瑞舒伐他汀對高血壓合并動脈粥樣硬化患者內皮功能及內皮型氧化亞氮合酶基因表達的影響

黃珮,朱 靜

(江蘇省南京市紅十字醫院內科,江蘇南京,210001)

高血壓患者出現心腦血管并發癥主要與動脈粥樣硬化病變有關,而動脈粥樣硬化的發生是高血壓、糖脂代謝異常、炎癥反應及內皮細胞功能障礙等多種因素共同作用的結果。內皮功能障礙的一個重要特征是內皮源性氧化亞氮(NO)合成、釋放和活性受到限制,其不僅出現在動脈硬化早期,而且在心腦血管疾病發展中發揮重要作用[1]。NO是調節許多生理過程的重要信息,內皮型氧化亞氮合成酶(eNOS)通過調節內皮細胞NO產生而調節血流、炎癥和血小板聚集[2]。內皮功能失常時,NO紊亂可降低血小板穩定性,導致動脈粥樣硬化形成。他汀類藥物防治心血管疾病的作用可能與其改善血管內皮功能有關[3]。有資料[4]顯示,他汀類藥物可增加eNOS基因表達,從而引起NO含量增加,血管舒張,改善內皮功能。本研究主要探討了瑞舒伐他汀對高血壓合并動脈粥樣硬化患者內皮功能及eNOS基因表達的影響,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年3月—2013年3月本院收治的經頸部彩色多普勒檢查有頸動脈粥樣斑塊的原發性高血壓患者50例作為研究組,其中男29例,女21例,年齡41～70歲,平均(57±7)歲。同時選取無頸動脈粥樣斑塊的原發性高血壓患者25例作為對照組,其中男13例,女12例,年齡 42～69歲,平均(53±6)歲。所有患者血壓均得到有效控制(收縮壓≤140 mmHg,舒張壓≤90 mmHg),排除繼發性高血壓、嚴重肝腎疾病、并發感染、近2月內腦卒中、近3月內急性冠脈綜合征史,以及近期使用他汀類藥物或已知過敏者。2組患者年齡、性別、血壓及使用的降壓方案無顯著差異(P>0.05),具有可比性。

1.2 方法

所有患者維持原有降壓方案不變,研究組予以瑞舒伐他汀10 mg,口服,1次/d,治療12周。治療前和治療后12周后分別行彩色多普勒超聲、血管內皮功能超聲、血清學檢查及eNOS mRNA檢測。

頸動脈超聲檢測:采用西門子Antares彩色多普勒超聲診斷儀,探頭頻率7.5～10.0 MHz。頸總動脈內膜中層厚度(IMT)測量:患者取仰臥位,縱向超聲顯像可表現為由相對較低回聲分隔的2條平行亮線,2線間垂直距離即IMT,凍結頸動脈竇以下1 cm圖像,測量3次IMT,取3次測量值的平均值為頸總動脈IMT厚度值;頸動脈斑塊積分計算:斑塊為局限性回聲結構突出管腔,厚度≥1.3 mm,采用Crouse方法計算,不考慮各個斑塊的長度,而分別將兩側頸總動脈(CCA)、頸內動脈(ICA)、頸外動脈(ECA)各孤立的動脈粥樣硬化斑塊的最大厚度相加,即為頸動脈斑塊積分。

血管內皮功能超聲檢測:患者取仰臥位,右上肢外展15°,在肘窩上2～5 cm行肱動脈二維超聲顯像,取直縱切面,在舒張末期測肱動脈內徑,取3個心動周期的平均值為基礎肱動脈內徑(D0)。之后,將血壓計袖帶置于肱動脈遠端,充氣加壓至250～300 mmHg,保持5 min,迅速將袖帶放氣,在放氣后60～90 s內測肱動脈最大內徑,以加壓前后肱動脈內徑的變化率作為評價內皮依賴性血管舒張功能(FMD)的指標,△D1%=(D1-D0)/D0×%[5]。上述檢查后休息15 min,待血管內徑恢復試驗前狀態,舌下含化硝酸甘油0.5 mg,4 min后重新測定肱動脈內徑,以含化硝酸甘油前后肱動脈內徑變化率作為評價非內皮依賴性血管舒張功能(NMD)的指標,△D2%=(D2-D0)/D0×%。整個試驗過程中,超聲探頭始終處于固定位置不變。

