疾，因此腦出血成為難治性的腦血管疾病，尤其是出血后腦水腫常常會導致病情的惡化〔7，8〕。因此尋找一種非侵入性、快速準確診斷急性腦出血，并預測其損害程度及預后的生化檢測指標，是完善臨床診治腦出血的有效途徑。

在過去的幾十年里，一些生物標記已經被用于一些疾病的早期診斷和病情的監控〔9〕，腦出血后會引起機體和腦組織局部的一系列病理生理反應并釋放一些生物化學標志物，PDGF在中樞神經系統中有廣泛的表達，與多種神經系統的疾病有密切關系，研究顯示神經細胞損傷時神經膠質細胞合成PDGF增多〔10〕。腦出血所引起的腦水腫、腦缺血或缺氧、顱內壓升高等因素導致了星形膠質細胞的大量增生和分泌，PDGF分子量較小只有28 kD，通過血腦屏障運輸到血液中，另外腦出血續發的腦水腫所激發的炎癥反應、受損的內皮細胞以及血液中血小板的激活，都會導致PDGF表達水平的升高〔11〕。

FAM評價法是一種綜合軀體功能評價法，FAM評分越低，說明神經功能缺損的越嚴重，隨著患者病情的好轉FAM評分會逐漸升高〔12〕，本研究說明患者血清PDGF的表達水平與患者的病情密切相關。PDGF表達水平與患者的預后有一定的相關性。其可能的機制是腦出血量越大，壓迫周圍的腦組織越多使血腫周圍水腫、炎癥反應越強烈的，星形膠質細胞增生越活躍，各種機制促使PDGF合成分泌大量增加，所以PDGF表達水平也就反映出了患者病情的嚴重程度。

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