六堡茶對小鼠免疫功能的影響

劉冠萍 黃宇聲 張栩顏 饒偉源 鄧聿胤 覃良

六堡茶是以地理名稱命名的歷史名茶，原產于廣西梧州市蒼梧縣六堡鄉，至今已有1500多年歷史。六堡茶屬于溫性茶，除了具有其它茶類所共有的保健作用外，具有更強的分解油膩、降低人體類脂肪化合物、膽固醇、三酸甘油脂的功效，長期飲用可以有健胃養神、消滯除脹、清熱化濕、醒酒、降脂等多種保健功效[1]，成人服用量是一次3 g，3次/d。目前關于六堡茶的研究甚少，本實驗旨在探討六堡茶對小鼠免疫功能的影響，為六堡茶的開發與應用提供基礎實驗依據。

1 材料與方法

1.1 動物 健康KM小鼠120只，體重18～22 g，雌雄兼用，廣西醫科大學實驗動物中心提供（許可證號：SCXK桂2009-0002）。

1.2 藥品與試劑 六堡茶水提物，由研究者自行提取，性狀為棕褐色浸膏（每毫升相當于藥材1.87 g）。臨用時以蒸餾水配成相應濃度使用。小牛血清，由美國Hyclone公司生產；RPMI l640，由美國Gibco公司生產；刀豆蛋白A（ConA）、四甲基偶氮唑鹽（MTT），由美國Sigma公司生產。其他試劑均為國產分析純。

1.3 儀器 二氧化碳培養箱（美國Queue公司）；超凈工作臺（上海浦東躍欣科學儀器廠）；自動酶標儀（美國Bio-Rad公司）。

1.4 方法

1.4.1 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗 將小鼠隨機分為四組：正常對照組、六堡茶低劑量組（3.75 g/kg）、六堡茶中劑量組（7.5 g/kg）、六堡茶高劑量組（15 g/kg），每組10只。除正常對照組外，各組每天灌胃六堡茶1次，給藥體積20 ml/kg，正常對照組灌胃等體積的蒸餾水，連續30 d后，參照文獻[2]方法進行實驗。按下式計算吞噬率和吞噬指數。

吞噬率（%）=吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數/巨噬細胞數×100%

吞噬指數=被吞噬的雞紅細胞總數/巨噬細胞數

1.4.2 血清溶血素測定 分組及給藥同上。于灌胃第26天給小鼠腹腔注射2%SRBC 0.2 ml/只，于免疫后第4天摘眼球采血，分離血清并在微量血凝板上進行血清溶血素測定。37 ℃孵育3 h后，統計血球凝集度，計算相應抗體積數[3]。

1.4.3 小鼠淋巴細胞轉化實驗 分組及給藥同上。參照文獻[3]方法進行實驗，末次給藥后2 h，無菌取脾細胞，常規制備小鼠脾細胞懸液，采用MTT比色法測定脾淋巴細胞增殖能力。

1.5 統計學處理 采用SPSS 13.0軟件對實驗數據統計處理，計量資料以（±s）表示，進行單因素方差分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 六堡茶對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力的影響 由表1可見，與正常對照組比較，六堡茶高劑量小鼠的腹腔巨噬細胞吞噬率、吞噬指數明顯高于正常對照組（P<0.05），中、低劑量組差異無統計學意義（與正常對照組比較，P>0.05）。見表1。

表1 六堡茶對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力的影響（±s）

表1 六堡茶對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力的影響（±s）

*與正常對照組比較，P<0.05

組別 劑量（g/kg）吞噬率（%） 吞噬指數正常對照組（n=10） - 23.9±4.2 0.41±0.05六堡茶低劑量組（n=10） 3.75 24.2±5.6 0.43±0.11六堡茶中劑量組（n=10） 7.5 27.1±3.7 0.45±0.06六堡茶高劑量組（n=10） 15 28.8±5.1* 0.52±0.13*

2.2 六堡茶對小鼠血清溶血素的影響 由表2可見，與正常對照組比較，六堡茶中、高劑量能明顯增加小鼠的抗體積數（P<0.05），低劑量組差異無統計學意義（P>0.05），表明六堡茶具有提高小鼠血清溶血素水平的作用。

表2 六堡茶對小鼠血清溶血素的影響（±s）

表2 六堡茶對小鼠血清溶血素的影響（±s）

*與正常對照組比較，P<0.05

組別 劑量（g/kg） 抗體積數正常對照組（n=10） - 130.8±18.2六堡茶低劑量組（n=10） 3.75 137.6±13.9六堡茶中劑量組（n=10） 7.5 147.8±13.2*六堡茶高劑量組（n=10） 15 150.3±15.5*

2.3 六堡茶對小鼠脾淋巴細胞轉化試驗的影響 由表3可見，與正常對照組比較，六堡茶各劑量組的淋巴細胞增殖能力均無明顯變化（P>0.05）。

表3 六堡茶對小鼠小鼠脾淋巴細胞轉化試驗的影響（±s）

表3 六堡茶對小鼠小鼠脾淋巴細胞轉化試驗的影響（±s）

淋巴細胞增殖能力（OD值）正常對照組（n=10） - 0.183±0.061六堡茶低劑量組（n=10） 3.75 0.192±0.055六堡茶中劑量組（n=10） 7.5 0.206±0.072六堡茶高劑量組（n=10） 15 0.210±0.057組別 劑量（g/kg）

3 討論

本文選用了數個免疫測定指標觀察和探討六堡茶對小鼠免疫機能的調節作用。巨噬細胞的吞噬能力很強，其胞漿內富含溶酶體、酸性磷酸酶和過氧化物酶等物質，能非特異性地吞噬多種抗原，在機體的非特異性免疫反應中具有十分重要的作用。吞噬作用常作為反映巨噬細胞功能狀況的指標[2]。實驗結果表明，六堡茶高劑量能明顯提高小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬指數和吞噬率，說明六堡茶能夠增強機體的非特異性免疫能力。

血清溶血素是B淋巴細胞在接受各種抗原刺激后分泌的抗體，是衡量機體體液免疫水平的重要指標[4]。本實驗結果顯示，六堡茶能使正常小鼠血清溶血素的含量明顯增高，提示其具有增強小鼠體液免疫功能的作用。

可見，六堡茶具有增強免疫力的功能，但其增強免疫功能的機制及對免疫分子的作用有待于進一步研究。

[1] 楊柳.六堡茶工藝的探討[J].廣西輕工業，2008，9（4）：13-15.

[2] 孫晶，徐儉.木脂素對小鼠免疫功能的影響[J].哈爾濱醫科大學學報，2010，44（5）：467-470.

[3] 宋琳琳，陳立，陳五嶺.食源性生物活性肽對小鼠免疫功能的影響[J].西北大學學報（自然科學版），2009，39（4）：612-616.

[4] 王麗葉，馬利芹，徐倩倩，等.蔥乙醇提取物對小鼠免疫功能的影響[J].中國農學通報，2010，26（20）：7-10.