血清學檢查:所有患者均在行彩色多普勒超聲檢查當天清晨取空腹血6 mL送檢。其中3 mL查超敏C反應蛋白(hs-CRP)、血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC)、高密度脂蛋白(HDL-C),3 mL放于室溫下3000r/min,離心25min,分離血清置-70°冰箱內,測定超氧化物歧化酶(SOD)和NO水平。

eNOS mRNA檢測:采用半定量反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)法,抽取全血1 mL,使用RNA提取盒提取總RNA,反轉錄cDNA。PCR擴增,產物于2%瓊脂糖凝膠電泳,電泳圖數據由密度測量。

2 結 果

2.1 2組治療前彩色多普勒超聲和血清學檢查結果比較

治療前,研究組IMT、hs-CRP水平顯著高于對照組,而SOD、FMD及NO顯著低于對照組,差異均有統計學意義(P<0.01),見表1。

表1 2組治療前彩色多普勒超聲和血清學檢查結果比較()

表1 2組治療前彩色多普勒超聲和血清學檢查結果比較()

與治療前比較,＊＊P<0.01。

組別 研究組(n=50) 對照組(n=25)TG/(mmol/L) 2.60±0.91 2.59±0.69 TC/(mmol/L) 5.82±2.40 5.63±2.15 LDL-C/(mmol/L) 3.62±1.90 3.46±1.70 HDL-C/(mmol/L) 0.95±0.41 1.01±0.42 SOD/(mmol/L) 65.80±2.72＊＊ 103.50±5.30 IMT/(mmol/L) 1.36±0.41＊＊ 0.62±0.42 FMD/% 7.50±1.80＊＊ 9.50±2.10 NMD/% 11.00±2.20 11.00±2.10 NO/(mmol/L) 32.10±6.20＊＊ 80.70±3.50 hs-CRP/(mg/L) 5.88±1.72＊＊ 2.41±1.34

2.2 研究組治療前后頸動脈硬化指標、FMD及相關血清學指標比較

研究組治療后頸動脈IMT和斑塊積分較治療前明顯縮小,FMD改善,SOD、NO升高,以及hs-CRP、TG、TC及LDL-C明顯降低,差異均具有統計學意義(P<0.01),見表2。

2.3 研究組治療前FMD與心血管危險因素相關性分析

治療前,研究組FMD與心血管危險因素相關性分析顯示,FMD與SOD(r=0.55,P=0.007)、NO(r=0.73,P=0.01)成正相關,與IMT(r=-0.53,P=0.000)、hs-CRP(r=-0.45,P=0.044)、收縮壓(SBP)(r=-0.36,P=0.023)、TC(r=-0.29,P=0.031)成負相關。

2.4 eNOS mRNA表達情況

治療前,研究組與對照組eNOS/磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)灰度值分別為(0.64±0.08)和(0.87±0.05)。治療后,研究組eNOS/GAPDH灰度值較治療前明顯下降(P<0.01)。

表2 研究組治療前后頸動脈硬化指標、FMD及相關血清學指標比較()(n=50)

表2 研究組治療前后頸動脈硬化指標、FMD及相關血清學指標比較()(n=50)

