腦膠質瘤組織中核干細胞因子的表達*

林愛琴，程 森，壽記新#，馬 林，巫慶榮

1)鄭州鐵路職業技術學院護理學院 鄭州 450052 2)鄭州大學第五附屬醫院神經外科 鄭州 450052 3)鄭州大學醫院 鄭州 450052

膠質瘤亦稱神經膠質細胞瘤，起源于神經上皮細胞，是一種常見的顱內惡性腫瘤,具有高發病率、高復發率、高死亡率及低治愈率的“三高一低”的特點。核干細胞因子(nucleostemin，NS)是一個細胞核內的鳥嘌呤核苷酸結合蛋白，定位于干細胞和腫瘤細胞的細胞核，參與干細胞和腫瘤細胞的增殖調控[1-3]。目前已有研究[4-5]顯示，在多種癌組織中均有NS的高表達。作者觀察了NS蛋白在腦膠質瘤組織中的表達情況，報道如下。

1 材料、方法與結果

1.1材料取鄭州大學第五附屬醫院2009年6月至2011年6月手術切除的部分膠質瘤存檔蠟塊35例，其中男19例，女16例；年齡7～79歲，中位年齡42歲。按WHO 2000年分類和分級標準[3]：Ⅰ期3例，Ⅱ期9例，Ⅲ期19例，Ⅳ期4例。另取該院神經外科顱腦外傷行內減壓術的11例患者的正常腦組織作對照，其中男6例，女5例；年齡12～68歲，中位年齡39歲。

1.2NS檢測標本組織經生理鹽水沖洗、固定、脫水處理，二甲苯透明，石蠟包埋，4～6 μm厚度連續切片。采用免疫組化染色方法檢測NS蛋白。鼠抗羊IgG購自上海恒斐生物科技有限公司，即用型SABC免疫組化染色試劑盒購自上海聯碩生物科技有限公司，操作嚴格按照說明書進行。一抗按100倍稀釋。DAB顯色，蘇木素復染，中性樹膠封片，晾干后鏡檢。以PBS代替一抗作為陰性對照，以已知NS蛋白陽性的結腸癌組織切片為陽性對照。

1.3結果判斷標準NS蛋白陽性信號表現為胞核或胞質內棕黃色顆粒狀著色。選取5個以上高倍(×400)視野，計數不少于200個細胞，根據染色程度及陽性細胞百分率進行評分。①按染色程度進行評分：無染色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。②按陽性細胞百分率進行評分：<30%為1分，30%～70%為2分，>70%為3分。取兩項評分的乘積為最終評分，≤1分記為陰性，>1分記為陽性。

1.4 2組NS蛋白表達的比較見圖1。正常腦組織及膠質瘤組織中NS蛋白陽性表達率分別為9.1%(1/11)、57.1%(20/35)，腦膠質瘤組織中NS蛋白陽性表達率高于正常腦組織(χ2=7.789，P=0.005)。

圖1 NS蛋白的表達(SABC,×400)

1.5NS蛋白表達與腦膠質瘤臨床病理分期的關系

Ⅰ、Ⅱ期腦膠質瘤組織中NS蛋白陽性表達率為25.0%(3/12)，Ⅲ、Ⅳ期為73.9%(17/23)，Ⅲ、Ⅳ期腦膠質瘤組織中NS蛋白陽性表達率高于Ⅰ、Ⅱ期(χ2=7.704，P=0.006)。

2 討論

NS是一個細胞核內的鳥嘌呤核苷酸結合蛋白，以三磷酸鳥苷(guanosine triphosphate,GTP)依賴的形式穿梭于核仁和核質之間，這一動力學的穿梭過程調控細胞增殖[1-3]。 研究[6]表明干細胞和腫瘤細胞之間存在著許多相似的生物學特性。維持干細胞內環境穩定的關鍵是協調控制自我更新和保證分化，如果這種平衡被打破就易導致腫瘤的發生。目前已有研究[7]顯示NS蛋白可能充當調控正常干細胞和癌細胞增殖的雙面角色，腫瘤細胞和腫瘤組織中NS基因的高表達普遍存在。該研究證實：腦膠質瘤組織中NS蛋白的表達明顯高于正常腦組織，且臨床病理分期Ⅰ、Ⅱ期腦膠質瘤組織中NS蛋白的表達明顯低于Ⅲ、Ⅳ期，提示NS不僅與腦膠質瘤的發生有關，還與其惡性程度(臨床分期)密切相關。

總之，NS蛋白的表達與腦膠質瘤臨床分期之間的相關性使其有可能成為腦膠質瘤的又一個靶向治療基因，這為腦膠質瘤的臨床治療提供了一個新的研究方向。

[1] Tsai RY,McKay RD.A nucleolar mechanism controlling cell proliferation in stem cells and cancer cells[J].Gene Dev,2002,16(23):2991

[2] 蔡子微，鄭學芝，胡靜.乳腺腫瘤組織nucleostemin基因表達與臨床病理表現的關系[J].中國病理生理雜志，2007，23(11)：2191

[3] Liu SJ,Gai ZW,Liu YJ,et al.Role of nucleostemin in growth regulation of gastric cancer,liver cancer and other malignancies[J].World J Gastroenterol, 2004,10(9):1246

[4] Singh SK,Hawkin S,Clarke ID,et al. Identification of human brain tumour initiating cells[J]. Nature,2004,432(7015):396

[5] Ricci-Vitiani L,Lombardi DG, Pilozzi E,et al. Identicication and expansion of human colon cancer initiating cells[J]. Nature,2007,445(7123):111

[6] Godschmidt-Clermont PJ.Loss of bone marrow-derived vascular progenitor cells lead to inflammation and atherosclerosis[J].Am Hear J,2003,146(4 Suppl):S5

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