血清sCD44v6和sE-cadherin檢測在食管鱗癌中的臨床應用

張林飛

(湖北省恩施州衛生學校,湖北恩施,445000)

食管癌是最常見的消化道腫瘤,在中國呈高發狀態,對人們的健康構成嚴重威脅[1]。食管癌發展涉及一系列復雜動態的過程,而腫瘤的浸潤、轉移在其發病中起關鍵作用,而細胞間連接的異常是最重要的步驟之一,與細胞間黏附分子CD44v6與 E-鈣黏蛋白(E-cadherin,E-cad)的異常表達相關[2]。可溶性CD44v6(sCD44v6)和可溶性E-鈣黏蛋白(sE-cadherin,sE-cad)是血清中檢測出可溶性細胞間黏附分子,有研究[3]表明其在乳腺癌、胃癌等腫瘤中血清水平均顯著升高。sCD44v6及sE-cad在食管癌血清中的表達情況目前相關研究較少。本研究通過檢測sCD44v6、sE-cad在食管癌患者血清中的表達情況,探討其與食管癌發病的作用及與食管癌浸潤、轉移的關系,現報告如下。

1 資料與方法

選取2008—2012年恩施州中心醫院外科手術并病理活檢確認食管鱗癌(即食管鱗癌組)患者共94例,年齡 47～82歲,平均(43.2±10.5)歲,男51例,女43例;腫瘤大小包括≤3 cm者38例,>3 cm者56例;分化程度包括高分化型41例,中低分化型 53例;浸潤深度分為T1～T2期36例,T3～T4期58例;伴有淋巴結轉移者45例,無轉移者49例。選擇同期門診胃鏡檢查、黏膜病理活檢確診為糜爛性食管炎患者83例(糜爛性食管炎組)和正常食管黏膜患者89例(正常食管組),前者年齡41～80歲,平均(41.6±11.4)歲,男47例,女36例;后者年齡39～78歲,平均(42.9±10.7)歲,男 50例,女 39例。3組在年齡、性別等方面差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。

sCD44v6、sE-cad檢測方法:所有患者均清晨空腹采血,分離血清,保存于-70℃待測。二者均采用ELISA法,試劑盒均購自奧地利GmbH公司,按試劑盒說明書進行實驗操作,酶標儀(波長分別為450 nm和630 nm)比色讀數,繪制標準曲線。

采用SPSS 13.0進行統計學分析,計數資料采用卡方檢驗,計量資料以平均數±標準差表示,進行t檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

食管鱗癌組、正常食管組、糜爛性食管炎組3組間sCD44v6、sE-cad血清水平比較有顯著差異(F分別為443.810,274.010,P<0.01),其中正常食管組、糜爛性食管炎組的sCD44v6、sE-cad血清水平比較均無顯著差異(P>0.05);食管鱗癌組sCD44v6、sE-cad血清水平顯著高于糜爛性食管炎和正常食管黏膜組。見表1。sCD44v6、sE-cad血清水平表達均與食管鱗癌的腫瘤大小、浸潤深度、淋巴結轉移、分化程度無顯著相關,見表2。sCD44v6、sE-cad血清水平在食管鱗癌中的相關性顯示,sCD44v6血清水平和sE-cad血清水平的相關系數r=-0.087,P=0.574,二者相關性不顯著。

表1 3組sC D44v6、sE-cad血清水平比較(,ng/mL)

表1 3組sC D44v6、sE-cad血清水平比較(,ng/mL)

與正常食管組比較,＊＊P<0.01;與糜爛性食管炎組比較,##P<0.01。

指標 正常食管組(n=89) 糜爛性食管炎組(n=83) 食管鱗癌組(n=94)sCD44v6 104.72±6.24 102.65±7.08 131.6±8.37＊＊##sE-cad 23.85±2.14 24.67±1.92 30.72±2.39＊＊##

表2 sCD44v6、sE-cad血清水平與食管鱗癌患者臨床病理特征關系(,ng/mL)

表2 sCD44v6、sE-cad血清水平與食管鱗癌患者臨床病理特征關系(,ng/mL)

病理參數 n sCD44v6 t P sE-cad t P腫瘤直徑 ≤3 cm 38 130.51±8.58 1.288 0.208 30.15±1.98 1.357 0.195>3 cm 56 132.63±7.28 30.78±2.35浸潤深度 T1～T2 36 129.40±9.58 1.618 0.157 30.30±2.08 1.191 0.214 T3～T4 58 132.51±8.67 30.89±2.17淋巴結轉移 有 45 133.87±9.37 1.658 0.173 31.17±1.85 1.564 0.182無49 130.72±9.04 30.54±2.04分化程度 高分化 41 131.85±9.71 0.470 0.528 30.38±1.71 1.104 0.227中低分化 53 132.74±8.62 30.79±1.84

3 討 論

癌癥發生發展過程中,伴隨著一系列的基因突變,從而使腫瘤細胞獲得浸潤和轉移的能力,細胞的黏附及去黏附是其中的關鍵環節。CD44v6存在于細胞表面,是一種跨膜糖蛋白,因其細胞外區N端特殊的環狀結構可連接細胞外間質及基膜的透明質酸鹽,從而起黏附細胞的重要作用[4-5]。E-鈣粘蛋白(E-cadherin,E-cad)是一種鈣離子依賴性跨膜糖蛋白,影響胚胎發育中的細胞分化,參與組織器官的形成[6]。E-cad在各種上皮細胞組織中廣泛存在,是細胞間最重要的生理性黏附受體。研究[7-8]表明E-cad在胃癌、肝癌、乳腺癌和肺癌等癌細胞中表達降低,Kata Yama等[9-10]在惡性腫瘤患者患者血清中首次發現E-cad即sE-cad,推測該片段為癌細胞蛋白分解作用后分泌的結果。