與對照組比較,＊＊P<0.01。

時間 治療前 治療后IMT/mm 1.36±0.41 1.13±0.32＊＊斑塊積分/mm 6.85±0.60 4.66±0.61＊＊FMD/% 7.50±1.80 10.40±2.50＊＊NMD/% 11.00±2.20 11.30±2.20 hs-CRP/(mg/L) 5.88±1.72 3.02±1.40＊＊TG/(mmol/L) 2.60±0.91 1.65±0.70＊＊TC/(mmol/L) 5.82±2.40 4.04±1.42＊＊LDL-C/(mmol/L) 3.62±1.90 2.37±1.12＊＊HDL-C/(mmol/L) 0.95±0.41 1.02±0.43 NO/(mmol/L) 32.10±6.20 41.60±3.30＊＊SOD/(mmol/L) 65.80±2.72 84.10±1.20＊＊

3 討 論

原發性高血壓是一種常見病、多發病。近年來研究[6-7]認為,高血壓是內皮損傷的始動因素之一,可加重血管內皮功能障礙,而血管內皮功能障礙所致的內皮素/NO失衡又對其發生、發展起重要作用。此外,由于眾多危險因子損傷內皮而發生的一系列炎癥反應,也可能是動脈粥樣硬化形成的始動因素。本研究結果顯示,合并頸動脈粥樣硬化的高血壓患者內皮依賴性FMD更差,FMD、SOD及NO水平降低,而代表炎癥反應的hs-CRP顯著增高。汪莉等[8]研究顯示,FMD與收縮壓、IMT、TC呈負相關,與本研究結果一致。此外,本研究還表明,FMD與hs-CRP呈負相關,與Sinisalo等[9]研究結果一致,這可能與后者患者在入組前長期服用保護內皮功能的藥物有關。內皮及內皮功能對維持血管穩定性、保持血管緊張度、防止血栓形成具有重要的作用;內皮細胞損傷和內皮細胞通透性增加使血液中的脂質易于沉積在內膜,引起巨噬細胞的清除反應和中膜平滑肌細胞的增生,形成粥樣斑塊。SOD是體內重要的血管抗氧化系統,能減少血管氧化應激,同時也能通過NO通道改善內皮依賴性血管擴張[10]。eNOS可通過內皮細胞NO生成來調節內皮細胞功能,在內皮細胞、全血細胞CD34+單核細胞等都有表達。

他汀類藥物對內皮功能的改善與其升高SOD,增加eNOS mRNA表達有關,其可升高eNOS蛋白,改善eNOS酶活性[11]。瑞舒伐他汀能除了能調節血脂水平外,還可以使SOD升高,eNOS mRNA表達增強,介導上調eNOS蛋白水平[12],從而引起NO增加,血管舒張,改善血管內皮功能。目前,FMD等指標是檢測內皮功能穩定性和重復性最好的指標,本研究通過檢測缺血eNOS mRNA表達水平評估患者的內皮功能,結果顯示,高血壓合并動脈粥樣硬化患者經瑞舒伐他汀治療后SOD升高,eNOS mRNA表達明顯增強,引起eNOS蛋白水平增加,從而引起NO含量增加,進而改善內皮功能;同時還能明顯改善血脂水平,且具有穩定動脈粥樣硬化斑塊、抑制細胞增殖、抗炎等非調脂作用。最近一項研究[13]表明,瑞舒伐他汀能夠改善高血壓患者內皮依賴性FMD。Sinisalo等[14]研究首次采用血管內超聲評價他汀類藥物對冠狀動脈斑塊的影響,結果證實經他汀類藥物治療后,冠狀動脈內斑塊出現了消退。本文結果也證實,高血壓合并頸動脈斑塊患者經瑞舒伐他汀治療12周,不僅血脂水平降低,而且SOD升高,eNOS mRNA表達明顯增強,NO水平升高,血管內皮功能改善,IMT和斑塊積分減少。

綜上所述,合并動脈粥樣硬化的高血壓患者內皮功能障礙較重,且內皮功能與多種心血管危險因素相關,瑞舒伐他汀可通過增強eNOS基因表達來改善內皮功能,穩定動脈斑塊。

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