CD44v6、E-cad基因在眾多腫瘤中均存在表達異常,趙新等[11]采用免疫組化法檢測E-cad、CD44v6在肝癌中的表達情況時發現,與相應的癌旁肝組織相比,E-cad表達明顯降低,CD44v6在大多數肝癌組織中呈陽性表達,陽性表達率為42.9%。魯豫等[12]檢測乳腺癌組織及癌旁組織中E-cad及CD44v6的表達也發現,乳腺癌組織中的E-cad蛋白的陽性表達率明顯低于癌旁組織,而CD44v6在乳腺癌組織的陽性表達率則顯著高于癌旁組織。

目前對CD44v6、E-cad的研究多關注腫瘤局部組織中表達情況[13-14],對血清中CD44v6、E-cad表達情況目前相關研究并不多。王娟[16]研究發現,乳腺癌患者中血清sCD44v6水平顯著高于健康對照組。于海東等[16]檢測胃癌患者中sCD44v6的表達水平時發現,胃癌患者sCD44v6水平顯著高于胃潰瘍組及健康體檢組,提示sCD44v6檢測有利于胃癌的篩查。本研究檢測了94例食管鱗癌患者sCD44v6、sE-cad血清水平表達情況,結果發現食管鱗癌患者中的sCD44v6、sE-cad血清水平明顯高于食管炎組和糜爛性食管炎組,而前二者間表達無顯著差異,提示sCD44v6、sE-cad血清水平的檢測有助于食管鱗癌的輔助診斷。何贏等[17]檢測食管鱗癌患者血清中sCD44v6、sE-cad 表達時發現 ,血清 sCD44v6、sE-cad在食管鱗癌組表達水平明顯高于正常食管組及糜爛性食管炎組。進一步研究發現sCD44v6、sE-cad血清水平與食管鱗癌各種臨床病理特征(包括淋巴結轉移、分化程度等)無顯著相關性,且食管鱗癌sCD44v6與sE-cad二者血清水平無相關性,此結果與何贏等[17]研究相似,考慮食管鱗癌患者sCD44v6、sE-cad的分泌到血清中含量極小有關,故無法顯示出其相關性。

[1]陳永倩,于衛華.食管癌患者生存質量國內外研究現狀及進展[J].齊魯護理雜志,2012,18(24):43.

[2]高峰,張磊,陳謙,等.CD44與p-糖蛋白在食管鱗狀上皮細胞癌中表達的相關性及臨床意義[J].中國醫藥導刊,2012,14(8):1399.

[3]Bendardaf R,Elzagheid A,Lamlum H,et al.E-cadherin,CD44s and CD44v6 correlate with tumour differentiation in colorectal cancer[J].Oncol Rep,2005,13(5):831.

[4]Afify A,Purnell P,Nguyen L.Role of CD44s and CD44v6 on human breast cancer cell adhesion,mig ration,and invasion[J].Exp Mol Pathol,2009,86(2):95.

[5]Jung T,Castellana D,Klingbeil P,et al.CD44v6 dependence of premetastatic niche preparation by exosomes[J].Neoplasia,2009,11(10):1093.

[6]田立立,王艷麗,黃韌.腫瘤轉移中E-鈣黏蛋白的調控[J].中國實驗動物學報,2012,20(3):81.

[7]李進展,王媛媛,詹曉芬,等.胃癌組織E-cadherin、βcatenin蛋白表達及意義[J].實用醫學雜志,2012,28(20):3345.

[8]張紅艷,李彥姝,王春玉,等.乳腺癌細胞系中雌激素下調E-鈣黏蛋白表達水平[J].解剖科學進展,2012,18(1):15.

[9]Boulos F,Fedda F.Clinical and biological significance of E-cadherin protein expression in invasive lobular carcinoma of the breast[J].Am J Surg Pathol,2011,35(1):154.

[10]Weiss J V,Klein-Scory S,Kǜbler S,et al.Soluble E‐cadherin as a serum biomarker candidate:Elevated levels in patients with late‐stage colorectal carcinoma and FAP[J].Int J Cancer,2011,15,128(6):1384.

[11]叢文銘,譚璐,王一,等.E-鈣黏蛋白和CD44v6在肝癌組織中的表達與肝癌浸潤侵襲性關系的研究[J].中華實驗外科雜志,2001,18(5):424.

[12]魯豫,李文濤,張斌,等.Pokemon、E-cadherin和CD44v6蛋白在乳腺癌組織中的表達及其與影像學特征的關系[J].中華實驗外科雜志,2010,27(8):1091.

[13]Weiss J V,Klein-Scory S,Kǜbler S,et al.Clinical Significance of Serum Soluble E-cadherin in Colorectal Carcinoma[J].Int J Cancer,2011,128(6):1384.

[14]Chang Y H,Pang S T,Chuang K L,et al.Low Serum Levels of Soluble CD44 Proteins in Advanced Bladder Cancer Patients[J].JTUA,2011,20(2):79.

[15]王娟.乳腺癌患者血清中 sCD44v6檢測的臨床意義[J].現代腫瘤醫學,2011,19(12):2451.

[16]于海東,辛華,王英.胃癌患者血清中骨橋蛋白和CD44v6檢測的臨床意義[J].中國全科醫學,2012,15(6):648.

[17]何贏,張軍,王書奎,等.食管鱗癌患者血清中可溶性CD44v6和E-鈣黏蛋白表達的臨床意義[J].浙江大學學報:醫學版,2012,41(3):305.